大肠杆菌离子束诱变及rpoB基因两个新的利福平抗性位点鉴定

以60Co-γ射线辐照为参照体系,研究了低能氮离子诱发大肠杆菌利福平抗性突变。结果表明,低能氮离子注入具有损伤轻而突变率较高的特点。碱基置换型突变与其检出频率分析表明,CG→TA、GC→AT、AT→GC转换与AT→TA颠换为低能氮离子诱发大肠杆菌活体细胞内的高频突变,占检出总突变数的875% (77/88)。并鉴定出大肠杆菌rpoB基因中两个新的利福平抗性决定位点。位点一位于1551位鸟嘌呤脱氧核苷酸（dG）被胞嘧啶脱氧核苷酸（dC）取代,导致Gln517 (谷氨酰胺残基) 被His (组氨酸) 替代;位点二位于1692的胞嘧啶脱氧核苷酸（dC）被胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dT）替代,导致Pro564 (脯氨酸残基) 被Leu (亮氨酸) 取代,使突变子产生抗性。其中位点一还未见报道,位点二的同义突变已有报道,但1692位点C到T的核苷酸突变并没有得到鉴定。     

海洋真菌岩藻多糖酶的固态发酵条件研究*

本文对海洋真菌Dendryphiella arenaria(TM94)岩藻多糖酶的固态发酵条件进行了研究,主要内容包括碳源、氮源、添加物、起始pH、接种量及温度等.固态发酵最佳培养基组成麸皮7.5g,葡萄糖0.5g,海带粉0.6g,NaNO3为4g/L最佳培养条件为培养温度28℃,起始pH6,接种量3ml(孢子浓度为106个/ml).在28℃培养24h,酶活力可达35.5IU/g干培养基,比活力为1.39IU/mg蛋白质.对岩藻多糖酶酶学性质也进行了研究.     

Rhizopus delemar菌固态发酵生物量测定及其脂肪酶合成特征

研究了Rhizopus delemar菌固态发酵曲中麦角固醇的提取及其高效液相色谱（HPLC）测定方法。结果表明,固态曲中麦角固醇分离提取以1：25（w/v)的丙酮回流浸提2.0h为最佳,HPLC测定麦角固醇的条件为：HypersilC-8柱。甲醇/水（85/15,v/v)为流动相,流速为1.0mL/min,紫外检测波长为282nm。柱温为30℃。依据HPLC的分析测定,确定了麦角固醇与菌丝体间的定量关系,并以此为基础。测定了Rhizopus delemar菌固态发酵过程中的生物量变化。得到了生长曲线,发现当发酵培养至60h时固态曲中的生物量达到最大值为0.18g菌丝体/g干曲,而该菌所合成的脂肪酶的活力在48h达到最大值。     

微生物代谢环境难降解性有机物的酶学研究进展

随着人类社会的快速发展,工业化水平不断提高,产生大量的污染物并排放到环境中,给人类的生活和身体健康造成了严重的影响。这些污染物中包含种类繁多的难降解有机物,如多芳香烃(PAHs)、环硝胺类物质(RDX、HMX和CL-20)、多氯联苯(PCBs)及烷烃类化合物等,对自然界的污染危害大。微生物可以消除它们对污染的影响,研究结果表明微生物的代谢或共代谢活动是降解这些物质的有效途径,降解起始阶段需要一些关键酶的参与活动,以氧化还原酶为主。这些氧化还原酶一般与细胞膜上其他的活性组分在一起,形成一个氧化还原系统氧化底物。被氧化的中间物质再通过一系列酶催化继续氧化成三羧酸中间代谢产物被微生物所利用。以下综述了与这些物质降解相关的代谢途径和关键的酶,展望今后在开展这类研究工作时要加强降解微生物的筛选和相关酶学的研究,进一步研究这些污染物的代谢或共代谢途径和机理,为工程化治理环境污染提供依据。     

低能离子注入技术诱变选育木聚糖酶高产菌

利用离子束注入技术对木聚糖酶产生菌黑曲霉(Aspergillus niger)A3进行诱变筛选,得到高产菌株N212。通过正交设计实验,优化了该高产菌的液体发酵条件,发现适合产酶的培养基是:8%玉米芯,1.0%麸皮,0.1%吐温80,0.5%(NH4)2SO4,0.5%NaNO3,其他无机盐的成分与M ande ls营养盐液中的成分一样,pH5.4。在优化后的培养条件下N212的产酶达到600 IU/mL。