β-葡萄糖苷酶新型高产菌株筛选及其液态发酵培养基的优化

从腐败的玉米秸秆上分离得到一株能够发酵生产β-葡萄糖苷酶的弯颈霉属的柱孢弯颈霉菌株syzx4, 使用统计学方法对其发酵培养基进行优化。在单因子实验的基础上使用Plackett-Burman法对碳源、氮源和无机盐进行产酶显著性分析, 培养基组分对β-葡萄糖苷酶生产影响的排序为: 气爆秸秆粉(TCS)>KH2PO4>黄豆饼粉(SM)=(NH4)2SO4。响应面模型结果表明最优培养基为: TCS 25.72 g/L, SM 6.82 g/L, KH2PO4 1.90 g/L, (NH4)2SO4 3.21 g/L, 其余成分保持原始浓度。在30 °C发酵8 d, β-葡萄糖苷酶的活性可以达到2.21 U/mL。     

铜绿假单胞菌耐热亮氨酸氨肽酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及表达产物的酶学特性鉴定

氨肽酶在食品加工、饲料生产、生物活性肽制备等多个领域被广泛应用,尤其是耐热氨肽酶的应用前景更加广阔。目前,有关铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)耐热氨肽酶基因的成功克隆和表达的研究较少,本研究将源自铜绿假单胞菌GF31的亮氨酸氨肽酶基因aps进行密码子优化,通过全基因合成得到aps序列并构建周质表达载体pET22b(+)-pelB-aps,在大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta gami2(DE3)中进行表达。纯化后的重组菌所产亮氨酸氨肽酶比活力为6.8 U/mg,最适反应温度和pH值分别为80℃和8.0;在50℃～70℃或pH 7.0～9.0下孵育1 h后该酶仍保持80%以上的活力;Co²⁺对其酶活力有较强激活作用,Fe²⁺、 Ni²⁺、 Zn²⁺、 β-巯基乙醇、 DTT、 EDTA、 1,10-邻菲咯啉和Bestatin对其有较强的抑制作用;该酶对Leu-pNA和Met-pNA的水解效果较好,对Ala-pNA和Arg-pNA也有一定水解能力,其中...     

亚热带米槠林不同更新方式对土壤可溶性有机质降解性的影响

可溶性有机质(DOM)的生物降解性影响着土壤有机质的存留和释放,对深入认识森林土壤养分循环意义重大。为探究森林更新对土壤DOM降解特征的影响,选取亚热带地区米槠天然林(NF)、米槠次生林(SF)和米槠人工促进天然更新林(AR)土壤DOM溶液为研究对象,进行室内降解(42 d)试验。结果表明: 1)3种林分土壤可溶性有机碳(DOC)的降解率和易降解DOC的比例均为SF>AR>NF;可溶性有机氮(DON)和微生物生物量碳(MBC)是显著影响易降解DOC比例的因子;2)难降解组分占3种林分土壤DOC的大部分(72.3%～94.6%),其周转时间长,有利于稳定土壤有机质(SOC)的形成;3)土壤DOM最初的腐殖化指数(HIX_em)会影响易降解DOC的周转时间。DOM光谱结构随降解过程呈现动态变化,说明DOM中易降解组分被消耗完后,微生物会转而降解芳香类和疏水性物质以获取碳源。综上,米槠天然林更新为次生林和人促林后增加了易降解DOC的比例,提高了土壤DOM生物可降解性,不利于SOC的积累。     

马尾松与芒萁鲜叶及凋落物水溶性有机物的溶解特征和光谱学特征

为探讨福建省三明市马尾松人工林淋溶液中水溶性有机物(DOM)的溶解特征和光谱学特征,以马尾松(Pinus massoniana)和芒萁(Dicranopteris dichotoma)鲜叶、未分解层(L层)和半分解层(F层)凋落物为研究对象进行室内淋溶,对淋溶液中的水溶性有机碳(DOC)、水溶性有机氮(DON)与水溶性有机磷(DOP)含量和紫外光谱(SUVA)、荧光光谱指标和红外光谱(FTIR)等特征进行研究。结果表明,在24 h内,随着淋溶时间的延长,DOM含量呈现有波动的上升趋势;芒萁除鲜叶的DOC含量显著高于马尾松外(P0.01),其余DOM含量均小于马尾松。两植物F层DOM的SUVA值和腐殖化指标(HIX)都显著高于鲜叶和L层(P0.05),表明F层的芳香性化合物含量和腐殖化程度越来越高。DOM的同步荧光峰值显示淋溶液中含有类蛋白和类富里酸荧光团。两植物的红外光谱显示有5个相似的吸收谱带,强度最大的吸收来自于H键键合的-OH的伸缩振动,同一植物3种样品之间红外吸收的差异证明从鲜叶-L层-F层凋落物的共轭体系逐渐增大,结构更复杂。因此,随分解进程两植被DOM的化学结构越来越复杂;马尾松较芒萁含有更多的DON和DOP,这一方面为微生物提供了更多的养分,另一方面又增加了底物分解的难度。     

不同人胚胎干细胞系向限定性内胚层分化能力存在差异

研究不同的人胚胎干细胞系向限定性内胚层细胞分化能力是否存在差异,并尝试寻找造成差异的原因.基于已建立的人胚胎干细胞库资源和限定性内胚层定向诱导分化体系,流式检测诱导分化3天后10株细胞系Sox17的阳性比率发现其值在60%到80%之间波动,而SSEA4的阳性比率在人胚胎干细胞系中不存在明显差异.基因表达谱结果显示像Sox17,Foxa2等内胚层标记在这些细胞之间不存在显著的差异,而像MEG3和SNORD114-3在差异细胞系之间和同株细胞早晚期代数之间存在表达差异.结果提示不同的人胚胎干细胞系向限定性内胚层细胞分化能力存在着差异,推测这些差异可能与MEG3和SNORD114-3的差异表达相关.     

华北蹄盖蕨的引种栽培研究

华北蹄盖蕨(ＡｔｈｙｒｉｕｍｐａｃｈｙｐｈｌｅｂｉｕｍＵ.Ｃｈｒ.)是我国北方常见的蕨类植物,野生资源极为丰富。本种株型丰满、叶端微垂,叶色青翠或叶轴玫瑰紫色,夏秋间由白变红褐色的马蹄形孢子囊群布满叶片背面,具有较高观赏价值。为此,我们自1994年起,在进行野生观...     

缬沙坦联合通心络胶囊对糖尿病心肌病患者血清肌钙蛋白及SOD水平的影响

目的:探讨缬沙坦联合通心络胶囊对糖尿病心肌病患者血清肌钙蛋白,SOD及生活质量的影响。方法:收集我院就诊或住院治疗的60例糖尿病心肌病患者,随机分为实验组和对照组,每组30例。对照组患者给予缬沙坦口服治疗,实验组患者在此基础上给予通心络治疗。检测并比较两组患者治疗前后血清cTnI、生活质量、SOD、运动耐量的变化情况。结果:与治疗前相比,两组患者治疗后血清cTnI和生活质量评分均下降,而SOD和运动耐量水平均升高,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组相比,实验组患者治疗后血清cTnI和生活质量评分较低,而SOD和运动耐量水平较高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:缬沙坦联合通心络胶囊能够降低糖尿病心肌病患者cTnI、生活质量评分,升高其SOD以及运动耐量水平,对临床具有指导意义。     

中国株HIV-1核心蛋白真核表达载体的构建与表达

运用限制性内切酶XbaⅠ、SalⅠ对pKSGAG进行双酶切,获得HIV-lgag基因,并与真核表达载体pCI—neo连接,构建含有中国流行株HIV-1核心蛋白真核表达载体pCI—neoGAG。经XbaⅠ／SalⅠ双酶切及测序鉴定证实,成功地构建了HIV-1核心蛋白真核表达载体pCI-neoGAG。通过脂质体将pCI—neoGAG转染入p815细胞,G418筛选4周后,使用间接免疫荧光方法检测表达产物。结果表明所构建的HIV-1核心蛋白真核表达载体能在p815细胞中高效表达,为下一步进行HIV-1 DNA疫苗研究奠定了基础。     

大口鲇致病菌的分离鉴定、系统发育分析及相关特性的研究

从四川鲶科鱼类养殖场濒死的大口鲇(Silurus meridionalis Chen)体内分离到3株优势菌,人工感染试验表明菌株TWN3致病性最强。通过形态学观察、生理生化测定,结合DNA的G Cmol%、16S rDNA序列同源性和系统发育分析,确定TWN3为普通变形杆菌(Proteus vulgaris)。再根据生理生化特性,可进一步确定TWN3属于普通变形杆菌(Proteus vulgaris)中的P.vulgarisBG3。该菌株不溶血;对庆大霉素等4种药物敏感;对小鼠有较强的致病性。生长特性研究表明,该菌最适生长温度37℃、最适pH6.0、37℃时盐度1.5%生长最适。普通变形杆菌致病性广泛,但作为养殖大口鲇的致病菌国内外未见报道。另外,对该菌的分类学研究、生长特性、感染途径及防治进行了讨论。     

乳腺癌患者加用重组人粒细胞集落刺激因子骨髓支持治疗的效果探讨

目的:探讨乳腺癌患者加用重组人粒细胞集落刺激因子(rh G-CSF)骨髓支持治疗的临床效果。方法:将我院2011年1月-2012年12月收治的106例乳腺癌患者随机分为对照组及观察组,每组53例。两组均给予常规化疗治疗,观察组在此基础上加用rh G-CSF骨髓支持治疗,比较两组治疗前后血象变化及骨髓毒性反应情况。结果:对照组治疗后WBC、ANC、Plt及Hb与治疗前比较均有显著降低,且差异具有统计学意义(P0.05);而观察组治疗后以上血象指标较治疗前变化不明显(P0.05),但与对照组同期比较具有显著性差异(P0.05);观察组骨髓毒性反应较对照组轻,Ⅱ度以上发生率为26.42%,显著低于对照组的47.17%(P0.05)。结论:乳腺癌患者加用rh G-CSF骨髓支持治疗可明显缓解患者化疗后的骨髓抑制反应,减少其骨髓毒性反应发生,对化疗导致白细胞数减少具有较好的预防和临床应用价值,值得进一步推广和应用。