纳米银溶胶介导的表面增强拉曼用于细菌的鉴定研究

运用表面增强拉曼散射(Surface enhanced Raman scattering,SERS)方法,实现两种大肠埃希菌和两种金黄色葡萄球菌间的高效检测与鉴别。最终为临床上细菌的鉴别与分类提供一种快速有效的鉴别方法。利用微波法制备了适合细菌SERS检测的纳米银溶胶,并以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin resistant Staphylococcus aurens,MRSA)为检测样本,优化了银溶胶与菌液的体积比、作用时间,得到最佳测试条件为银溶胶与菌液(麦氏浊度为0.5)体积比为1?2,作用时间为1 h,将其用于两种大肠埃希菌JM109、DH5α和两种金黄色葡萄球菌ATCC25923、MRSA的SERS检测,并对相应特征峰进行归属。分别选择了30例大肠埃希菌JM109、DH5α和30例金黄色葡萄球菌ATCC25923和MRSA作为样本训练集,6例大肠埃希菌JM109、DH5α和6例ATCC25923、MRSA为测试集,基于主成分分析法(PCA)联合线性判别法(LDA)模型,JM109、DH5α训练集分类正确率为93.33%,ATCC25923、MRSA训练集分类正确率为76.67%,盲测集分类正确率分别为91.67%、75%。结果表明,制备的银纳米溶胶作为增强介质测得的不同细菌的SERS图谱使用该判别模型时能较好地区分不同种类的细菌,而对于同种细菌的普通菌和耐药菌的鉴别效果相对较差。本研究为临床上细菌的快速准确鉴别与分类提供参考。     

酪酸梭菌治疗轻微型肝性脑病的临床疗效

目的评价酪酸梭菌治疗轻微型肝性脑病的临床疗效。方法选取2018年1月至2019年1月就诊于兰州大学第一医院的90例乙肝肝硬化并发轻微肝性脑病患者,按随机对照试验设计原则将其分成试验组和对照组。试验组(n=45)患者接受基础治疗+酪酸梭菌胶囊治疗,对照组(n=45)患者接受基础治疗+安慰剂治疗,疗程均为3个月。分别收集并比较两组患者治疗前后血氨、数字符号试验(DST)、数字连接试验(NCT)、终末期肝病模型评分(MELD)、肝肾功能等指标的变化及药物相关的不良反应。结果试验组完成治疗者40例,1例因车祸死亡,3例退出试验,1例违背治疗方案。对照组完成治疗者41例,1例退出试验者,2例失访者,1例违背治疗方案。治疗前,两组患者血氨、DST、NCT、MELD、Child-Push评分差异无统计学意义(均P0.05)。治疗后,两组患者上述指标水平均有所下降,且试验组患者上述指标水平的下降幅度大于对照组(均P0.05)。试验组显性肝性脑病发生率(5%,2/40)低于对照组(12%,5/41),但差异无统计学意义(P0.05)。治疗前后两组患者ALT、AST、尿素、肌酐水平差异均无统计学意义(均P0.05),且治疗过程中两组患者均未出现药物不良反应。结论酪酸梭菌治疗乙肝肝硬化并发轻微肝性脑病疗效显著,是一种安全有效的治疗方法,值得临床推广。     

以耐赖氨酸为标记的金霉素产生菌抗噬菌体变株的选育

本文以金霉素产生菌Ｆ－３０３作为出发菌株,通过ＵＶ＋ＥＭＳ复合处理,双层法不同梯度耐赖氨酸作标记,进行抗噬菌体的金霉素菌株选育,获得Ｆｓ－４８－１４菌株。该菌株不但表达了抗噬菌体的特性,而且产素效价超过Ｆ－３０３。通过无机盐正交条件试验,取得抗性变株最佳的发酵培养基配方。     

秋茄幼苗对盐度、淹水环境的生长适应

室内模拟12个盐度+淹水处理组合对红树植物秋茄幼苗生长的影响,测定不同组合下秋茄幼苗的株高、茎高、基径、节数、叶数、根生物量、茎生物量、叶生物量及总生物量等9项指标.结果表明:盐度-淹水交互处理及盐度处理对秋茄各项生长指标影响显著,淹水处理对株高、茎高、基径、节数及叶数影响不显著,对根生物量、茎生物量、叶生物量及总生物量影响显著;秋茄幼苗生长量及生物量积累随盐度升高而降低,随淹水时间增加而下降;结合主成分分析得出,盐度7‰+淹水2 h下秋茄幼苗生长最好,临界胁迫组合为盐度21‰+淹水8 h处理组.     

人尿道上皮细胞T7噬菌体展示cDNA文库的构建与鉴定

[目的]构建人尿道上皮细胞(SV-HUC-1)T7噬菌体展示c DNA文库,为研究人尿道上皮细胞与生殖道感染病原体的相互作用奠定基础。[方法]用Trizol试剂提取SV-HUC-1细胞总RNA,分离纯化出mRNA,经反转录合成得到其双链c DNA,在双链c DNA末端加上定向的EcoRⅠ/HindⅢ黏性末端,然后收集并纯化200bp以上的双链c DNA片段,连接于T7噬菌体载体,经体外包装后转入BLT5403宿主菌,T7噬菌体展示c DNA文库构建成功。[结果]将文库扩增后,用噬斑试验检测其库容,结果为1.2×106pfu/cm3。用PCR鉴定随机挑取的噬菌斑,计算其重组率达93.75%,且插入片段都大于200bp。[结论]成功构建了SV-HUC-1细胞T7噬菌体展示c DNA文库,为下一步研究泌尿生殖道感染病原体与人尿道上皮细胞的相互作用奠定了前期实验基础。     

冬虫夏草产区土壤特征和微生物组成分析

冬虫夏草Ophiocordyceps sinensis是我国珍稀濒危药材,具有严格的分布区域,而特定的生态系统更是冬虫夏草资源生长条件苛刻的重要因素。本研究采集11个冬虫夏草主产区的土样,测定土壤理化性质与菌群结构及其对冬虫夏草产量的影响并对关键因子进行验证。结果表明：（1）各产区土壤N、P、K、pH、EC和H2O等参数差异不显著,土壤微生物群落中以酸杆菌门Acidobacteria（28.6%~36.5%）、变形菌门Proteobacteria（21.5%~32.2%）为主要优势菌门,且土壤氮元素含量与变形菌门和硝化菌门Nitrospirae的菌群丰度正相关（0.665和0.668）。（2）对影响虫草产量的关键因子拆分,己科河菌门Rokubacteria及酸杆菌门分别提供了0.2620和0.0986的贡献度。（3）通过对己科河菌门菌群功能分析,合成抗生素是其核心功能,功能表达丰度最高可达28%。（4）进一步对富含己科河菌门的土样中含有的病原菌鉴定,被孢霉属Mortierella链格孢属Alternaria等丰度分别降低了0.054和0.002,踏查样区（25 m×25 m）内虫草产量也可达到31根。综上,冬虫夏草产区之间的生境参数虽然具有相似性,但在富含己科河菌门的土壤中,病原菌种类及丰度呈现下降趋势,推测对虫草产出有重要贡献。     

温度骤变对日本医蛭肠道菌群的影响

目的 研究急性温度应激条件下日本医蛭肠道微生物菌群多样性的组成及变化。 方法 选取健康日本医蛭200尾,设置对照组与试验组(各100尾),对照组25 ℃水体温度饲养、试验1组养殖水体温度急剧降温(30 ℃→4 ℃)、试验2组养殖水体温度急剧升温(4 ℃→25 ℃)。采用高通量测序技术分别研究对照组和试验组的日本医蛭肠道菌群特征及多样性变化。 结果 门分类水平上,日本医蛭肠道核心主导菌群为变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes);属分类水平上,温度急剧变化后,气单胞菌属(Aeromonas)丰度显著增加,Mucinivorans丰度显著减少,脱硫弧菌属(Desulfovibrio)丰度减少。 结论 温度骤变对日本医蛭肠道主导菌多样性组成及丰度产生了一定的影响,有害致病菌增加,有益菌减少,从而最终导致水蛭出现病态及死亡现象。本研究对于指导人工养殖实践、日本医蛭药材资源可持续利用以及深入开展肠道微生物分子调控机制研究都具有重要的理论和实践意义。     

抗药性突变肌苷高产菌的选育

以枯草芽孢杆菌(Bacillur subtilis)22为出发菌株,经紫外线诱变,分别获得对链霉素(Sm)、盐酸羟胺(Hc)、叠氮化钠(Sa)有抗性的突变株,产肌苷均明显高于出发株。其中链霉素抗性突变株Sm-37-18产肌苷最高,在最佳发酵条件下,产肌苷达19.49g/L,较出发株提高38.4%,发酵周期由60小时缩短至48小时。     

不同密度下和不同发情期时段中雄性麋鹿的繁殖计策

从1998年到2001年,我们研究了密度、发情期与雄性麋鹿繁殖计策的关系。我们选择了江苏大丰麋鹿保护区的两个麋鹿群体和北京麋鹿苑的一个麋鹿群体,观察记录了发情期前期、中期和后期中实验麋鹿种群参数、围栏大小、群体中雄鹿的繁殖计策、群主变更情况、后宫数目以及后宫雌鹿数。尽管不同种群和不同发情期的雄鹿繁殖计策有差异,但是各个群体中雄性麋鹿都有占群、偷袭交配和求偶集会3种繁殖计策。利用因子分析提取了两个主成分:主成分1主要代表实验围栏、麋鹿存栏数和密度等因子的影响,主成分2主要代表发情期时段因子的影响。这两个主成分解释了全部因素效应的90.72%。用Spearman相关分析发现,占群计策与主成分2呈极显著负相关,求偶集会计策与主成分1呈显著正相关,最大后宫雌鹿个体数与主成分1极显著正相关,而偷袭交配计策和后宫数目与主成分1和2均无显著相关。据此推测,占群和求偶集会繁殖计策分别受密度和发情期时段的影响,而偷袭交配行为对密度和发情期时段不敏感。我们还探讨了麋鹿发情行为计策的环境适应性,从行为学角度为麋鹿保护提供了新思路。     

生物滴滤池处理废气中生物质的积累与控制措施

生物滴滤池在废气处理中具有其无以比拟的优点,但由于其在工业化应用面临的最大难题就是如何解决生物质积累所带来的种种问题。综述分析生物滴滤池处理废气中生物质的积累的危害;以εf和αf为参数探求其积累的机理;生物质积累的控制措施,包括化学法、物理机械法与其他一些方法。