TaqMan探针荧光PCR检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7方法的建立

肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagie Escherichia coli,EHEC)O157∶H7是一种重要的传染病病原菌,以EHEC O157∶H7标准菌株rfbE保守区设计一对特异引物和一条探针,建立了检测EHEC O157∶H7核酸的荧光定量PCR检测方法.实验结果表明荧光定量PCR检测方法特异性好,最低检测限为20 cfu/mL,线性范围是102～108 cfu/mL.稳定性试验表明批内变异系数和批间变异系数分别为2.06％和2.45％.     

孕小鼠注射海洛因对仔鼠体重、行为及肺中相关活性物质表达的影响

为了探讨海洛因对仔鼠行为、体重及肺发育中KGF、c-Fos蛋白和Bax蛋白表达的影响,对4组共48例受孕小鼠(Mus musculus)从第8 d开始,每天早晚分别注射0.2 ml浓度为1.0 g/L、1.5 g/L和2.0 g/L的海洛因溶液和等量的生理盐水直到小鼠分娩,观察测量仔鼠行为及体重变化,采用免疫组织化学染色和体视学半定量方法检测15 d胚胎、出生后1 d.7 d、15 d仔鼠的肺中KGF、c-Fos蛋白和Bax蛋白表达情况.结果表明,海洛因影响仔鼠的行为活动,实验组各发育期仔鼠的体重明显低于对照组,海洛因组各发育期仔鼠肺中KGF、c-Fos蛋白和Bax蛋白的表达强度与对照组相比显著增强(P＜0.01或P＜0.05),且随海洛因浓度的增大表达越强,但随着发育的进行,海洛因组仔鼠肺中KGF、c-Fos蛋白和Bax蛋白的阳性表达减弱.海洛因影响仔鼠的行为与体重,海洛因对各发育期仔鼠肺的损伤可能与肺组织中KGF、c-Fos蛋白和Bax蛋白表达的增强有关.     

金雕肺的组织结构及KGF、c-Fos和Bax的表达

为了解金雕(Aguila chrysaetos)肺的组织结构特征,观察角质细胞生长因子(KGF)、c-Fos蛋白和Bax蛋白在肺中的表达情况,应用生物显微技术和免疫组织化学方法观察了金雕肺的组织结构,检测KGF、c-Fos和Bax蛋白在肺中的表达.结果表明,金雕的肺由各级支气管及其周围的呼吸毛细管组成,肺房呈辐射状开口于三级支气管周围,呼吸毛细管相互吻合成网状,周围有丰富的毛细血管网.KGF、c-Fos和Bax在三级支气管、肺房和呼吸毛细管的上皮细胞中呈免疫反应阳性,三者的表达强度有差异.KGF、c-Fos和Bax可能发挥不同的功能,它们的协同表达可能调控鸟肺细胞的生长、发育及成熟.     

血液系统肿瘤患者侵袭性肺部真菌感染的外科手术治疗

目的探讨怀疑肺部有侵袭性真菌感染(invasivefungalinfection,IFI)的血液恶性肿瘤患者行手术切除肺部病灶的安全性及有效性。方法分析2005年4月～2009年7月之间因血液系统肿瘤合并疑似侵袭性肺部真菌感染而接受肺切除术的10名患者,总结术后并发症及死亡率来探讨手术的有效性和安全性。结果手术均在全身麻醉下进行,5例为胸廓切开术,5例为胸腔镜下手术。3例为病灶楔形切除术,7例为肺叶切除术。术后组织病理:确诊真菌感染6例(60%),慢性细菌感染1例,3例未见明确病原菌。术后4例出现并发症:3例为轻度并发症(30%),其中2例气胸后自行吸收,1例局限性肺不张;1例严重并发症为血胸(10%)。术后30d死亡率为10%。术后真菌复发率为16%。随访至2009年8月31日,中位随访时间为3.8个月(0.7～31.1个月),4例(40%)死亡,但手术相关死亡率为0%。结论手术切除不仅有助于明确诊断而且还可以清除病灶、防止IFI复发和允许进一步的免疫抑制治疗,手术本身是安全的。     

糖尿病对大鼠骨折愈合影响的实验研究

目的:观察糖尿病大鼠的骨折愈合过程,探讨糖尿病影响大鼠骨折愈合的可能的机制,为临床实践提供理论依据。方法:雄性Wister大鼠140只,随机分成二组,每组70只,A组为糖尿病骨折组;B组为非糖尿病骨折组。建立糖尿病动物模型后,无菌条件下在各组大鼠胫骨中点用手术方法制成骨折模型。术后1周、2周、4周、6周、8周各时间点进行X线检查,观察骨折愈合情况。术后1周、2周、3周、4周、6周、8周分别用ELISA法检测血清中IGF-1含量。分别在1、2、4、6、8周各时间点观察5只大鼠骨痂生长情况并取骨折断端组织行HE染色光镜观察。术后4周、6周、8周每组处死10只大鼠留取双侧胫骨标本,冷冻保存后集中进行生物力学检测。结果:1、大体标本观察结果:各时间点A组骨痂生长减缓延迟。2、X线结果:A组骨折愈合质量在各时间点均明显低于B组。3、生物力学测定结果:4周、6周、8周个时间点A组骨折处骨痂的机械强度均明显低于B组。4、组织学染色显示:术后各时间点1、2、4、6、8周A组与B组相比骨折处局部骨痂成熟延迟并且软骨细胞肥大。5、血清IGF-1含量测定:A组大鼠血清中IGF-1含量低于B组,且高峰延迟1周。结论:1.患有糖尿病后大鼠骨折愈合质量差,比较容易出现愈合延迟甚至不愈合;2.患有糖尿病的大鼠骨折后血清中的IGF-1表达明显低于对照组,且高峰推迟1周。     

文县疣螈消化道和肝脏的形态学及组织学观察

利用生物显微技术对文县疣螈的消化道和肝脏进行了观察.结果 表明:文县疣螈的消化道管壁由粘膜层、粘膜下层、肌层和外膜组成.食管粘膜为复层扁平柱状上皮,胃、小肠和直肠上皮为单层柱状上皮.各段皱褶丰富.胃有发达的腺体,肠的各段无多细胞腺体分布.杯状细胞丰富,其中十二指肠最少,直肠部最多,胃的各部无杯状细胞.肝小叶分界不清,肝...     

DNA条形码技术应用于人参鉴定

人参(Panax ginsengC.A.Meyer),被人们称为“百草之王”,是国内外常用的珍稀名贵中草药和高级滋补品,濒临灭绝,是急需进行资源保护的珍贵物种.随着中草药市场的国际化,由于利益的驱动,市场上伪混品屡见不鲜,对其正确鉴定就成为进行资源保护的首要条件.国内外学者对人参等药用植物资源的鉴定和可持续利用进行了广泛研究.DNA条形码(DNA barcoding)技术是分子鉴定的最新发展,即通过比较一段或几段通用DNA片段,对物种进行快速、准确的识别和鉴定,是近年来生物分类和鉴定的研究热点,在物种鉴定方面显示了广阔的应用前景.在分析传统的鉴定方法在适用范围和局限性的基础上,着重介绍了新兴的DNA条形码技术及其分析方法在人参鉴定上的特点及应用.     

联合用药成功治疗造血干细胞移植后真菌感染1例

1资料与方法患者男,36岁,因“确诊骨髓增生异常综合征(MDS)8年,拟行同胞全相合造血干细胞移植术”于2005年12月入院。入院后骨髓穿刺检查显示MDS已转化为急性髓性白血病,原始细胞占66%,复杂染色体异常:47,xy, 8,der(11)t(1;11)(q11;q25)[7]/46xy[2]。供者为患者胞兄,HLA-A、B、DR位点与受者完全相合,血型均为O型。预处理方案为改良的BuCy方案:阿糖胞苷2g/m2静脉滴注(-9d),马利兰(Bu)1mg/kg口服,每6h1次(-8~-6d)共12mg/kg,CY1.8g/m2静脉滴注(-5~-4d),甲环亚硝脲(Me-CCNU)250mg/m2口服(-3d);采用环孢菌素A(CSA) 霉酚酸酯(MMF) 短…     

壮药材火索藤的生药学研究

为建立火索藤(Bauhinia aurea)的鉴别方法及含量测定方法，解决其真伪辨别的问题，分析其药效不一的原因，该文采用基原鉴别、性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱法及高效液相色谱法对火索藤开展生药学研究。结果表明：(1)火索藤为多年生粗壮木质藤本，其茎、叶、花、果实表面均被红棕色茸毛。(2)茎横切面皮层可见大量石细胞群及晶纤维，髓部常见草酸钙簇晶、方晶；叶横切面显示其叶为异面叶，皮层可见草酸钙簇晶、方晶，韧皮部可见分泌腔断续排列成环，韧皮部外侧常见晶纤维。粉末中可见草酸钙簇晶、晶纤维、石细胞、具缘纹孔导管、非腺毛、气孔。(3)各批次火索藤TLC斑点与对照品金丝桃苷、落新妇苷、槲皮苷在薄层色谱图的相同位置上显相同颜色荧光。(4)落新妇苷和槲皮苷进样量分别在0.005 888～2.355μg(r=0.999 6)、0.039 55～1.582μg(r=0.999 8)与峰面积呈现良好的线性关系，加样回收率分别为96.42%、104.20%,相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)值分别为2.55%、1.79%。该文建立了火索藤的生药学鉴别方法和一种同时...