双重响应二硫化钼纳米载药体系的制备及其性能研究

摘要 目的：制备肿瘤微环境响应释放的靶向二硫化钼纳米载药体系,并评价其载药量和释药性能。方法：以水热法合成的MoS₂纳米片为基底,利用MoS₂纳米片上的S空缺位点连接硫辛酸聚乙二醇羧酸,然后通过酰胺反应连接精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）靶向分子,再连接上交联剂3-(2-吡啶二硫代)丙酸N-琥珀酰亚胺酯（SPDP）,得到药物载体MoS2-PEG-RGD-SPDP（MPRS）,MPRS进一步与巯基化的阿霉素（DOX）反应,形成MPRS-DOX纳米载药体系。通过透射电子显微镜（TEM）,X-射线光电子能谱仪（XPS）以及纳米粒度电位仪对合成的材料进行表征;利用紫外可见分光光度计测试MPRS的载药性能,采用荧光分光光度计考察MPRS-DOX的释药性能。结果：成功合成MPRS-DOX纳米载药体系,其粒径大小在200 nm左右,Zeta电位为+28.2 mV;其载药效率为86.8%,载药量为53.5%。体外释药实验表明,在10 mM 谷胱甘肽（GSH）和pH=5.5的条件下DOX释放量最多。结论：成功制备了粒径合适的MPRS-DOX纳米载药体系,MPRS-DOX具有GSH和pH双重响应性,可实现预期的模拟肿瘤微环境内控制释放药物。这种GSH和pH双重响应的纳米载药体系为新一代刺激响应型纳米载药系统的构建提供了新的思路。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D在酵母中的表达

从提取的HSV-1基因组中扩增得到编码gD蛋白胞外区1～314aa的基因gDt,将其插入毕赤酵母表达质粒pPIC9K的醇氧化酶(AOX1)启动子下游,构建携带gDt的重组载体,经电转化GS115菌株和G418筛选,得到了高效分泌表达gD蛋白的毕赤酵母菌株,表达量达到250mg/L,该目的蛋白可被gD单抗(1-I-9)特异性识别.表达产物经离子交换、金属螯合、分子筛柱层析纯化后得到纯度较高的重组蛋白.重组gD蛋白免疫BALB/c小鼠可诱生一定水平的特异性抗体,表明该蛋白具有较好的免疫原性,能够诱导小鼠产生体液免疫应答.     

RT—PCR测定mRNA的荧光定量分析

利用反转录毛细管ＰＣＲ技术,可合成代表特异ｍＲＮＡ的双链ＤＮＡ。在一定循环数内,ＰＣＲ产物的量与其模板ｃＤＮＡ即反转录中相应ｍＲＮＡ的浓度有关。溴乙锭嵌入ＤＮＡ双螺旋后,其荧光量子产率大为增加,因此可通过利用处在适当ＰＣＲ循环数中的ｃＤＮＡ浓度与在优选的激发光谱发现射波长下其荧光强度的线性关系,计算出所检测的ｍＲＮＡ表达量。     

白术内酯Ⅱ逆转M2型巨噬细胞极化调控PDL1表达抑制A549细胞迁移

探究白术内酯Ⅱ(atractylenolideⅡ,AT-Ⅱ)对M2型巨噬细胞极化与A549细胞迁移能力的影响,并分析其潜在机制。利用PMA将THP-1细胞诱导成M0巨噬细胞,然后加入IL-4和IL-13继续诱导为M2型巨噬细胞。利用Transwell小室将M2型巨噬细胞与A549细胞共培养,分别给予0、2.5、5μmol/L的AT-Ⅱ进行作用。采用MTT实验测定共培养条件下AT-Ⅱ对A549细胞活力的影响;采用Real-time PCR检测M2型巨噬细胞Arg-1的mRNA表达水平;采用ELISA检测共培养体系中TNF-α、IL-1β的含量;采用WB检测A549细胞TLR4、p-p65、NF-κB(p65)、PDL1的蛋白表达水平;采用划痕实验检测A549细胞的迁移能力。结果显示,共培养条件下,与对照组相比,实验组(2.5、5μmol/L)A549细胞活力降低(2.5μmol/L组P>0.05、5μmol/L组P<0.01);M2型巨噬细胞特异性基因Arg-1的mRNA表达水平显著降低(P<0.01);M1型巨噬细胞相关炎性因子TNF-α、IL-1β含量增多但无显著差...     

情景模拟在“医学微生物学”翻转课堂教学中的应用

翻转课堂是实现以学生为中心、提升学生自主学习能力的重要教学方法。随着线上课程的开展和学习平台技术的成熟,学生已能在课前获得足够的资源。然而,习惯于灌输式教育的学生仍缺乏自主学习的动力和方法。为此,我们教研团队尝试采用情景模拟的课堂活动设计来突破翻转环节实施的难点。研究发现,参考临床案例撰写剧本的过程能有效提升学生的自学兴趣和能力。学生课前在线预习时长和章节访问次数,以及参考资料阅读率和小组讨论时长均显著增加。课堂上,学生将课前所学知识在模拟实践中进行练习,促进了师生互动,帮助学生加深对知识的理解,提升学习成绩和满意度,同时也培养了学生的团队合作精神,建立临床思维,提升职业兴趣和能力。因此,情景模拟的融入实现了翻转课堂教学中“课前学”和“课上习”的教学闭环,为进一步推进翻转课堂的开展提供参考。     

木橑尺蠖发生规律及防治

木尺蠖Culculapanterinaria（BremeretGrey）近年在晋、冀、豫交界的黎城、涉县、武安、磁县、林州等县市普遍连续爆发,其幼虫为害树木和农作物叶片,造成大面积整株树木和农作物叶片被吃光,一般减产20％～50％,严重影响产量和质量,甚至有的地方连年无收,已成为该区农林业生产的重要害虫。木尺蠖为害农作物尚未见有报道。为摸清水尺蠖生物学、生态学特性,探讨经济有效的防治方法,于1990～1994年以涉县为基点,并于黎城、武安等地设点,结合群众性防治,采取黑光灯诱测、田间系统调查、室内外饲养观察和田间防治相结合的方法,对木…     

冀中低洼内涝地区小地老虎防治方法的初步探讨

小地老虎(Agrotis ypsilon Rottemberg),是冀中低洼内涝地区为害农作物的重要害虫。1957-1963年,我们在任丘县对此虫进行了糖液诱蛾与拌种防治试验,以及大面积试验和示范。现将部分结果,初步整理于后。 材料及处理方法     

机器人辅助妇科手术术中气腹对患者肝肾功能影响的初步临床研究

目的:研究机器人辅助妇科手术中气腹对术者肝肾功能的影响。方法:择期开腹妇科手术和机器人辅助妇科手术患者各20例,18-65岁,体重指数18-30,美国麻醉医师协会分级1-2级。手术均在全身麻醉下进行。采用丙泊酚(1.5-2 mg/kg)和芬太尼(2-4μg/kg)进行全麻诱导。麻醉维持采用七氟烷和瑞芬太尼。术中维持Narcotrend指数于40-60。分别于手术开始前和结束后30 min抽取静脉血,测定血谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮和肌酐水平并分析其变化。结果:与开腹手术相比,机器人辅助妇科手术气腹后血谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮和肌酐的升高更为明显(P均0.05)。结论:机器人辅助妇科手术中长时间气腹可能引起肝肾功能的异常。     

医疗不良事件和病人安全隐患报告系统的构建

通过介绍北京协和医院进行医疗不良事件和病人安全隐患事件报告系统工作实务,论述了在大型综合医院如何结合具体实际情况,探索有效的病人安全实践措施,旨在对医疗机构进行医疗不良事件报告系统和制度的建立、正常运行和完善有所借鉴。     

Signal-LMS:一种局部序列匹配相似度预测信号肽的方法

信号肽预测是蛋白质功能预测中最重要的问题之一。为了避免使用滑动窗口造成的样本不平衡等问题,序列比对方法被有效地运用到了信号肽预测中。考虑到信号肽是蛋白质序列局部片段所体现的生物特性,本文提出一种局部序列匹配相似度的方法来预测信号肽,在采用氨基酸相对疏水性编码方案的基础上,搜索蛋白质局部匹配子序列,根据替换矩阵BLOSUM62来度量两个蛋白质的相似性,最后采用k最近邻思想进行分类。在目前广泛使用的SwissProt数据集上进行实验,结果表明该方法具有一定的高预测率。