活细胞内以光漂白荧光损失(FLIP)技术分析HuR蛋白的应激动力学行为

人类抗原R(human antigen R,HuR)是一种多功能RNA结合蛋白,参与细胞应激颗粒(stress granules,SGs)的构成。SGs是细胞在受到外界环境刺激时在胞浆中形成的颗粒状结构。该研究是利用光漂白荧光损失(fl uorescence loss in photobleaching,FLIP)技术对活细胞内的HuR蛋白颗粒进行应激动力学分析。首先,利用脂质体将RFP-HuR重组质粒瞬时转染入HeLa细胞,以Western blot和细胞免疫荧光实验确定是否实现对于HuR蛋白的红色荧光蛋白(red fl uorecent protein,RFP)标记;然后以405 nm激光束脉冲式重复光漂白HuR应激颗粒,分别监测同一漂白细胞内的其他HuR颗粒以及核内荧光信号,并以邻近的未漂白细胞作为对照组。实验结果表明,转染重组质粒后可有效表达RFP-HuR融合蛋白,且与SGs标记蛋白G3BP存在共定位关系。在第一个光漂白循环,漂白区荧光密度便从2 500 a.u.降低至0 a.u.;而经过约12个漂白循环(240 s)后,邻近HuR颗粒的荧光密度从漂白前的1 800 a.u.左右降低并维持在200 a.u.左右,表明活细胞内的HuR颗粒呈现高度的动态性;而胞核区荧光密度亦从4 400 a.u.降低至2 000 a.u.左右,表明HuR蛋白是一种核浆穿梭蛋白,在SGs、胞浆及胞核之间存在一定的动态平衡。利用FLIP技术可以分析并比较SGs不同成分的应激动力学属性,有助于进行SGs相关临床疾病的分子机制探讨。     

低温在木本植物种子发芽促进中的应用

木本植物种子中除能直播的以外 ,还有许多种子存在着各种类型的休眠 ,而使发芽迟滞 ,妨碍直播作业。在生产中 ,此类种子播前都需要进行发芽促进处理 ,以解除其休眠 ,使其顺利萌发生长。低温处理即是种子各种处理方法中常用的一种 ,具体操作是指低温过程或低温层积阶段。在“木本植物种子综合特征与发芽促进类型相关性的研究”课题中 ,我们根据几十年工作的经验积累 ,同时查阅了大量国内外有关资料 ,并做了大量的种子萌发试验 ,验证了低温在木本植物种子萌发中的作用和具体应用。低温后熟解除种子休眠 ,通常是指 0～ 1 0℃的温度效应 ,其中以…     

岩溶区表土与第四纪孢粉样处理方法研究

目前孢粉提取主要有两种方法:即传统酸碱处理法和过筛法。笔者根据西南岩溶区现代以及第四纪沉积物化学组成特点及实践经验,将以上两种方法稍作改进,创制了一种新方法:HF-碱处理法。该方法与传统酸碱法相比具有用时短、效率高、成本低、污染少、花粉孢子破坏少的优点。     

滞育和非滞育棉铃虫前胸腺的形态解剖学比较研究

该文用解剖镜和电子显微镜对滞育和非滞育棉铃虫Helicoverpa armigera前胸腺的形态解剖结构进行了比较研究。结果发现滞育棉铃虫的前胸腺细胞及其细胞间隙相对较小,不易着色,细胞核规则,较小,细胞质中几乎见不到光滑内质网和粗面内质网,线粒体极少,这些观察到的现象充分说明滞育棉铃虫的前胸腺活性较低。     

苯胺、苯酚对淡水藻类生长的影响

用生物检验法研究了苯胺、苯酚对蛋白核小球藻、斜生栅藻生长的影响,测定了两种藻类在5 d内对不同浓度苯胺、苯酚的降解或在藻细胞内的富集情况.结果表明,苯胺、苯酚对两种淡水藻类的致毒作用有所不同,对于同一种藻类,苯胺毒性大于苯酚;在同一毒物浓度下,栅藻表现更为敏感.在较低浓度下,两种淡水藻类均能降解或吸收一部分有机毒物,其中对苯酚的降解能力较强.     

小型简易厌氧手套箱的研制与考核

近年关于厌氧菌培养技术和方法获得惊人的发展,从六十年代亨格特转管法到八十年代的Ｇａｓ－Ｐａｋ厌氧罐和厌氧手套箱的开发研制,使厌氧菌的培养技术日趋完善［１］,我国八十年代曾由陈聪敏教授等人［２］开发厌氧手套箱和义乌生产的抽气换气厌氧培养装置,但终因造价...     

电刺激大鼠苍白球对黑质I型神经元的影响

采用细胞外记录方法,分别观察了黑质（ＳＮ）Ｉ型神经元对刺激苍白球（ＧＰ）内侧部及外侧部的反应。实验共记录了９６个Ｉ型神经元。刺激ＧＰ的内侧部,有５７个（５９．３８％）神经元顺行抑制。刺激ＧＰ的外侧部,有８６个（８９．５８％）神经元被顺行抑制;２个（２．０８％）被逆行激活,被逆行激活的神经元产生的诱发电位潜伏期恒定且短（分别为８．０和８．５ｍｓ）。被顺行抑制的神经元中,有的产生抑制、兴奋交替出现的振     

昆虫标本的采集制作和保存

昆虫标本的采集、制作、和保存在昆虫学工作中是占着极重要的地位的.凡是要从事于生物学教学工作、昆虫的分类和地理分布等方面的研究,标本常是最基本和具有决定意义的条件.就是要在昆虫的形态学、生态学和害虫防治等方面做工作,昆虫的标本有时也是非常重要的.在野外的采集及标本携回后的制作和保藏是一种专门的技术,但是一般来讲并不过分复杂,差不多有一些动物学知识的人都能做得到的.标本有时需要向远处邮寄,如果包装不得法,非常容易毁坏.读者和群众来     

以物候事件为参照点的三化螟发生期预测模型

本文通过分析三化螟历年各世代的始见日、高峰日的出现日期及其相关关系,建立了以线性回归模型为基础的、以始见日和高峰日为参照点的三化螟发生期预测模型,结合卵的发育历期和有效积温,预测该虫孵化高峰的日期。同时以冬至后出现5mm(或5mm)的降雨量作为积温参照点,预测三化螟第一代成虫始见日期。     

昆虫生理学的历史和现状及其在我国发展的途径

昆虫生理学是研究昆虫有机体正常机能的学科,它和昆虫形态学、生态学、分类学是普通昆虫学的基本组成部门。关于昆虫有机体在正常时机能规律的知识,是了解昆虫在特种情况下,例如受杀虫药剂作用或罹病时,种种变化的先备条件,因此昆虫生理学和昆虫毒理学、昆虫