短期饥饿对禾花鲤肌肉KLF15-BCAA信号通路影响研究

鱼类骨骼肌不仅是体内主要蛋白质储存库,还是代谢活跃和适应代谢变化高度可塑性的组织.为了揭示在食物缺乏条件下,鱼类肌肉支链氨基酸(branched chain amino acids,BCAA)代谢变化的适应性调控机制,本研究以禾花鲤(Procypris merus) (336±30)g为研究对象,分别设立了4个不同饥饿...     

尿液表面增强拉曼光谱的初步研究

利用紫外与可见分光光度计测量银溶胶与尿液的吸收谱,采用拉曼光谱测量系统检测并研究分析了尿液加入银胶前后的拉曼光谱.基于表面增强技术,尿液的拉曼光谱信号得到显著增强,尿液中微弱的尿酸SERS信号被成功检测.文中对尿液的拉曼峰进行了谱峰归属,并分析了晨尿与夜尿的SERS谱.对晨尿的检测具有更高的可信度和信噪比.研究结果表明...     

MHC DQA基因的分子进化研究：Ⅰ.等位基因多态性保持机制及GC含量对…

对７种哺乳动物ＭＨＣ ＤＱＡ座位的２３个等位基因不同外显子,抗原识别位点和ＥＮ２的非ＡＲＳ的核苷酸同义替换率和异义替换率进行了分析,发现在ＨＬＡ－ＤＱＡ１的７个等位基因之间和Ｉａ Ａａ８个等位基因之间,即同一物种ＤＱＡ１座位内,ＡＲＳ的ＰＮ均显著高于Ｐｓ２倍以上,表现超显性选择;而不同物种ＤＱＡ基因（ＤＱＡ１或ＤＱＡ２）或同一物种的ＤＱＡ基因（ＤＱＡ１和ＤＱＡ２）的ＡＲＳ之间和各比较组的ＮＡＥＮ２     

猪链球菌2型菌毛样结构蛋白SSU2101原核表达及其免疫保护性

为了研究猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,S.suis 2)05ZYH33株预测的菌毛样结构蛋白(Pili-like protein,PLP)SSU2101的免疫保护性作用,本试验通过PCR扩增出plp基因片段,进一步将目的基因克隆到表达载体pET32a中,IPTG诱导重组蛋白表达,亲和层析法纯化目的蛋白.Western blot分析表明该重组蛋白具有良好的免疫原性,动物试验结果证实PLP蛋白对S.suis 2强致病株感染小鼠具有显著的免疫保护作用,提示菌毛样结构蛋白SSU2101是理想的猪链球菌 2型亚单位疫苗的候选分子.     

几种PCR方法在克隆鸭肠炎病毒未知基因中的应用

以DEV基因组DNA为模板, 用简并PCR、改良Targeted gene walking PCR、改良的热不对称交错PCR和Long-PCR, 获得了5350 bp、11083 bp和2905 bp三段DEV未知基因片段, DNA序列分析发现包含9个开放阅读框, 将这些序列提交GenBank分别获得的登录号为: EF554396~EF554403。结果表明, 多种PCR方法联合使用可以高效的实现对鸭肠炎病毒未知基因的克隆。     

大腹园蛛鞭毛样丝蛋白cDNA克隆

应用RT-PCR技术,从大腹圆蛛（Araneus ventricosus)壶腹腺中扩增出鞭毛样丝蛋白基因（flagelldid-form silk protein gene),经1.5%琼脂糖凝胶电泳分离,WizardPCR Preps DNA Purification System回收后,将其克隆在pGEM-T载体中,经限制性核酸内切酶鉴定和核苷酸序列分析证实,构建的重组擀粒pSF1中含有蜂蛛鞭毛样丝蛋白基因,且含有3个重复序列。     

不同温度效应杀虫剂诱导对绿盲蝽三种解毒酶活力的影响

【目的】为了明确解毒酶对绿盲蝽Apolygus lucorum防治药剂温度效应的影响机制。【方法】本文测定了绿盲蝽3龄若虫体内3种主要解毒酶活力随温度变化的"钟形"曲线,以及在不同温度效应杀虫剂诱导后对绿盲蝽体内解毒酶"钟形"曲线的影响。【结果】在供试温度10~40℃范围内,绿盲蝽体内3种主要解毒酶,在25℃时活力均最高,且显著高于其他温度处理。在不同温度下,4种不同温度效应杀虫剂诱导后对绿盲蝽体内解毒酶活力影响测定结果来看,谷胱甘肽-S-转移酶受杀虫剂诱导影响,可能参与了负温度效应杀虫剂溴虫腈的代谢,其在20~30℃的温度范围内,可能参与了吡虫啉和辛硫磷的部分代谢,而正温度效应杀虫剂氟铃脲在低温时毒力较低,可能与其诱导该酶在低温时活力升高相关。在15℃左右的低温时,绿盲蝽体内羧酸酯酶和多功能氧化酶易受氟铃脲和溴虫腈诱导而活力增加,而在20~35℃,这两种酶活力不易受杀虫剂诱导,且辛硫磷、溴虫腈和吡虫啉可对绿盲蝽体内两种酶活力产生一定的抑制作用。【结论】绿盲蝽体内解毒酶活力可明显受到温度影响,而在杀虫剂诱导条件下,其可对绿盲蝽防治药剂的温度效应产生显著影响。     

秋水仙碱诱导甘草四倍体的研究

以胀果甘草成熟种子为材料,消毒后在培养皿中萌动处理12 h、24 h、36 h,用浓度为0.05%、0.075%、0.10%的秋水仙碱处理12 h、24 h、36 h,来进行四倍体的诱导,并对诱导处理后获得的再生植株进行染色体鉴定。结果表明:种子萌动处理24 h后,用浓度为0.075%的秋水仙碱溶液处理24 h诱导效果最好,变异率为41%。其体细胞染色体数目由2n=2x=16变为2n=4x=32。     

大肠杆菌外膜蛋白ompW基因敲除菌的构建及其对两种抗生素的敏感性

探讨大肠杆菌ompW基因敲除后,硫酸新霉素和氨苄青霉素对敲除菌最低抑菌浓度(MIC)和生存率的影响,进而分析OmpW的功能.[方法]运用Red重组技术将大肠杆菌K12染色体上基因ompW敲除,构建缺陷株△ompW.然后分别测定硫酸新霉素和氨苄青霉素对正常菌和△ompW菌的最小抑菌浓度(MIC)及次抑菌浓度(1/2 MIC)下K12和△ompW菌的生存率.[结果]经PCR鉴定和通过提取膜蛋白进行western blot 分析表明,成功获得ompW敲除菌.抗生素分析表明,K12菌对硫酸新霉素的MIC为8.0 μg/mL,生存率为98.0％;△ompW菌对新霉素的MIC为1.7 μg/mL,而其生存率仅为39.0％.而k12对氨苄新霉素的MIC为16.0 μg/mL,△ompW为3.3 μg/mL;1/2 MIC下K12生存率为70.4％,而△ompW为30.3％.[结论]ompW基因缺陷株对两抗生素的敏感性大大增强,表明ompW在细菌抗性方面起着关键作用.     

12份连翘种质资源的核型参数分析

采用常规压片法对4个连翘属原种以及6个金钟连翘品种和2个朝鲜连翘品种的核型进行了分析。研究结果发现,除金钟连翘品种Goldrausch为四倍体(2n=4x=56)外,其余11份种质均为二倍体(2n=2x=28),染色体基数为14。连翘、卵叶连翘、东北连翘、朝鲜连翘的核型分别为2A、3B、2B、3B型,6个金钟连翘品种的核型包括2A、2B、3B 3种,2个朝鲜连翘品种的核型包括2B、3B。12份连翘种质的着丝粒指数差异性不大,介于9.65%~50.00%,染色体类型以中部(m)、近中部(sm)以及近端部(st)染色体为主,未发现端部染色体和随体。结果表明,连翘和东北连翘的亲缘关系最近,与卵叶连翘的亲缘关系最远,金钟连翘品种与东北连翘、朝鲜连翘之间亲缘关系较近。研究结果为连翘属种间、品种间杂交育种和亲缘关系研究提供了细胞学基础。