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目的:研究Snail的抑制是否能增加耐药结肠癌细胞对5-FU的敏感性,评估其可能的信号转导通路。方法:使用5-氟尿嘧啶耐药HCT116细胞(HCT116/5-FU),评估细胞形态及分子的变化。通过靶向人Snail基因小干扰RNA(si RNA)抑制Snail的表达。Annexin V/PI染色用于评估5-FU诱导的细胞凋亡。Western blot检测caspase以及可能的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和线粒体途径。结果:HCT116细胞对5-Fu耐药性的获得诱导了与EMT一致的形态学变化。RNA干扰沉默Snail逆转HCT116/5-FU细胞EMT并增加了5-FU耐药HCT116细胞对5-FU的敏感性。可能的机制涉及JNK与线粒体途径的激活。结论:EMT样表型的改变与HCT116细胞对5-FU耐药相关;si RNA介导的Snail下调可能是一个潜在的克服5-FU化疗耐药的治疗方法。 相似文献
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利用抗菌脂肽解决羧甲基壳聚糖纳米粒制备过程中出现的团聚问题,并考察其对羧甲基壳聚糖纳米粒的抑菌效果影响.通过抗菌脂肽乳化分散离子交联法制备羧甲基壳聚糖纳米粒,静置观察其稳定性,乌氏粘度计测定其粘度变化,扫描电镜考察其形态改变,比浊法测定不同浓度纳米粒溶液对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑制作用.实验发现,加入抗菌脂肽制备的纳米粒稳定性好,粘度降低,形态均一,并能显著增强对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑制作用.结果表明,抗菌脂肽的加入能很好的解决纳米粒制备过程中出现的团聚现象,而且其抑菌效果也有很大改善. 相似文献
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近年来食品安全问题层出不穷且呈多样化趋势,传统的检测方法已无法满足当今食品检测的需求,因此需要从食品安全检测的技术手段入手,采取更加精密的检测技术,来确保食品的质量和安全性,避免产生食品安全问题。微生物检测技术作为现阶段开展食品安全检测工作的重要手段和方法,肩负检测食品安全的重任。文章旨在对食品安全检测中微生物检测技术进行研究,充分挖掘微生物检测技术在食品安全检测中的应用路径,希望能推动我国食品安全检测工作的开展,也能切实为食品安全生产保驾护航。 相似文献
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EP-1是由炔雌醚和左炔诺孕酮按照1∶2的比例配制而成的一种用于鼠类不育控制的激素类复合不育剂,对鼠类的繁殖及繁殖行为等有一定影响,但对鼠类空间学习与记忆、焦虑行为等非繁殖行为的影响还没有报道。为此,用0(对照)、1.0、2.0、3.0 mg/kg剂量的EP-1对昆明小鼠(Mus musculus)进行灌胃处理,然后用Morris水迷宫和高架十字迷宫分别测定其空间记忆、焦虑行为。结果发现灌胃后15 d,剂量为2.0 mg/kg的EP-1使小鼠空间记忆能力显著下降,但30 d后其空间记忆能力有所恢复,表明2.0 mg/kg剂量的EP-1可以在一定时间范围内降低小鼠的空间记忆能力。但不同剂量的EP-1对小鼠焦虑行为无显著影响。该结果可以为从对非繁殖行为的影响的角度研究EP-1对鼠类的作用提供一定启示。 相似文献
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常用的基因敲除技术无法应用于某些特殊激酶的研究,旨为在植物病原真菌中建立基于蛋白激酶人工改造的analog-sensitive蛋白激酶研究系统,为蛋白激酶的研究提供新的思路和方法。采用网站预测蛋白激酶的“守门员”残基,用载体回补法对其进行突变获得相应的类似物敏感型(analog-sensitive,as)突变体gpmk1-as与pmk1-as,并检测类似物敏感型蛋白激酶的功能及其对ATP类似物抑制剂1-NM-PP1的敏感性。结果显示,Gpmk1与Pmk1的守门员残基分别为Q103和Q104,此位点在多个代表性真菌中均十分保守;类似物敏感型突变体gpmk1-as的菌落生长速度与野生型PH-1一致,均快于Gpmk1敲除突变体,Pmk1-as能够产生与野生型Guy11一样成熟的黑化附着孢,而Pmk1敲除突变体无法产生;在5 μmol/L的1-NM-PP1条件下,gpmk1-as的菌落生长速度下降,但PH-1正常生长,在10 μmol/L的1-NM-PP条件下,pmk1-as无法形成附着孢,但Guy11可以形成成熟的黑化附着孢。结果表明,Gpmk1和Pmk1的类似物敏感型蛋白激酶均能行使正常的... 相似文献
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目的 探查合肥地区孕期妇女生殖道感染特点,为临床诊断提供参考。方法 选取2017年11月—2018年9月来我院行孕期检查的孕妇969例,采集阴道分泌物分别进行镜检和五联检法联合检测,分析孕妇分泌物清洁度及病原结果。结果 969例孕妇阴道分泌物中,正常清洁度(Ⅰ~Ⅱ)占标本总数36.22%,病原体检出率6.84%,异常清洁度(Ⅲ~Ⅳ)占标本总数63.78%,病原体检出率44.66%,不同清洁度病原体检出率差异有统计学意义(Ps<0.05)。病原体阳性者300例,其中真菌感染158例(16.31%),细菌感染157例(16.20%),毛滴虫感染5例(0.52%),混合感染20例(2.06%)。清洁度Ⅰ~Ⅱ度白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶阳性率分别为17.23%、0.52%、0.93%,清洁度Ⅲ~Ⅳ度白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶阳性率分别为61.40%、8.36%、17.34%,检测结果差异有统计学意义(Ps<0.05)。结论 合肥地区孕妇阴道分泌物病原体检出率较高,湿片镜检和五联检法联合检测可提高阴道炎诊断的准确性,在临床工作中应加强对孕期妇女的健康指导及生殖道感染的监测,做到早发现、早诊断、早治疗。 相似文献
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为明确银川番茄(Lycopersicon esculentum)是否遭受了番茄斑萎病毒(TSWV)的危害, 采用国家标准TSWV RT- PCR检测技术对银川番茄上采集的14份疑似感染TSWV病叶样本进行分子鉴定, 对克隆得到的核衣壳蛋白基因N (Nucleocapsid)序列进行多序列比对和系统进化树分析, 随后对PCR阳性样本进行蛋白检测。结果表明, 14份病叶样本中有8份扩增出长度为394 bp的TSWV N基因序列, 且8条序列完全一致; 获得的银川番茄TSWV分离物与云南番茄、中国莴苣(Lactuca sativa)、中国鸢尾(Iris tectorum)和重庆辣椒(Capsicum annuum) TSWV分离物相对近缘, 与山东、黑龙江和北京等地及国外TSWV分离物相对远缘; 利用TSWV的抗体通过Western blot对8个PCR阳性样本进一步检测, 结果也证实8个阳性样本中存在TSWV感染。该研究首次通过分子鉴定及蛋白检测证明银川番茄上存在TSWV感染, 需要加快抗TSWV番茄品种的选育工作。 相似文献
80.
大鼠,小鼠胰蛋白酶的分离纯化及动力学性质 总被引:1,自引:0,他引:1
采用ST1-Sepharose 4B亲和层析的方法,从鼠新鲜胰脏中分离得到纯的胰蛋白酶。大鼠胰蛋白酶的比活为24615BAEEU/mg蛋白,总活性回收率47%;小鼠胰蛋白酶的比活为32768BAEEU/mg蛋白,总活性回收率55%。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,二者的等电点均匀呈现单一蛋白带,两者的分子量都是24kD。用等电聚焦电泳测定。二者的等电点均为pI9.5以上,对它们的动力学性质作了研 相似文献