花粉发芽实验时花粉播种方法的改进

在做花粉发芽实验时,多采用条播或点播法。笔者在多年试验中发现“接触平播法”具有许多优点,而且简单易行。 1.培养基配制首先配制适宜的蔗糖培养基(若不能肯定,可分设几个浓度),置于60℃水浴锅中备用。取干净载玻片,将不同浓度的培养基分别用滴管在每张片子上滴上2滴,使之稍散开,待培养基凝固后进行播种。 2.播种和镜检从将要开放的花朵中取几个鲜花放在干净载玻片上,在花药上滴一小滴水,用镊子夹挤花药,花粉即会散出并与水混合。取去残渣。然后将这片带有花粉的载片与滴有培养基的载玻片轻轻互贴一下,花粉就均匀地平播在培养基上。播后的载玻片反转过来,放在盛水的搪瓷盘的铁丝架上,并贴上标签,注明花     

兔双歧杆菌超微结构的观察

本文观察了兔双歧杆菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｃｕｎｉｃｕｌｉ）的超微结构,发现青壮龄免双歧杆菌的菌体结构完整,从外向里为糖被、细胞壁、细胞膜和细胞质。细胞壁为双层结构即外界膜和内界膜。胞质中有糖原颗粒、核蛋白体、中介体、液胞或空泡。未见有分叉杆菌。老龄菌无糖被,细胞壁不完整,呈碎片状,可见到许多分叉杆菌。提示兔双歧杆菌分叉的形成与营养不良、环境不利及老龄有关。     

庚型肝炎病毒—中国河北分离株部分NS3区基因序列分析

在急慢性输血后肝炎、散发性肝炎及爆发型肝炎中,大约１０～２０％的病人不属于已发现的Ａ～Ｅ型肝炎,提示存在新型肝炎病毒。在美国１９９５年第４６届医学年会上,已有了一些有关庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）分子生物学及庚型肝炎血清学方面的摘要报道。１９９６年初Ｌｉｎ...     

中东呼吸综合征抗病毒治疗研究进展

中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)目前在全球传播至20多个国家,病死率高达35%左右。目前尚无特异有效的临床救治手段,针对MERS-CoV感染的治疗策略的研发和应用是世界范围内迫切需要解决的重要问题。本文针对MERS-CoV感染抗病毒治疗策略从药物治疗(包括临床批准药物、蛋白酶抑制剂、抗病毒肽及核酸类药物)和免疫治疗(包括恢复期血浆治疗和特异性单/多克隆抗体)两方面的研究进展进行综述。     

生态系统的空间分布

作为生态学研究的一个重要方面,在过去二十多年中,生态系统的空间分布曾被一些学者历研究。这类研究的一个特殊应用是旨在监测生态系统的动态演替。此外,它亦可以作为一种重要方法,对特定地理区域内的生态系统进行数量分类,同时,它己被用来评价生态系统的稳定性,或被用来估算生态系统的初始生产力。 考虑到一个平面上点的分布规律之后,作者应用“近邻分析”,“引力理论”以及概率论的基本概念,设计出一个称之为“执行指标”的E-index。本文列出了E-index谱的计算。其特点在于,不是如通常采用的方法那样只是考虑两点间的距离,而是采用(包含有点的)两个最近“样方”间的距离作为计算的依据,去制定执行指标, E-index似乎是在统一的基础上,在定量地比较不同的生态系境空间模型方面迈出了较大的一步,通过这个门槛,研究者们将能够以更准确和更有效的方式,去实现对生态系统的某种空间调节和空间管理。 本文还举出一些例子去应用和验证E-index。     

沙门菌毒力基因spvB的原核表达及其多克隆抗体的制备

目的:构建沙门菌毒力基因spvB的原核表达载体,诱导表达纯化SpvB蛋白并以其为抗原免疫小鼠,制备多克隆抗体。方法:利用生物信息学软件对SpvB进行分析,选取抗原性较高、易表达的氨基酸序列作为克隆序列,以携带spvB基因的鼠伤寒沙门菌为模板,PCR扩增目的片段后与原核表达载体pET28a(+)连接;将质粒pET28a-SpvB转化大肠埃希菌BL21(DE3)后诱导表达并纯化。目的蛋白免疫小鼠,制备抗SpvB多克隆抗体,Western blot检测抗体特异性。结果:成功构建spvB原核表达载体,经IPTG诱导结果显示,重组蛋白表达且主要存在于包涵体中,将纯化后的蛋白免疫小鼠Western blot检测血清中抗体与SpvB特异性结合。结论:获得具有免疫原性的SpvB蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究该基因的功能奠定基础。     

中东呼吸综合征冠状病毒多重荧光定量RT-PCR检测技术的建立

建立中东呼吸系统综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染的筛查与诊断应用的核酸检测方法。本研究建立了基于MERS-CoV三个分子靶标(upE,ORF1b,N2)的双重以及三重的三种荧光定量RT-PCR检测技术方法,分别与前期建立的单重荧光定量RT-PCR(upE或N2)检测方法做了比较,并且采用MERS-CoV病毒毒株、上海提供的口岸发烧病人样本以及由首例中国MERS-CoV韩国地区输入病例的咽拭子样品和全血的样品做了临床验证。结果显示:采用MERS-CoV病毒毒株作为模板,三种新建立的多重检测方法与单重荧光定量RT-PCR检测方法最低检测限均能达到10PFU/mL,且与其他常见呼吸道病毒的阳性样本均无交叉反应,特异性良好。对临床样品的验证中,上海病人咽拭子样本均为阴性,而中国首例MERS输入病例的急性期咽拭子样品均为阳性,而全血样的检测结果显示N2靶标有较高检出率,明显优于基于upE单一靶标。本研究所建立的基于MERS-CoV三个分子靶标(upE,ORF1b,N2)的双重以及三重荧光定量RT-PCR检测技术方法用于MERS-CoV感染的实验室诊断,具有较高灵敏度与特异性及适用性。     

21种野生百合亲缘关系的ISSR分析

该研究选用7条ISSR标记引物对百合属21种野生百合的亲缘关系进行分析,使用POPGEN1.32和MEGA5.1数据处理软件分析数据。结果表明：7条引物扩增出149条条带,其中136条为多态性条带,多态性条带比率为91.06％,平均有效等位点数为1.7624,平均Nei’ s基因多样度为0.4214,平均Shanon信息指数0.6085。遗传距离变化范围为0.3075~0.8873,紫脊百合和尖被百合的遗传距离最大,均值为0.8873,表明21份材料中二者亲缘关系最远;紫脊百合和宜昌百合遗传距离最小,均值为0.3075,表明二者亲缘关系最近。聚类结果与形态学分类大致吻合,21个供试材料可被分成5个类群,大理百合、宝兴百合、卷丹百合、紫斑百合、乳头百合、川百合、兰州百合、山丹百合、绿花百合和毛百合为第Ⅰ类群;紫脊百合、宜昌百合、岷江百合、通江百合和淡黄花百合为第Ⅱ类群;野百合和百合为第Ⅲ类群;青岛百合为第Ⅳ类群;第Ⅴ类群包括玫红百合、有斑百合和尖被百合。毛百合与卷瓣组百合亲缘关系较近,钟花组百合与卷瓣组百合存在基因交流,说明不能仅仅依靠形态学对野生百合进行分类。聚类分析结果中野百合与百合单独聚为一类,这说明是否具叶柄对野生百合的分类是一个重要的形态学特性。 ISSR分子标记适合用于百合属植物的亲缘关系分析。     

甜菜夜蛾核多角体病毒sod基因的克隆及原核表达

甜菜夜蛾核型多角体病毒中国株(Spotoptera exigua MNPV-Z)超氧化物歧化酶基因(sod)业已被克隆及在大肠杆菌中进行了表达,证明了SeMNPV-Z的sod基因产物确有SOD活性,其活力单位约为291.19U/ mL培养液.DNA测序结果表明SeMNPV-Z的sod基因编码151个氨基酸,与人的sod1基因的核苷酸的同源性为50%,与LdNPV、HaSNPV、HcNPV、AcNPV和BmNPV的sod基因的同源性分别为64%、63%、63%、65%、63%.