视网膜下液基质金属蛋白酶双向电泳分离酶谱鉴定分析

以增生性玻璃体视网膜病变患者视网膜下液为研究对象,结合单向明胶酶谱法和双向电泳分离技术创建了基质金属蛋白酶双向电泳分离酶谱鉴定技术,该技术具有很高的分辨率和灵敏度,重复性好,能够提供蛋白质的相关修饰信息。通过该技术初步发现在增生性玻璃体视网膜病变患者的视网膜下液中存在有4种基质金属蛋白酶,其中2种是由3或4种分子量相同但等电点不同的同分异构体蛋白质组成。     

表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区重组犬2型腺病毒的构建及其免疫原性研究

为研制 1种以犬 2型腺病毒为载体的狂犬病疫苗 ,以狂犬病病毒SRV9株基因组为模板 ,通过RT_PCR技术扩增得到狂犬病病毒糖蛋白膜外区序列 ;以其为目的基因构建以CMV为启动子、SV4 0polyA为终止信号的表达盒。将犬 2型腺病毒的E3区克隆入中间质粒中 ,然后对其进行部分缺失 ,并将表达盒克隆入缺失处 ,再以此重组的E3区置换犬 2型腺病毒的E3区。以重组的犬 2型腺病毒基因组转染MDCK细胞 ,最终获得了表达盒分正向和反向插入E3区的重组犬 2型腺病毒。用两株重组腺病毒免疫幼犬 ,均在犬体内产生了针对狂犬病病毒的抗体。     

猪传染性胸膜肺炎病料中PCV_2和PRRSV的PCR检测

应用PCR方法对从山东省不同地区采集的253份猪传染性胸膜肺炎肺脏和125份临床健康猪肺脏进行PCV_2和PRRSV的检测。结果显示,在传染性胸膜肺炎猪肺脏中,171份为PCV_2阳性,阳性率达67.5％;101份样品为PRRSV阳性,阳性率达40%;其中,68份样品同时检出PCV_2和PRRSV,共感染阳性率达26.8%。而临床健康猪肺组织中,21份样品PCV_2检测结果为阳性,阳性率为16.8％;12份样品PRRSV检测结果阳性,阳性率为9.6％,PCV_2和PRRSV共感染未检出。统计结果显示,传染性胸膜肺炎发病猪与临床健康猪PCV_2、PRRSV及PCV_2和PRRSV共感染的阳性率差异极显著,传染性胸膜肺炎发病猪的肺脏中PCV_2和PRRSV的检出率明显高于临床健康猪。上述检测结果提示,猪传染性胸膜肺炎的发生可能与PCV_2和PRRSV的感染和共感染有关。     

芦荟纯酰素对更年期综合征症状及抗氧化水平的影响

目的：观察芦荟纯酰素膜片对更年期综合征患者的临床改善情况,重点观察芦荟纯酰素对受试者炎症指标、激素水平和更年期症状评分的影响,为芦荟纯酰素改善更年期综合征的临床应用提供科学依据。方法：采用随机对照双盲实验,2018年9—11月解放军总医院门诊招募更年期综合征女性受试者50 名,并随机分成2组（干预组25人、对照组25人）,分别舌下含服芦荟纯酰素膜片（6 片/d）或干预物（6 片/d）,干预3 个月后,比较两组之间及同组干预前后更年期自我综合评定结果、疲劳评定结果、GAD 7 焦虑症评分、PHQ 9 抑郁症、血清激素水平及抗氧化指标。结果：共46 例受试者完成研究（对照组24例、干预组22例）,失访率8%。与干预前比较,两组更年期自我综合评分、疲劳评分及雌激素水平有显著改善（P 均＜ 0.05）;干预后,干预组较对照组更年期自我综合评分、雌激素水平及谷胱甘肽过氧化酶水平有显著改善（P 均＜ 0.05）。结论：芦荟纯酰素膜片能够改善更年期综合征症状,调节雌激素水平和增强机体抗氧化能力。     

化疗相关性闭经的影响因素及临床利弊

针对恶性肿瘤的化学治疗源于上世纪40年代Philips与Gilman第一次使用氮芥治疗恶性肿瘤,发展至今化疗在恶性肿瘤的治疗过程中已经取得了非常大的进步,成为恶性肿瘤的主要治疗方法之一。随着新药的逐渐研发和使用,已经使多数恶性肿瘤患者得到生存期的延长甚至是治愈。然而化疗导致的多种不良反应却日益受到越来越多的关注,如严重的骨髓抑制、心脏功能及结构的损伤、恶心、呕吐、腹泻、掉发等。化疗药物对多种身体多种器官系统都存在伤害,这其中因化疗引起的卵巢功能损伤导致的闭经是女性患者中最常见的,并且与治疗有关的不良事件之一。因化疗所导致的卵巢功能损害不仅严重影响患者的生活质量,而且还可能导致某些严重的疾病。因此探讨其发生规律和防治方法有重要意义。     

幽门螺杆菌动物感染模型的研究近况

动物感染模型对于幽门螺杆菌致病机制的研究、疫苗的研制和药物的筛选具有十分重要的作用。已报道的用于建立该菌动物感染模型的动物有小鼠、大鼠、蒙古沙鼠、豚鼠、猫、狗、悉生生物猪和灵长类动物等。此外也有人利用猫胃螺杆菌感染的小鼠、大鼠模型和鼬鼠螺杆菌感染的雪貂模型来研究幽门螺杆菌。本文就各种幽门螺杆菌动物感染模型的优缺点、适应范围及存在问题作一简要介绍。     

绿豆Ty1/Copia类反转录转座子逆转录酶序列的克隆和分析

利用Ty1/copia类反转录转座子的保守位点设计简并引物,从绿豆(Vigna radiata(L.)Wilczek)基因组中扩增得到了反转录转座子的逆转录酶序列.对扩增得到的约270bp的片段进行分离和克隆,并随机挑选了40个克隆进行测序,结果得到了36个单独的核酸序列,其中18个含有移码突变或终止子.根据序列比对,这些克隆可分为9组以及单个的9种.这40个克隆中,核酸序列相似性从8%到100%,显示出其核酸序列的高度异质性.将这些克隆的核酸序列与来自其他种植物的相应序列进行谱系分析,发现有些克隆与来自其他种植物的相应序列的亲缘关系比这些克隆之间更为接近.斑点杂交显示Ty1/copia反转录转座子约占绿豆基因组的9.3%.     

钙池排空操纵的外钙内流决定甘草诱导MGC-803细胞凋亡

 用 EGTA螯合胞外 Ca2 +和异搏定抑制钙通道 ,研究胞外 Ca2 +在甘草诱导 MGC- 80 3细胞中的作用 .流式细胞仪检测凋亡峰和 DNA ladder分析均表明 ,EGTA和异博定阻断细胞凋亡 .分别以 PI或 Rh1 2 3活染后的相应荧光强度表示细胞膜通透性和线粒性膜电位 (ΔΨm) .结果表明 ,细胞膜通透性增强和线粒体 ΔΨm 下降均为细胞凋亡的早期事件 ,EGTA和异博定均可抑制细胞膜通透性增强 ,但 EGTA促进线粒体 ΔΨm 下降 ,而异博定作用相反 .进一步经 PI和 Hoechst33342荧光双染后同时观察细胞膜通透性和细胞核形态 .结果表明 ,凋亡细胞均可 PI着色 ,EGTA和异博定完全阻断染色质凝聚 ,但不能完全抑制细胞膜通透性变化 .借助 Ca2 +探针 Fluo- 3/AM研究凋亡时胞内游离钙的时相变化 ,发现 Ca2 +升高也是细胞凋亡的早期事件 . EGTA和异博定轻微促进凋亡早期 Ca2 +升高 ,但抑制随后 Ca2 +的继续升高 .所有结果提示 ,钙池排空操纵的外 Ca2 +内流在甘草诱导 MGC- 80 3细胞凋亡中发挥决定性的作用 .