植物抗病相关基因分离策略

近年来植物基因克隆技术已经取得了很大进展。文章对分离植物抗病相关基因的一系列策略及其研究进展进行了综述,并对这些技术的异同,各自的优缺点,以及它们在植物中的应用现状及前景作了评述。     

利用瞬间表达技术分析小麦抗病相关基因的功能

采用瞬间表达技术分析了TaTBL、TaPK1和TaTST等3个抗病相关基因的功能。首先将这3个小麦抗病相关基因构建入高效表达载体,然后使用基因枪将目标基因和GUS基因载体同时导入到感白粉病小麦品种离体叶片表皮细胞中,用GUS基因标记阳性转化细胞。转化后接种白粉菌孢子,48h后观察转化阳性表皮细胞,研究抗病相关基因表达对白粉菌入侵及吸器形成产生的影响。结果表明,这3个基因在感病小麦品种叶片表皮细胞中的瞬间表达,对白粉菌侵入和吸器形成均有部分抑制作用,在一定程度上增强了表达细胞对白粉菌的抗性。     

蜜蜂残翅病毒在中华蜜蜂及其蜂箱奇露尾甲的发生与进化分析

蜜蜂残翅病毒(Deformed wing virus,DWV)广泛存在于我国规模化养殖的蜂群中,具有明显的季节流行特征.近年来,DWV不断向野生授粉昆虫及其它昆虫传播,包括蜜蜂新的寄生性病害蜂箱奇露尾甲Aethina tumida.前期本实验室已鉴定来源于中华蜜蜂Apis cerana与意大利蜜蜂Apis mellifera的蜂箱奇露尾甲均感染了蜜蜂病毒,但未调查来源于同一群的蜜蜂与蜂箱奇露尾甲是否感染了同一病毒,且在进化上有无差异.本研究调查了来源于同一群的中蜂及蜂箱奇露尾甲感染病毒情况,发现只感染了蜜蜂残翅病毒A型(DWV-A),未发现其它病毒.对DWV-A的3个片段进化分析表明,虽然DWV-A同时感染了中华蜜蜂和蜂箱奇露尾甲,但是VP3基因在不同的寄主中呈现明显不同的亲缘关系.这一结果为蜜蜂残翅病毒在蜜蜂及寄生病害中的进化提供了数据,为进一步研究病毒在不同寄主间的传播与进化奠定了基础.     

Orexin能神经元在依托咪脂麻醉中的促觉醒作用

目的:观察orexin能神经元在依托咪脂麻醉中的促觉醒作用。方法:选择雄性SD大鼠36只,体重230～250g。将18只SD大鼠随机分为脂肪乳剂组(60 mg·kg~(-1)·h~(-1)),依托咪脂麻醉(50 mg·kg~(-1)·h~(-1))30 min组和60 min组(每组n=6),用放射免疫法检测3组大鼠血浆中orexin含量;3天后,将脂肪乳剂组大鼠颈椎脱臼处死后灌注取脑,另外两组在依托咪脂麻醉下灌注取脑,采用免疫荧光双标染色,分别观察3组大鼠orexin神经元活性。另取18只SD大鼠随机分为乳酸林格氏液组,orexin-A 30 pmol组和100pmol组(每组n=6),记录大鼠翻正反射消失时间为麻醉诱导时间及翻正反射恢复时间为觉醒时间。结果:与脂肪乳剂组相比,依托咪脂麻醉30 min和60 min后,血浆orexin-A含量下降(P0.05),有活性的orexin神经元数目减少(P0.01);与依托咪脂麻醉30 min组相比,60 min组有活性的orexin神经元数目减少(P0.05),但血浆orexin-A含量与30 min组无差异(P0.05);与乳酸林格氏溶液组相比,基底前脑区微注射orexin-A 30 pmol或100 pmol对麻醉诱导无影响,但能显著缩短依托咪脂麻醉觉醒时间(P0.05,P0.01);但orexin-A 30 pmol组和100 pmol组诱导和觉醒时间比较均无统计学差异(P0.05)。结论:依托咪脂麻醉抑制大鼠下丘脑orexin神经元的活性,orexin-A对依托咪脂麻醉具有促觉醒作用。     

牛血清白蛋白对Cu^2＋与δ-MnO2间吸附平衡性质的影响

研究了溶液中牛血清白蛋白（BSA）的存在对Cu^2＋与δ-MnO2间吸附平衡性质的影响,旨在增进人们对Cu^2＋环境化学行为的认识。结果表明：BSA存在下,Cu^2＋在δ-MnO2表面的吸附率-pH曲线呈典型的“S”形,加入BSA使Cu^2＋的吸附突跃向高pH方向移动,影响程度与BSA的加入方式有关,其次序为Ⅳ（先加BSA后加Cu^2＋）〉Ⅲ（Cu^2＋和BSA同时加）≈Ⅱ（（先加Cu^2＋后加BSA）;BSA存在下,Cu^2＋的等温吸附线遵循Langmuir等温吸附方程,Cu^2＋的饱和吸附量随BSA浓度的增大而减小,并随BSA的加入方式而改变,其次序为I（不加BSA）〉Ⅱ≈Ⅲ〉Ⅳ;Cu^2＋在δ-MnO2上的饱和吸附量随温度的升高而增大。在pH=3．0条件下,Cu^2＋在δ-MnO2上的吸附是完全可逆的,但pH=5．0的条件下,吸附是不可逆的,BSA对Cu^2＋的吸附可逆性没有影响。     

肺腺癌细胞中EGFR蛋白的表达与细胞内胶原化的相关性研究

目的探讨表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）在肺腺癌细胞中的表达及与细胞发生胶原化的相关性。方法从胸水中提取肺腺癌细胞为研究对象,以32例良性胸水中的增生上皮细胞、炎性细胞为对照,采用免疫细胞化学方法检测细胞中EGFR、E钙粘素蛋白、Vimentin、TTF-1和胶原蛋白亚型I的表达。Masson染色方法检测胶原纤维表达。结果78例胸水标本中,EGFR在肺腺癌细胞中的阳性率为79．5％,胶原蛋白亚型I为32．1％,Masson染色的阳性率为70．5％,明显高于对照组且EGFR和Masson染色的阳性表达结果的相关性具有统计学意义（P〈0．01）。结论EG—FR在肺腺癌细胞中阳性表达,可能与细胞内基质胶原蛋白形成有关。