IL-4抑制COPD大鼠肺组织COX-2和PDGF的表达

目的探讨白细胞介素-4(IL-4)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型建立的影响,以及COPD肺组织中环氧合酶-2(COX-2)和血小板源性生长因子(PDGF)的表达及IL-4对其表达的影响机制。方法用雄性Wistar大鼠建立吸烟大鼠COPD模型。随机分为对照组,模型组,IL-4组和地塞米松组。用免疫组化法和逆转录聚合酶联反应法(RT-PCR),检测肺组织中COX-2和PDGF-A及PDGF-B的表达情况。结果模型组COX-2和PDGF-A、-B表达明显增高;IL-4组和地塞米松组显著降低。结论IL-4和地塞米松可干预COPD模型的建立;COPD肺组织中COX-2和PDGF的表达显著增高,IL-4和地塞米松可明显降低其表达。     

意大利蜜蜂幼虫肠道在球囊菌胁迫后期的差异表达微小RNA及其靶基因分析

【目的】蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis(简称球囊菌)是一种特异性侵染蜜蜂幼虫肠道的致死性真菌病原。微小RNA(microRNA,mi RNA)是一种在转录后水平对m RNA进行负调控的关键调控因子。本研究旨在对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称意蜂)幼虫肠道在球囊菌胁迫后期的差异表达mi RNAs(DEmiRNAs)及其靶基因进行深入分析,为揭示DEmiRNAs在胁迫应答中的作用提供重要信息。【方法】利用small RNA-seq(s RNA-seq)技术对正常及球囊菌侵染的意蜂6日龄幼虫肠道(分别表示为Am CK和Am T)进行测序,通过相关生物信息学软件对DEmiRNAs进行预测和分析。利用TargetFinder软件预测DEmiRNAs的靶基因,然后利用Blast软件对靶基因进行GO和KEGG数据库的功能注释。通过Cytoscape软件构建DEmiRNAs与其靶m RNAs的调控网络。通过茎环实时荧光定量PCR(stem-loop RT-qPCR)验证测序数据的可靠性。【结果】Am CK和Am T的测序分别得到9 230 496和10 823 667条有效序列标签; Am CK vs Am T比较组中包含15个上调和6个下调mi RNAs,分别结合3 503和3 252个靶基因,它们可分别注释到40和39个GO terms以及104和99条代谢通路;进一步分析发现调控网络中的17个DEmiRNAs靶向结合116个与丝氨酸蛋白酶相关的m RNAs,14个DEmiRNAs靶向结合54个与泛素介导的蛋白水解相关的m RNAs。Stem-loop RT-qPCR验证结果显示随机选择的4个DEmiRNAs (mi R-251-x,mi R-9277-y,mi R-1672-x和mi R-4968-y)的表达量变化趋势与测序结果一致,表明测序数据真实可信。【结论】本研究率先对意蜂幼虫肠道在球囊菌胁迫后期的DEmiRNAs及其靶基因进行预测与分析,提供了mi RNAs的表达谱和差异表达信息。ame-miR-927b,mi R-429-y和mi R-8440-y等DEmiRNAs可能参与对丝氨酸蛋白酶的调控和对泛素介导的蛋白水解的调控,DEmiRNAs与靶基因之间存在复杂的调控网络关系。DEmiRNAs可参与到意蜂幼虫肠道与球囊菌间的互作。     

冷胁迫下大麦幼苗根质膜水通道蛋白基因的表达

植物质膜水通道蛋白（plasma membrane intrinsic proteins,PIPs）是位于细胞质膜上具有选择性、高效转运水分的一类膜内在蛋白,参与植物生长发育的多个生理活动。本研究以大麦‘Haruna—nijo’为材料,对水培幼苗进行4℃冷胁迫,采用实时荧光定量PCR技术对胁迫期（4℃,48h）和温度恢复期（16℃,48h）两个过程的水通道蛋白PIPSs基因表达进行了分析;同期测定了根水导度（Lpr）、根长和苗高,分析冷胁迫下大麦根mF基因的表达与水分生理的关系。结果表明：大麦幼苗经4℃低温胁迫48h后,苗的生长明显受抑,根的生长无显著变化;温度恢复48h后,苗恢复生长,根的生长无显著变化;根水导度在胁迫期下降,恢复期急剧升高,均无显著差异。实时荧光定量PCR结果显示,根中表达量最高的是HvPIP1;2和HvPIP1;3,最低的是HvPIP1;1和HvPIP2;3;冷处理后HvPIPs表达童与对照比较总体百降,其HvPIP1;2、HvPIP1;3、HvPIP1;4、HvPIP1;5、HvPIP2;1、HvPIP2;2明显下调。恢复后大多数HvPIPS表达童增加．HvPIP1;1、HvPIP1;2、HvPIP1;5、HvPIP2;3显砉增如,HvPIP1;4、mPIP2;5表达量降低,但无显著轰异,研菀发现,冷弼迫后夫菱粮HvPIPs的表达情况总体下调,恢复生长大部分HvPIPs上调,结合根水导度的变化,推测大麦HvPIPs在抗冷反应中的作用复杂,冷害的不同阶段HvPIPs对水分吸收所起的作用不同。     

肿瘤标志物CEA、CA199对结直肠癌TNM分期的预判价值

目的:探讨肿瘤标志物CEA、CA199浓度变化在结直肠癌TNM分期中的预判价值。方法:回顾我院2010年1月~2013年10月收治的经手术治疗的结、直肠癌患者(共96例)的有关资料,分析其术前CEA、CA199浓度水平与术后病理确定TNM分期结果的相互关系,进行相应的统计学检测。结果:结直肠癌Ⅰ~Ⅳ期CEA浓度依次为4.28±1.78、6.92±2.01、23.99±6.49和362.64±158.80 ng/mL,CA199浓度依次为12.58±2.98、13.37±2.62、36.84±10.33和238.71±103.69 U/mL,肿瘤标志物CEA、CA199的浓度随TNM分期升级而增高,通过Kruskal-Wallis秩检验分析及Spearman秩相关分析,表明CEA、CA199的血清浓度与TNM分期明显相关(P0.01)。结论:CEA、CA199血清浓度与TNM分期呈正相关,而年龄与CEA、CA199在各期中的浓度无明显相关性。因此,应用CEA、CA199的血清学测定在一定程度上具有预判结直肠癌TNM分期的价值。     

2010—2012年度季节性流行性感冒疫苗对6～59月龄儿童保护效果的病例对照研究

目的评价2010—2012年度季节性流行性感冒疫苗(流感疫苗)对儿童的上市后保护效果。方法选择2010—2012年度6~59月龄的实验室诊断流感病例为病例组,在儿童预防接种信息系统中随机选择健康儿童为对照组,进行1∶2匹配的病例对照研究,采用条件Logistic回归计算保护效果。结果研究中共纳入1 255组研究对象。2010—2011和2011—2012年度,流感疫苗对6~59月龄儿童完全免疫的保护效果分别为73.2%(95%可信限(CI):52.2~85.0)和52.9%(95%CI:42.1~61.7),对6~35月龄儿童的保护效果优于36~59月龄儿童,完全免疫的保护效果优于部分免疫。流感疫苗的保护效果从1~3月的68.9%(95%CI:57.5~77.2)衰减至4~6月的48.4%(95%CI,33.8~59.7)。结论流感疫苗对6~59月龄儿童具有一定的保护效果,儿童接种疫苗后可以减少52.9%~73.2%的流感病例,建议儿童每年及时进行全程免疫。     

GLPp16/CSP17 探针在膀胱尿路上皮癌诊断中的应用

目的:探讨荧光原位杂交技术辅助诊断膀胱尿路上皮癌的可行性。方法:标记为17号染色体着丝粒及9号染色体p16位点9p21区带探针,采用荧光原位杂交技术(Fluorescence in Situ Hybridization FISH)对80例膀胱肿瘤患者尿液间期细胞核进行荧光原位杂交,以20例健康志愿者作为正常对照组,建立阈值。以术后病理结果作为诊断"金标准",对80例膀胱肿瘤患者同时行尿脱落细胞学检查,与FISH进行比较。结果:17号染色体和9p21的畸变率分别为57.5%和63.8%。17号染色体畸变率主要表现为多倍体,与膀胱癌的分级有显著相关性(P<0.01);9号染色体畸变率主要变现为染色体缺失,与膀胱癌分期分级均无相关性(P>0.05)。尿脱落细胞学灵敏度为12.2%,FTSH技术灵敏度为86.5%;两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论:荧光原位杂交技术可以作为膀胱尿路上皮癌诊断的一项重要方法,并可能在预后判断中具有重要临床意义。     

脊髓组织内微血管过氧化物酶组织化学染色方法的实验研究

本文以正常及损伤脊髓组织为材料,对内源性过氧化物酶染色显示微血管的方法进行了实验研究。结果,组织用10％缓冲福尔马林4℃固定6—12小时,或微波固定40～120秒,冰冻切片30～50μm、DAB-NiCl显示血管最好。该方法不用灌注,对血管无扩张、破裂作用,无人为改变,可以定量或半定量判定组织器官活体时的血液循环,可用于正常及损伤脊髓组织内微血管形态学研究和定量分析。     

原核表达系统T7RNA聚合酶/启动子在真核细胞中表达目的基因的实验研究

将目前高表达水平强大的原核表达系统之一T7RNA聚合酶 启动子表达系统通过一系列改进引入真核细胞。通过转染真核细胞实验表明 ,采用真核启动子CMV调控T7RNA聚合酶的表达和在T7启动子下游插入EMCVIRES序列两种解决方案能使该原核表达系统在真核细胞高效表达目的基因 ,且能适应不同的真核细胞环境 ,是一良好的细胞类型非依赖的表达体系。     

链霉菌702产孢子固体培养基和培养条件的筛选

通过单因素实验、均匀设计和正交实验对链霉菌702产抱子培养基和培养条件进行筛选,筛选到的最佳培养基组成为：马铃薯2009／L,葡萄糖25g／L．最佳培养条件为培养温度37℃、培养时间5天和培养基初始pH值8．实验结果表明,采用优化后的培养基和培养条件,使链霉菌702产抱子数达到4．07亿,比原来培养基（高氏一号培养基）产抱予量提高了8．7倍,培养时间却从原来的7天缩短到现在的5天．     

非小细胞肺癌中HMGA2的表达与细胞增殖的关系

目的探讨High mobility group A2 protein（HMGA2）的表达对非小细胞肺癌生长、转移的影响,与临床病理参数和细胞增殖的关系。方法应用免疫组化法检测38例非小细胞肺癌组织（23例鳞癌,15例腺癌）及癌旁的正常肺组织标本中HMGA2和Ki-67的表达。结果HMGA2和Ki-67在癌旁的正常肺组织中均不表达,而在肺癌组织中的表达阳性率分别为39．47％、44．74％,二者在肺癌组和癌旁的正常肺组织组之间差异有显著性（P〈0．05）。HMGA2的表达在伴淋巴结转移的肺癌组织明显高于不伴有淋巴结转移的肺癌组织（P〈0．05）,而与其他临床病理参数包括肿瘤的分化程度、肿瘤大小和TNM分期以及细胞增殖指标Ki-67之间没有相关性。结论本研究显示HMGA2在非小细胞肺癌组织中异常表达,可能与肺癌的发生和进展有关。