IQGAP1高表达抑制食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性

本文旨在研究含IQ模序的GTP酶激活蛋白1(IQ motif containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)过表达或基因干扰是否影响食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性。质粒转染构建IQGAP1高表达和基因干扰的稳定细胞系,并采用Western blot进行鉴定。然后,采用不同浓度(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)的顺铂处理细胞,通过3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑噻唑蓝[3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法检测IQGAP1高表达、IQGAP1基因干扰和相应对照细胞的活力,通过4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-Diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色和流式细胞技术检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果显示,IQGAP1高表达和基因干扰的稳定细胞系成功建立。在不同浓度的顺铂处理后,MTT结果表明,IQGAP1...     

由谷氨酸棒杆菌固定化细胞合成的谷氨酸和副产物

用谷氨酸棒杆菌固定化细胞可以大大提高谷氨酸的容积产量,但葡萄糖到谷氨酸的转化率仍较低(Amin Get al.Bioresourse Tech,1993,待发表).葡萄糖转化成谷氨酸的理论值是81.74％(w/w)。由于发酵中产生许多种副产物和有大量细胞生长,因此实际值要低些。这些副产物的合成和外界条件关系密切,特别是溶解氧浓度能影响谷氨酸终浓度和胞外氨基酸组成。     

酱油生产中用固定化乳酸细菌进行快速连续乳酸发酵

在酱油分批生产中,酱油醪的酶水解,乳酸发酵和乙醇发酵时间需要6个月。乳酸发酵在控制酱醪的pH和为酵母菌的乙醇发酵准备适合的条件是很重要的。乳酸发酵过程对酱油醪的质量控制也很重要,它能影响酱油的风味。研究表明,在酱油醪中加乳酸菌,对快速发酵是有效的。但需要在酱油醪发酵之前大量培养乳酸细菌。此外,乳酸细菌和酵     

工业应用上性能改进的工程酶

有四种工业上重要的酶种,经工程改造后改进了它们在工业应用上的性能。 枯草杆菌蛋白酶,通常加在洗衣粉中,去除蛋白质沾污效果很好。但漂白剂能使天然枯草杆菌蛋白酶失去活性。把解淀粉芽孢杆菌蛋白酶BPN'中对氧化敏感的222号甲硫氨酸换成抗氧化的氨基酸,如丙氨酸、丝氨酸或谷氨酰胺。这种酶在1M过氧化氢中仍保持活性。另外,用亮氨酸取代217位置上的酪氨酸残基,则BPN'对合成基质的水解能力比野生型酶高10倍以上。证明只要改变一个氨基酸,就能大大改进枯草杆菌蛋白酶BPN'在洗涤剂中的应用。     

在红霉素糖多孢菌的染色体上整合含eryCl基因的染色体DNA片段可提高红霉素产量

红霉素糖多孢菌(Saccharopolyspora eryth-raea)产生的红霉素A(ErA)是一种广谱大环内酯抗生素。其中eryC1基因可能与红霉素产生的调节有关。如果在野生型菌株的染色体上另外整合一段包括eryC1基因在内的DNA片段,可能提高红霉素A的产量。     

一种自溶芽孢杆菌环状糊精葡聚糖转移酶的提纯和性质,以及选择性形成β-环状糊精

环状糊精(CD)是一种带α-1,4键的均一的环状寡糖,通常由6—12个D-糖苦基残基组成。由6,7,8个D-糖苦基残基组成的CDs分别称做α-CD,β-CD和γ-CD。这些CDs可用于食品添加剂和制药剂等。它可以包装挥发性或不稳定物质,或形成稳定的包合配合物。     

用固定化黑曲霉完整细胞连续生产柠檬酸

本研究比较了两种固定化黑曲霉完整细胞的方法:黑曲霉KCU520在30℃培养5天,用无菌水制成分生孢子悬液(10~7—10~8孢子/ml)。①在400ml80％海藻酸钠溶液中加入孢子悬液600ml,然后逐滴加到1％CaCl_2溶液中,形成的颗粒在10℃固定1小时备用。②聚丙烯酰胺凝胶(PAG)固定化,在64ml孢子悬液(4℃)中加丙烯酰胺12克,双丙烯酰胺     

绝经后骨质疏松患者血清I型胶原氨基末端、I型胶原羧基末端及骨钙素的表达变化及临床意义

摘要 目的：探讨绝经后骨质疏松患者血清I型胶原氨基末端（NTx）、I型胶原羧基末端（CTX）及骨钙素（BGP）的表达变化及临床意义。方法：选取我院2017年8月-2022年8月收治的60例绝经后骨质疏松患者作为研究对象,将其分为观察组,另选取同期来我院体检的60名绝经后健康志愿者作为对照组。对比两组患者NTx、CTX、BGP表达水平,并建立受试者特征工作（ROC）曲线分析NTx、CTX、BGP对绝经后骨质疏松的诊断效能。3个月后对所有患者进行门诊复查随访,将症状明显明显减轻,X线检查明显改善,骨密度值明显增加的35例绝经后骨质疏松患者分为预后良好组,将其余25例未达到上述标准的患者分为预后不良组,对比两组患者临床一般情况,并应用Logistic回归分析NTx、CTX、BGP对绝经后骨质疏松的预后预测价值。结果：两组受检者NTx、CTX、BGP表达水平对比差异显著,观察组NTx、CTX高于对照组,BGP低于对照组（P＜0.05）; NTx、CTX、BGP三者联合对绝经后骨质疏松的诊断效能优于单一检测（P＜0.05）;预后良好组与预后不良组患者年龄、BMI、合并基础疾病、病程、Ca表达水平对比无明显差异（P＞0.05）,预后良好组与预后不良组患者病情严重程度、骨密度T值、雌二醇、血清NTx、CTX、BGP表达水平对比差异显著（P＜0.05）;logistic回归分析结果表明：CTX、BGP为绝经后骨质疏松的预后不良的独立影响因素（P＜0.05）。结论：绝经后骨质疏松患者血清I型胶原氨基末端、I型胶原羧基末端表达水平高于非骨质疏松群体,骨钙素低于非骨质疏松群体,三者联合可提升绝经后骨质疏松的诊断效能。另外,CTX、BGP作为绝经后骨质疏松的预后不良的独立影响因素,CTX水平越高、BGP水平越低可能预示患者预后不良,因此临床需针对此类患者及时改良治疗措施,提升其预后水平。     

枯草芽孢杆菌基因片段的琼脂糖凝胶电泳分离I．色氨酸C基因片段的分离

限制性核酸内切酶EcoRl酶切枯草芽孢杆菌(Bactllus subtlis) SR 22的 DNA,用琼脂糖凝胶电泳分离了色氨酸C基因(trpC)的片段,位于凝肢柱的10—11厘米处。冷冻挤压回收该段的DNA,荧电光分光光度计直接测定回收液中DNA的含量。电泳后比电泳前trpC 转化活性提高了37.7倍。这一段DNA的平均分子量为5.1×106,trpC片段的纯度为9.3％。