α－天冬氨酰二肽酶基因的高表达和产物回收

构建了α天冬氨酰二肽酶基因（ｐｅｐＥ）与载体ｐＢＶ２２０连接的高表达重组质粒（ｐＢＶＰＥＰ,４３３７ｂｐ）。转化大肠杆菌后,目的基因表达为两种形式的产物,即细胞质中可溶性蛋白（～７５％）和包含体蛋白,共占细菌总蛋白的３０％左右。ＳＤＳＰＡＧＥ分析温敏诱导的表达蛋白,可以观察到约２７ｋＤａ的高表达蛋白条带,与提纯的酶带一致。用不同于以往的萃取包含体蛋白的方法,回收了包含体中９５％以上的表达蛋白。