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Wang F Liu P Zhang Q Zhu J Chen T Arimura SI Tsutsumi N Lin J 《The Plant journal : for cell and molecular biology》2012,72(1):43-56
The balance between mitochondrial fission and fusion is disrupted during mitosis, but the mechanism governing this phenomenon in plant cells remains enigmatic. Here, we used mitochondrial matrix‐localized Kaede protein (mt‐Kaede) to analyze the dynamics of mitochondrial fission in BY‐2 suspension cells. Analysis of the photoactivatable fluorescence of mt‐Kaede suggested that the fission process is dominant during mitosis. This finding was confirmed by an electron microscopic analysis of the size distribution of mitochondria in BY‐2 suspension cells at various stages. Cellular proteins interacting with Myc‐tagged dynamin‐related protein 3A/3B (AtDRP3A and AtDRP3B) were immunoprecipitated with anti‐Myc antibody‐conjugated beads and subsequently identified by microcapillary liquid chromatography–quadrupole time‐of‐flight mass spectrometry (CapLC Q‐TOF) MS/MS. The identified proteins were broadly associated with cytoskeletal (microtubular), phosphorylation, or ubiquitination functions. Mitotic phosphorylation of AtDRP3A/AtDRP3B and mitochondrial fission at metaphase were inhibited by treatment of the cells with a CdkB/cyclin B inhibitor or a serine/threonine protein kinase inhibitor. The fate of AtDRP3A/3B during the cell cycle was followed by time‐lapse imaging of the fluorescence of Dendra2‐tagged AtDRP3A/3B after green‐to‐red photoconversion; this experiment showed that AtDRP3A/3B is partially degraded during interphase. Additionally, we found that microtubules are involved in mitochondrial fission during mitosis, and that mitochondria movement to daughter cell was limited as early as metaphase. Taken together, these findings suggest that mitotic phosphorylation of AtDRP3A/3B promotes mitochondrial fission during plant cell mitosis, and that AtDRP3A/3B is partially degraded at interphase, providing mechanistic insight into the mitochondrial morphological changes associated with cell‐cycle transitions in BY‐2 suspension cells. 相似文献
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小脑(cerebellum)为调节肌肉紧张程度,维持平衡的重要器官。切除或损伤动物小脑是了解小脑机能的常用手段。开颅切除兔小脑(全部或一侧)的方法已有介绍(见人体及动物生理学实验),我们推荐一种运用颅外穿刺术破坏兔一侧小脑的方法。器材1号注射针头,乙醚等。方法和原理剪去兔后头部的毛,用乙醚轻度麻醉。为了确定穿刺部位(或穿刺点),在头皮上绘出下列标志线。(a) 中线:自枕骨结节下缘正中至眶后缘水平的直线;(b) 横线: 相似文献
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