原花青素提高鱼藤酮诱导的帕金森模型细胞活力的研究

目的:探究原花青素提高帕金森模型细胞活力的机制。方法:实验1-用不同浓度鱼藤酮处理(1μmol/L,2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/L,每组6个复孔)人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y 24 h,使用MTT法检测其细胞活力,选择合适的浓度(10μmol/L)构建帕金森疾病(PD)细胞模型。实验2-将SH-SY5Y细胞分为对照组与实验组(每组4个复孔),10μmol/L的鱼藤酮处理24 h后使用显微镜观察细胞的数目。实验3-将SH-SY5Y细胞分为对照组与实验组(每组3个复孔),按上述方法处理,PI染色后流式细胞仪检测细胞周期。实验4-SH-SY5Y细胞预孵育浓度为10μg/ml的原花青素(PC) 4 h后,使用浓度为10μmol/L的鱼藤酮继续处理,设置对照组,原花青素单独处理组,鱼藤酮单独处理组(每组6个复孔),处理24 h后,使用MTT法检测各组细胞活力。实验5-将SH-SY5Y细胞预孵育原花青素4 h后,用鱼藤酮(10μmol/L)继续处理24 h,设置对照组,鱼藤酮单独处理组(每组3个复孔),DCFH-DA探针染色后流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量的变化...     

不同放牧强度下羊草草原群落斑块植被-土壤特征

植物群落斑块化是天然放牧草地最基本的特征之一,影响着草地生态系统结构和功能。本研究以不同放牧强度下典型羊草草原植物群落斑块为研究对象,对植物群落多样性特征、初级生产力、土壤理化性质、植物养分含量及其相关关系进行研究。结果表明:随着放牧强度的增加,斑块群落内植物种类组成发生改变并趋于简单化,放牧敏感物种消失,物种多样性降低;高放牧强度显著降低了植物群落的地上净初级生产力;初级生产力与土壤氮含量具有显著的正相关关系;随着放牧强度增加,土壤碳、氮、磷含量呈现增加趋势;由于放牧强度及斑块结构的影响,土壤碳、氮、磷含量存在空间分布差异;同时,斑块群落中植被碳、氮、磷含量与土壤碳、氮、磷含量之间没有显著的相关性。研究表明,放牧能够改变草地群落结构和功能,引起植被-土壤养分之间的非同步性发展。     

IGF-I和GH在缺氧缺血性脑病新生儿血清中的表达及其临床意义

目的：探究新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）血清胰岛素生长因子1（IGF-I）和生长激素（GH）水平与患儿病情程度之间的关系。 方法：选取2005 年6 月~2014 年10 月期间我院产科出生的HIE 患儿49 例为研究对象（研究组）,选取同期健康新生儿50 例作 为对照组,分别于出生后72 小时内和26~28 天测量IGF-I和GH水平,HIE 组患儿在急性期和恢复期做神经行为测定(NBNA), 分析各个指标之间的关系。结果：新生儿血清IGF-I水平在72 h内和26-28 d四组间比较,其中重度组低于其他三组,中度组低于 轻度和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);新生儿血清GH 水平在72 h内和26~28 d四组间比较,差异无统计学意义（P>0.5）; 新生儿血清IGF-I与GH不存在显著相关性（r=0.193,P>0.05）;HIE 组患儿IGF-I 水平与NBNA分值在急性期和恢复期均存在显 著正相关(r=0.315,P<0.05;r=0.249,P<0.05),而GH 与NBNA 分值在急性期和恢复期均不存在显著的相关性（r=0.210,P>0.05）。 结论：新生儿IGF-I水平不仅可以预测HIE 患儿的病情,且可以影响新生儿HIE的预后情况。     

刺糖多孢菌中铵载体蛋白基因amtS的克隆及功能研究

目的:铵离子是细胞内合成各种核酸、氨基酸和辅助因子等含氮化合物的重要原料之一。微生物细胞膜上的铵载体蛋白介导了铵离子的转运。通过异源表达刺糖多孢菌中铵载体蛋白基因,研究其对链霉菌产孢能力和次级代谢产物产量的影响。方法:从刺糖多孢菌S04-41菌株中克隆铵载体蛋白基因amt S,通过接合转移导入天蓝色链霉菌M145和变铅青链霉菌TK24中,分析比较amt S基因的异源表达对其产孢能力和次级代谢产物产量的影响。结果:天蓝色链霉菌重组菌株M145/p MF-amt S和变铅青链霉菌重组菌株TK24/p MF-amt S中放线紫红素的产量分别提高了2.85倍和30.02倍。结论:刺糖多孢菌中的铵载体蛋白能够提高链霉菌中次生代谢产物的产量,为进一步研究该基因的功能与对刺糖多孢菌中多杀菌素合成的作用奠定了重要基础。     

多重耐药铜绿假单胞菌中Ⅰ型整合子新结构的发现及其与耐药的相关性

[目的]研究临床多重耐药铜绿假单胞菌中Ⅰ型整合子的结构特征,探讨整合子与细菌多重耐药之间的相关性.[方法]收集临床样品中的铜绿假单胞菌,从中挑选多重耐药菌.采用聚合酶链式反应扩增Ⅰ型整合子可变区,应用酶切方法和DNA测序技术分析整合子基因结构,并采用SPSS19.0软件分析整合子与耐药表型间的相关性.[结果]多重耐药铜绿假单胞菌中Ⅰ型整合子的检出率为27.3％.Ⅰ型整合子基因盒排列形式共有3种(1500 bp、2300 bp和4000 bp),其中2种在其他细菌中也有发现.基因盒所编码的耐药基因有氨基糖苷类抗生素抗性基因(aadA、aadB、aac(6')Ⅱ和aadA13)、β-内酰胺类抗生素抗性基因(blaCARB8和oxa10)和氯霉素外排泵基因(cmlA8),耐药表型相关性分析表明整合子与氨基糖苷类抗生素抗性密切相关.[结论]在多重耐药铜绿假单胞菌临床分离株中发现了3种不同Ⅰ型整合子结构,这3种结构中均含有氨基糖苷类抗生素耐药基因,其中aadB-aac(6')Ⅱ-blaCARB8结构最为流行.     

人喉癌细胞系Hep-2 中CD133 阳性肿瘤干细胞的分离及意义

目的:研究喉癌细胞系Hep-2中CD133的表达;比较CD133~+细胞、未分选细胞、CD133~-细胞的体外增殖、克隆形成能力及其在裸鼠体内的成瘤能力;探讨喉癌肝细胞对化疗药物顺铂(cisplatin,DDP)的抵抗作用。方法:采用流式细胞仪检测CD133在Hep-2细胞系中的表达;免疫磁珠分选技术纯化CD133阳性肿瘤细胞;使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和平板克隆形成实验检测分选所得各细胞亚群细胞以及未分选细胞的体外增殖能力和克隆形成能力;将CD133阳性肿瘤细胞和CD133阴性肿瘤细胞以一定的数量级注入重症联合免疫缺陷小鼠腹部皮下,比较其成瘤差异性;此外,使用DDP干预分选所得各细胞亚群细胞,检测比较CD133阳性肿瘤细胞和CD133阴性肿瘤细胞的体外增殖能力与体内成瘤能力。结果:流式细胞仪示CD133在Hep-2细胞系中呈微量恒定表达,表达概率为40.12±1.32%;CD133阳性肿瘤细胞的体外增殖能力显著强于CD133阴性肿瘤细胞的增殖能力(P0.05),且其克隆形成能力也强于CD133阴性肿瘤细胞;体内成瘤实验结果显示CD133阳性肿瘤细胞较CD133阴性细胞、未分选细胞在重症联合免疫缺陷小鼠体内具有更强的成瘤性(P0.05);在DDP的干预下,相对于CD133阴性肿瘤细胞,CD133阳性肿瘤细胞表现出更强的抵抗力。结论:喉癌Hep-2细胞系中,CD133阳性癌细胞具有强的体外增殖能力、体内成瘤能力且对化疗药物具有较强的抵抗性,可作为喉癌肿瘤干细胞的标志之一。     

肌肽通过调节JNK和NF-kappaB通路抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡

高血糖症是糖尿病并发心血管疾病的重要危险因素. 高血糖诱导产生的活性氧（ROS）能够引起糖尿病心肌病.我们的前期工作已经证实,肌肽对高糖环境下细胞凋亡具有保护作用,但其机制尚未明确.为研究肌肽对高糖诱导的大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及相关信号机制,以高糖诱导心肌细胞H9c2为模型,采用Brdu-ELISA法检测细胞增殖过程中DNA合成情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹实验检测JNK/c-Jun、NF-κB的磷酸化水平,RT-PCR检测TNF-α的mRNA表达. 实验结果显示,肌肽能够提高高糖损伤的H9c2细胞增殖能力,降低心肌细胞凋亡,抑制高糖激活的JNK、c-Jun和NF-κB磷酸化水平及TNFα的mRNA表达. 上述结果表明,肌肽拮抗高糖诱导的心肌细胞凋亡机制与抑制p-JNK /p-c-Jun、p-NF-κB水平和TNF-α表达有关.     

甘蔗SPSⅢ5′侧翼序列缺失表达载体的构建及其转化烟草的研究

蔗糖磷酸合成酶是糖代谢调节的关键酶之一,根据本实验室克隆到的SPSⅢ5′侧翼序列,构建了3个侧翼序列缺失表达载体,转化云烟85成功获得转基因植株,可用于核心启动子确定的研究。转基因植株叶片冰冻切片结果表明3段缺失侧翼序列均有启动子活性。     

塞来昔布对直肠癌HCA-7 细胞放射敏感性的实验研究

目的:观察环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对直肠癌HCA-7细胞株的放射敏感性及探讨其机制。方法:采用MTT法检测塞来昔布作用不同时间对直肠癌HCA-7细胞株增殖的影响,计算出塞来昔布的半数抑制浓度IC50;HCA-7细胞克隆形成实验用于检测塞来昔布对HCA-7细胞的放射敏感性,并绘制存活曲线;流式细胞仪(FCM)测定塞来昔布对HCA-7的细胞周期的影响。结果:塞来昔布对HCA-7细胞株的抑制率随时间的延长而升高,48h的IC50是40.19μmol/L;照射组+药物组的SF2、D0、Dq、SER较单纯照射组均有所下降。塞来昔布使HCA-7细胞发生G2和M期阻滞,并抑制S期的比例。结论:塞来昔布能增加直肠癌HCA-7细胞的放射敏感性。     

TL-1型磁场扫描式理疗机对人血清SOD活力及MDA含量的影响

目的观察TL-1型磁场扫描式理疗机对人血清超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量的影响。方法用此机给受试者每日磁疗一次,每次30分钟,两周为一疗程,于磁疗开始前及一疗程后取空腹静脉血测定血清SOD活力及MDA含量。结果磁疗后血清SOD活力显著升高(p<0.01),MDA含量明显降低(p<0.01)。结论此机可对人体起到保健和治疗作用。