一种新的肝细胞生成素（HPO）转录本及其生物学活性

利用 5′RACE技术从人胎肝组织中分离一种新形式的肝细胞生成素 (HPO 2 0 5 )cDNA ,其编码蛋白质氨基酸序列的N端较已报道的人肝细胞生成素HPO(hepatopoietin)多 80个氨基酸 ,推测其蛋白质分子量为 2 3kD。RT PCR检测HPOmRNA在多种肝癌细胞中表达 ,Western印迹可检测到 2 3kDHPO 2 0 5表达 ,表明此种形式HPO在自然状态下存在。将构建的HPO 2 0 5真核表达载体转染入COS 7细胞 ,其表达蛋白质能够刺激HepG2肝癌细胞DNA合成 ;将HPO 2 0 5、HPO和荷空表达载体分别转染入低水平表达HPO的Bel 740 2肝癌细胞株 ,发现HPO 2 0 5比HPO具有较强的激活MAPK磷酸化的活性。细胞周期分析稳定转染HPO 2 0 5 ,HPO细胞的增殖周期也支持这一结论。这些结果表明HPO 2 0 5具有刺激肝源性细胞增殖的活性 ,并提示HPO 2 0 5可能较HPO有更强的生物学活性     

钛对大型蚤（Daphnia magna）的毒性研究

钛离子对大型蚤的毒性研究表明,其24、48、96h的半数抑制浓度EC50为6．2,5．1,0．26mg/L。半数致死浓度LC50为6．3,6．0,0,1．5mg/L。长期实验表明,0．0001mg/L浓度是对大型蚤的生长和繁殖均有影响的最低浓度。本研究为制订饮用水水质卫生标准提供水生生物毒理学方面的资料。     

CO2倍增条件下长白赤松幼苗土壤CO2廓线的动态

采用固定在土壤中的气井系统 ,监测土壤剖面的CO2 动态及其与长白赤松 (Pinussylvestrisvar.sylvestriformis(Takenouchi)ChengetC .D .Chu)幼苗根系发展之间的关系。实验研究共设 4种CO2 处理 ,分别是环境CO2 浓度 ,无苗 ;CO2 为 70 0 μmol/mol,无苗 ;环境CO2 浓度 ,有苗 ;CO2 为 70 0 μmol/mol,有苗。通过对土壤剖面CO2 气体的同步采集与分析表明 :土壤CO2 廓线与幼苗根系的生物活性密切相关。在土壤表面及壤土和沙土的边界层中 ,根系分布密集 ,根系的呼吸作用对那两个土层CO2 贡献大 ;随着幼苗的季节生长 ,与环境CO2 浓度比较 ,CO2 倍增将导致土壤剖面上CO2 浓度最大区域由表面向壤土和沙土边界层的转移。本文采用的气井系统提供了一种对土壤无破坏、经济、简单并且能够用于监测幼苗地下过程的廓线研究方法。     

Role of calcium in differentiation of murine erythroleu-kemia cells

Calcium plays a crucial role in the normal and abnomal cell metabolism.The role of calcium in the differentiation process of murine erythroleukemia cells(MELC)remains controversial.Here,based upon quantitative measurement of fluorescence in single cells,a method was developed to investigate the intracellular free calcium[Ca^2 ]i concentration and DNA contents simultaneously,by employing the fluorescent probe,fluo-3 acetoxymethyl ester and DNA dye Hoechst 33342.During MELC differentiation.[Ca^2 ]i concentration incresed.We also demonstrated that calcium ionophore,A23187,enhanced the HMB-induced MELC differentiation,while verapamil,an inhibitor of calcuim uptake,slightly reduced differentiation.These results suggested that an increase in the [Ca^2 ]i level was an essential step in HMBA-induced MELC differentiation.     

重组人可溶性B淋巴细胞刺激因子及其突变体的克隆、表达及活性测定

采用RT PCR方法从人外周血白细胞总RNA中钓取人可溶性B淋巴细胞刺激因子 (humansolubleBlym phocytestimulator,hsBLyS)的cDNA片段 ,再运用基因重组手段 ,利用通用型质粒pBV2 2 0构建表达载体pBV2 2 0 /hsBLyS。经测序鉴定后 ,以之为模板使用重叠PCR法扩增得到hsBLyS的两个点突变体hsBY A(Cys14 6→Ala14 6)和hsBY V (Cys14 6→Val14 6)的基因片段 ,构建表达载体 pBV2 2 0 /hsBY A及 pBV2 2 0 /hsBY V。经测序无误后 ,将上述 3种载体分别转化大肠杆菌DH5α并诱导重组蛋白质表达 ,薄层扫描结果显示 3种蛋白质在DH5α中表达量都在 2 0 %～ 30 %之间。再分别运用变性、凝胶过滤层析及复性等手段纯化目的蛋白质 ,最后通过B淋巴细胞增殖实验检测纯化产物促人B细胞增殖的活性。实验结果表明 ,3种重组蛋白质都能明显刺激人B细胞增殖 ;统计学检验显示 ,突变体rhsBY V较野生型rhsBLyS的促人B淋巴细胞增殖活性显著增强。     

川鄂山茱萸不同部位中熊果酸的含量测定

目的：测定川鄂山茱萸不同部位中熊果酸的含量,筛选含量最高的部位,为充分利用川鄂山茱萸野生资源提供依据。方法：采用SymmetrySheild TM RP18色谱柱4.6mm×250mm,5μm）;乙腈-水-磷酸（80∶20∶0.1）为流动相;检测波长为206nm;流速为1.0mL/min;柱温为30℃。结果：熊果酸在0.42mg～2.94mg范围内呈良好的线性关系（r=0.9998）,平均回收率为96.27%,RSD为1.4%。结论：川鄂山茱萸不同部位均含有熊果酸,且含量有明显差别。川鄂山茱萸总苞片的熊果酸含量为1.1044%,有一定的开发价值。     

大鼠脑泡巨噬细胞NOS表达的细胞化学和免疫细胞化学研究

用NADPH－黄递酶细胞化学和iNOS免疫细胞化学方法,结合图像定量分析,动态研究了1μg/ml脂多糖诱导培养的大鼠肺泡巨噬细胞iNOS的表达情况。结果发现：脂多糖刺激1小时染色反应强度与对照组相比无显差异,6小时后明显高于对照组,随刺激时间延长,染色反应强度呈增高趋势,18小时后则趋于相对平稳;两种染色法显示的阳性细胞均以核周区染色反应为,实验从形态学角度表明：（1）NADPH－黄递酶细胞化学染色能够反映培养的大鼠肺泡巨噬细胞NOS表达状况;（2）脂多糖可诱导肺泡巨噬细胞iNOS表达,其主要存在于核周区胞浆中。     

中国甘肃Eleutherophyllum Stur的新材料及其分类位置

自李星学等(1974)首次报道Eleutherophyllum waldenburgense(Stur)Zimmermann在我国发现以来,这一纳缪尔A期Eumorphoceras带的重要标志化石,除甘肃靖远大水沟外,我国其它地区至今尚无新材料增补。同时,甘肃靖远的材料,亦因标本较少和其它原因,尚未进行正式研究。近年来,为迎接     

Physical mapping of three fruit ripening genes：Endopolygalacturonase,ACC oxidase and ACC synthase from apple（Malus x domestica） in an apple rootstock A106（Malus sieboldii

The apple rootstock,A106(Malus sieboldii),had 17 bivalents in pollen mother cells at meiotic metaphase 1,and 17 chromosomes in a haploid pollen cell.Karyotypes were prepared from root-tip cells with 2n=34 chromosomes,Seven out of 82 karyotypes(8.5%) showed one pari of satellites at the end of the short arm of chromosome 3.C-bands were shown on 6 pairs of chromosomes 2,4,6,8,14,and 16 near the telomeric regions of short arms.Probes for three ripening-related genes from Malus x domestica:endopolygalacturonase(EPG,0.6kb),ACC oxidase(1.2kb),and ACC synthase(2kb)were hybridized in situ to metaphase chromosomes of A106.Hybridization sites for the EPG gene were observed on the long arm of chromosome 14 in 15 out of 16 replicate spreads and proximal to the centromere of chromosomes 6 and 11.For the ACC oxidase gene,hylridization sites were observed in the telomeric region of the short arm of chromosomes 5 and 11 in 87% and 81% of 16 spreads respectively,proxiaml to the centromere of chromosome 1 in 81% of the spreads,and on the long arm of chromosome 13 in 50% of the spreads. Physical mapping of three fruit ripening genes in an apple rootstock A106.Twenty five spreads were studied for the ACC synthase gene and hybridization sites were observed in the telomeric region of the short arm of chromosome 12 in 96% of the spreads.chromosomes 9 and 10 in 76% of the spreads,and chromosome 17 in 56% of the spreads.     

草鱼出血病病毒对其它鱼的感染性研究

用草鱼出血病病鱼分离出的草鱼出血病病毒(Grass carp hemorrhage virus,GCHV)感染其它常见鱼并用ELISA方法检查感染鱼组织提取液,结果表明:青鱼、鲢鱼、布氏鳌条对GCHV抗体呈阳性反应;鲤鱼、鳙鱼、鲫鱼、团头鲂、泥鳅则呈阴性反应。综合感染鱼发病症状及死亡特征,初步认为:青鱼对GCHV是易感的,GCHV能在鲢鱼、布氏蟹条体内增值,但毒力较低,鳙鱼、鲫鱼、团头鲂、鲤鱼、泥鳅能抗GCHV感染。