斜卧青霉A10产纤维素酶的酶学性质研究

以斜卧青霉（Penieillium decumbens）A10为出发菌株,经450Gy ^60Coγ-射线诱变处理,选育出一株具有较高纤维素酶活力且传代稳定的正突变株A50,发酵60h后,其CMC酶活和滤纸酶活分别为27．28IU／mL和1．98IU／mL,较出发菌株A10分别提高了33．2％和45．59％。对突变株A50的产酶组分进行研究,通过SDS—PAGE电泳分析,从蛋白质水平上证明突变株A50确实是A10在遗传物质上发生改变的菌株,其CMC酶活最适作用pH值为4．0,最适作用温度为60℃;而滤纸酶活的最适作用pH值为5．2,最适作用温度45℃,二者在一定范围内具有较高的稳定性。     

木酮糖激酶表达水平对酿酒酵母木糖代谢产物流向的影响

在酿酒酵母中分别引入真菌和细菌的木糖代谢关键酶,木糖还原酶基因XYL1、木糖醇脱氢酶基因XYL2和木糖异构酶基因xylA. 并在此基础上以共转化策略超表达下游关键酶木酮糖激酶基因XKS1. 与亲本菌株相比,用pMA91和YEp24质粒表达XKS1的重组菌株,木酮糖激酶（xylulokinase,XK）活性分别提高了14和6.7倍. 在限氧条件下,重组菌株对木糖和葡萄糖的共发酵结果显示,表达XYL1,XYL2以及XKS1的重组菌株HSXY-251木糖消耗为12.4 g/L,提高了120.9%,乙醇产量达到9.4 g/L,提高了36%,副产物木糖醇产量为0.7 g/L,下降了84.9%.     

不产氧光合细菌的分类学进展

不产氧光合细菌(APB)一直是研究生命起源与进化、光合作用和固氮机理的良好模式生物.近年来,APB资源研究发展迅速,不断发现新的物种、模式种及特殊功能物种,不断提出新的分类单元,APB分类系统发生了较大变化,同时引起了一定混乱.本文对不产氧光合细菌定义、分类系统和分类指征最新进展进行了系统述评,对分类系统中存在的问题和发展趋势也进行了评述.     

FluG-BrlA途径参与构巢曲霉无性发育机制的研究进展

构巢曲霉是丝状真菌的模式生物,已对其无性发育机制进行了比较充分的研究。本文以FluG-BrlA途径参与构巢曲霉无性发育机制的研究为切入点,综述了构巢曲霉无性发育中心调控路径中各主要成员如brlA、abaA、wetA,中心调控路径修饰基因如stuA、medA及中心调控路径激活因子fluG、flbA-E的研究进展,绘制出构巢曲霉无性发育相关基因遗传位置模式图。研究将为其它丝状真菌无性发育机制的研究提供参考。     

纤维素酶在木质纤维素转化产糖技术中的开发与应用

2009年,中国超过了美国成为了世界上最大的汽车市场。同时,中国的液体燃料的需求也随之持续增长,2009年中国原油对外依存度已经超过了52％。这种高度的对外依存度直接威胁了中国经济和社会的稳定。发展中国的原油可替代液体燃料,特别是可再生、“碳中性”的生物乙醇,对于解决我国能源、环境等问题,     

纤维素糖化技术的瓶颈与酶活表征

纤维素作为自然界广泛存在的一种可再生资源,是重要的可替代工业原料,因此,纤维素糖化技术研究始终是人类关注的热点问题。针对天然纤维素生物降解研究中所面临的关键性问题,借鉴淀粉糖化技术的研究思路,比较和探讨了影响纤维素生物降解的技术瓶颈和真纤维素酶活性的表征,提出了纤维素生物转化和纤维素酶筛选的新途径。     

绿色木霉产生的葡萄糖苷酶类

由绿色木霉(Trichoderma viride)A10菌株的粗酶制剂中分离纯化得到 6个β-葡萄糖苷酶组分,对它们的物理、化学性质和对20种糖苷类化合物的水解作用进行了测试。其中5个组分都是既能水解β-构型的糖苷化合物,又能水解α-构型的糖苷化合物,表明它们对α-、β-异头专一性的要求并不象文献中报导的那样十分严格,对糖基和糖苷配基专一性的要求也并不十分严格。由此,对葡萄糖苷酶类的命名分类方法提出了讨论,并对在纤维素酶系研究中纤维二糖酶活力的检测方法进行了讨论。     

产耐碱性β-1,4-聚糖酶芽孢杆菌A-30液体发酵研究

研究了搅拌转速、pH控制以及结合摇瓶发酵过程中不同时间硫酸铵的补加对β-1,4-聚糖酶形成的影响,优化得到A-30的β-1,4-聚糖酶分批发酵操作条件和初步优化了(NH₄)₂SO₄流加发酵条件。研究结果显示麸皮表面有大量A-30菌体细胞的吸附,搅拌转速对菌体吸附和β-1,4-聚糖酶的形成有明显影响;发酵过程中pH下降有利于β-1,4-聚糖酶形成。采用了初期以5mL/h的速率恒速流加,后期测定(NH₄)₂SO₄浓度进行调整的流加方法,使木聚糖酶活达到616IU/mL,纤维素酶活达到1.33UI/mL。     

产耐碱性β-1，4-聚糖酶芽孢杆菌A-30液体发酵研究

研究了搅拌转速、ＰＨ控制以及插瓶发酵过程中不同时间硫酸铵的补加对β－１,４聚糖酶形成的影响,优化得到Ａ－３０的β０１,４－聚糖酶分批发酵操作条件和初步优化了（ＮＨ４）２ＳＯ４流加发酵条件。研究结果显示麸皮表面有大量Ａ－３０菌体细胞的吸附,搅拌转速对菌体吸附和β－１,４－聚糖酶的形成有明显影响;发酵过程中ＰＨ下降有利于β－１,４－聚糖酶形成。采用了实期以５ｍｌ／ｈ的速率恒速流加,后期测定（ＮＨ４）２     

筛选在非生长条件下突变体酶的新方法*

利用双层平板筛选由定向进化方法产生的瑞氏木霉内切葡聚糖酶III (EGIII)突变体文库 ,根据水解圈在平板上形成的速度判断酶活高低。采用这种方法在不同的筛选条件下分别筛选得到了几株在低温或碱性条件下高活性的EGIII突变体。比色法测定的酶活性与平板筛选结果一致。该方法的建立将使通过定向进化方法改造现有蛋白质 ,获得具有新的优良性状的工业用酶的途径得到更加广泛的应用.