Frankia内生菌冷冻真空干燥保藏的研究

冷冻真空干燥保藏法(或低压冻干法)已具有70年历史,是微生物学中常用的保藏技术。可用于保藏多种微生物,如病毒、细菌、酵母等。作者试用于Frankia菌的保藏,共保藏了分离自赤杨、木麻黄、沙棘、杨梅的Frankia纯培养46株,经一年半的保藏,无论在存活率和固氮酶活性上,均获得了很好的结果。     

乌龟Chinemys reevesii胚胎发育的初步观察

乌龟产下来的受精卵是在母体内经历了卵裂、囊胚等发育阶段的。在其以后的胚胎发育过程中形成中胚层囊、卵黄囊血管区、羊膜和浆膜。较晚阶段的胚胎更有尿囊伸到浆、羊膜腔中,几乎包围了整个胚胎和卵黄囊、受精卵在人工设置的温床中,相对湿度80—84％,温度33±1℃—35±1℃,均可孵出稚龟。适宜孵化温度33±1℃,历时45—48天,比自然界提早出壳时间20—25天,这对提高孵化率、延长当龄稚龟的生长期和提高稚龟的成活率均有重要意义。     

致死量X线全身照射對大白鼠血管通透性的影響(I~(131)与S~(35)標記血漿蛋白自血液中的消失速度及其在體內各器官的分佈)

大白鼠接受1100倫琴X綫全身照射。照射後1—8晝夜時靜脈內注入標記(I~(131)及S~(35)血漿蛋白。注入後5、15、30分鐘及30分鐘後到360分鐘每隔半小時取血,2或6小時後殺死動物取其內臟,製備血液及組織標本,测其放射性。藉以觀察標記血漿白血液排出之速度及其在體內各器官中之分佈。實驗結果發現,照射後標記血漿蛋白自循環血液中排出加速,这一加速尤以4—6晝夜時为著。此時,標記血漿蛋白注入後30—120分鐘间,對照鼠的半排出時達照射鼠的1.44—2.7倍。照射後標記血漿蛋白在各器官中之含量亦見增多,這一增多尤以肺、腸、心、胃等器官为主。作者認为這些变化表明,致死量X綫全身照射引起了大白鼠血管對標記血漿蛋白通透性的增高。     

丹参多酚酸盐通过调控肿瘤坏死因子促进大鼠心肌修复的机制研究

摘要 目的：探讨丹参多酚酸盐（Sal B）对大鼠损伤后心肌修复的机制。方法：构建新生大鼠心肌细胞H9c2体外缺氧/复氧（H/R）模型,并分组为空白对照组、缺氧/复氧组（模型组）、缺氧/复氧+TNF-α表达质粒组(TNF-α组)和缺氧/复氧+Sal B处理组(Sal B组)。为检测细胞迁移实验,分组为对照组、模型组、H/R+DMSO+Vector组、H/R+Sal B+Vector组、H/R+DMSO+TNF-α组和H/R+Sal B+TNF-α组。通过MTT实验检测各组H9c2细胞活力;免疫荧光检测H9c2心肌细胞中TNF-α细胞表面受体TNFR-1和TNFR-2的表达水平;Western-blot和RT-qPCR检测TNF-α的mRNA和蛋白表达水平以及血管生成蛋白表达水平的影响;Transwell实验检测Sal B对缺氧/复氧处理的H9c2细胞迁移的影响。结果：与对照组相比,模型组H9c2心肌细胞的活力显著下降（P<0.05）;与模型组相比,Sal B组中H9c2心肌细胞的活力显著升高（P<0.05）。免疫荧光检测结果显示,H9c2心肌细胞质膜上TNFR-1和TNFR2均有表达。Western-blot和RT-qPCR结果显示,与模型组相比,Sal B组中H9c2心肌细胞的TNF-α的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),TNF-α组H9c2心肌细胞的TNF-α、Ang-2和VEGF-1蛋白的表达水平均显著升高（P<0.01）,Ang-1蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。细胞迁移结果显示,与对照组相比,模型组和H/R+DMSO+Vector组H9c2细胞迁移能力显著下降（P<0.01）;与H/R组和H/R+DMSO+Vector组相比,H/R+Sal B+Vector组、H/R+DMSO+TNF-α组和H/R+Sal B+TNF-α组H9c2细胞迁移能力显著升高（P<0.05）。结论：Sal B能够通过上调TNF-α调控血管生成蛋白表达和促进H/R H9c2心肌细胞迁移,从而促进血管生成。     

光遗传技术通过Wnt/β-Catenin通路对新生神经元的影响*

目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路光遗传技术在促进新生神经元成熟中的作用。方法:从胎鼠大脑皮层中提取神经干细胞,用携带DCX-ChR2-EGFP基因的慢病毒感染神经干细胞,观察神经干细胞分化为新生神经元后DCX的表达。实验细胞分为3组(n=9):对照组、NSCs+EGFP和NSCs+ChR2组。其中对照组为正常培养的NSCs(NSCs组);NSCs+EGFP组为携带DCX-EGFP基因慢病毒感染神经干细胞组;NSCs+ChR2组为携带DCX-ChR2-EGFP基因慢病毒感染神经干细胞组。病毒感染后48 h后连续3 d行470 nm蓝激光照射,然后检测各组NeuN⁺阳性细胞(成熟神经元标志物)的密度和NeuN⁺/Hoechst比值情况;Western blot检测各组成熟神经元相关蛋白MAP2、NeuN、Neurog2、NeuroD1和GluR2蛋白表达水平和Wnt/β-catenin通道相关蛋白TCF4和β-catenin蛋白的表达水平。用L-型钙通道阻断剂100 μmol/L维拉帕米或50 μg/ml的β-catenin抑制剂Dkk1处理NSCs+ChR2组细胞,然后行Western blot检测各组MAP2、NeuN、Neurog2、NeuroD1和GluR2蛋白表达水平。结果:连续3 d 470 nm蓝激光照射后,NSCs+ChR2组中NeuN⁺阳性细胞密度(成熟细胞)和NeuN⁺/Hoechst明显高于NSCs组和NSCs+EGFP组(P均＜0.05);Western blot检测的MAP2、NeuN、Neurog2、NeuroD1、GluR2蛋白及Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、TCF4表达水平均明显高于NSCs组和NSCs+EGFP组(P均＜0.01);L-型钙通道阻断剂维拉帕米或β-catenin抑制剂Dkk1处理NSCs+ChR2组细胞后MAP2、Neurog2、NeuroD1和GluR2蛋白表达水平明显下降(P均＜ 0.01),NeuN表达水平也下降(P＜0.05)。证明ChR2通道蛋白开放产生阳离子内流促进新生神经元成熟,是通过Wnt/β-catenin信号通路实现的。结论:光遗传学方法通过Wnt/β-catenin信号通路促进新生神经元成熟。     

喘息的"度"与支气管哮喘阶梯治疗

目的:探讨掌握喘息"度"与支气管哮喘阶梯治疗的关系。方法:充分掌握支气管哮喘分级治疗方案和支气管哮喘病情,将喘息"度"细致化,与分级治疗用药"度"密切结合起来,对于完全理想的控制哮喘将会起到极大的指导作用,对于升阶梯和降阶梯治疗都会起到重要而细致的指导作用。必须将平喘治疗措施置于患者全身病情变化及总体治疗之下,会取得更加理想的哮喘控制效果。而强化支气管哮喘患者教育在支气管哮喘理想治疗中占据极为重要的地位,甚至直接关系到哮喘控制的持久性和稳定性。应得到高度重视。结果:喘息"度"与支气管哮喘的发作程度密切相关,准确把握并分级十分重要。结论:准确把握喘息"度"并与支气管哮喘分级治疗方法结合,将对稳定平息支气管哮喘起到意想不到的效果。     

肾康注射液对链脲佐菌素诱导的大鼠DN的作用研究

目的:研究肾康注射液(SKI)对糖尿病肾病(DN)的作用。方法:采用大鼠腹腔注射链脲佐菌素65 mg/kg体重建立DN大鼠模型,SKI高、中、低分别腹腔注射SKI 10 m L/kg,5 m L/kg,2.5 m L/kg,2次/天;正常组和模型组分别给予生理盐水5 m L/kg,2次/天;8周后,观察、测量相应生化和病理等指标。结果:SKI可明显增强DN大鼠肾脏对血肌酐和血尿素氮的清除率,显著降低血液中总胆固醇、甘油三脂和低密度脂蛋白的含量和升高血液中高密度脂蛋白含量,显著升高血清中T-SOD和CAT的活力,降低血清中NO及MDA含量和降低血清中NOS的活力,显著改善糖尿病引起的肾组织损伤。结论:SKI对治疗DN的治疗作用是肯定的其主要表现在改善血脂代谢紊乱,增强机体抗氧化应激能力及增强肾脏对肌酐和尿素氮的清除能力进而改善肾脏损伤。     

基于成熟林生物量整合分析中国森林碳容量和固碳潜力

森林是重要的陆地生态系统碳汇.已有研究认为,全球森林碳容量和固碳潜力巨大,但未见专门针对中国森林进行定量评价其碳容量和固碳潜力的研究.本研究收集整理了文献发表和野外调查获得的中国森林生物量数据5841条,并从这些数据中选取了338个林龄在80年及以上的森林样点,建立了中国成熟林生物量数据集.通过分析中国成熟林碳密度的空间格局和影响因素,以成熟林碳密度为参考水平,采用碳密度-气候关系模型、反距离插值法及局部薄盘样条插值法,获得并统计分析了中国森林碳容量,结合中国第六次森林资源清查数据,进一步评估了中国森林固碳潜力.结果显示,中国成熟林碳密度与气温、降水和林龄呈正相关,其水平地带性和垂直地带性均能够从气温和降水的限制性角度得到合理解释.相对保守地来说,中国现有森林碳容量为19.87 Pg C,固碳潜力为13.86 Pg C;其中,亚热带森林是我国森林碳容量和固碳潜力最大的生态区.由此可见,充分发挥我国现有森林的碳吸存能力,减少对现有森林碳库的干扰,是继造林再造林之外的陆地生态系统增汇的又一可以选择的重要技术途径.     

RNA结合蛋白QKI-5在前列腺癌中的表达分析

目的:检测前列腺癌及癌旁正常前列腺组织中RNA结合蛋白QKI-5的表达情况并分析其临床意义。方法:收集前列腺癌及与之匹配的癌旁组织124例,通过免疫组化染色、Western blot、实时PCR方法检测其QKI-5的表达水平,并分析QKI-5的表达与前列腺癌临床病理特征的关系。结果:前列腺癌组织中QKI-5蛋白及m RNA表达水平均明显低于癌旁正常前列腺组织,并且随着Gleason评分的增高而降低(P0.05)。前列腺癌组织中QKI-5的表达与其Gleason评分(r=-0.939,P0.05)、TNM分期(r=-0.913,P0.05)、血清PSA值(r=-0.743,P0.05)均密切相关。结论:QKI-5在前列腺癌的发生发展过程中可能起抑癌基因的作用,并可能作为前列腺癌的诊断、病情分析和预后评估的参考指标。