排序方式: 共有44条查询结果,搜索用时 15 毫秒
31.
抑丝酶 (serineproteinaseinhibitor,ser pin)是一类与α1 蛋白酶抑制剂 (α1 PI)结构相类似的蛋白质组成的超家族 ,在一系列重要的生理病理过程中 ,如凝血、纤溶、补体活化、感染、细胞迁移等 ,发挥着重要作用。其中 ,鸡卵清蛋白亚家族又代表了一系列结构更为相似的抑丝酶蛋白 ,纤溶酶原激活剂抑制剂 2 (PAI 2 )、人白细胞弹性蛋白酶抑制剂(humanleukocyteelastaseinhibitor,HLEI)、胞浆抗蛋白酶 (CAP)、蛋白酶抑制剂 6 (PI 6 )、蛋白酶抑制剂 9(PI 9)等都… 相似文献
32.
33.
将编码379个氨基酸残基的PAI-1cDNA插入到含AOX1启动子和PHO1分泌信号肽序列的甲醇营养型酵母载体中,构建成表达质粒pYIS-1.表达质粒转化P.pastoris甲醇营养型酵母细胞,筛选His+Mut-表型的转化子,经低密度摇瓶培养,1%甲醇诱导表达7d后,培液经SDS-PAGE分析,PAI-1生物活性测定和Westernblot证实表达出分子量为43~51kD的4条PAI-1条带.表达的PAI-1能有效地分泌到培液中,占培液总蛋白的26%左右,达4mg/L培液;其比活性为1.16×104AU/mg.不同分子量PAI-1可能与其糖基化程度不同有关 相似文献
34.
甲醇营养型酵母表达系统的研究进展 总被引:6,自引:1,他引:6
甲醇营养型酵母越来越被人们用作外源基因的表达系统。本文综述其在表达质粒构建,表达株的筛选,表达产物的糖链加工以及它分拣外源蛋白进入过氧化物酶体等的特点,不仅具有广泛的商业用途,而且在理论研究特别是膜蛋白结构与功能方面也有潜在应用价值。 相似文献
35.
T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(T-lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1,Tiam1)是Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras-Related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)的特异性鸟苷酸交换因子(guanine nucleotide ex-change factor,GEF)。在细胞外信号刺激下Tiam1可以促进Rac1从无活性的GDP结合状态向有活性的GTP结合状态转换,有活性的Rac1-GTP与不同的下游效应分子相互作用,从而影响多种细胞事件。 相似文献
36.
ATF-PAI2CD融合蛋白基因在毕赤酵母中克隆、表达和鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
为了克隆尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)的氨基末端片段与纤溶酶原激活剂抑制物 2型(PAI 2 )突变体所构成的融合蛋白基因 ,并在Pichiapastoris中表达 ,应用PCR获得了人ATF PAI2CD融合蛋白基因cDNA(简称ATF PAI2CD) ,将其克隆到酵母表达载体pPIC9K ,获得融合基因表达质粒pZWY ATF PAI2CD .该质粒转化毕赤酵母菌GS115 ,用G4 18 YPD平板筛选高拷贝转化子 ,然后用甲醇诱导表达 .工程菌用摇瓶发酵 ,表达产物ATF PAI2CD占培养液中总蛋白 5 0 %以上 .经硫酸铵沉淀、分子筛和离子交换层析纯化得到的目标表达产物纯度达 95 % .Western印迹检测具有PAI 2与uPA的免疫原性 ,经牛奶板法检测具有纤溶抑制活性 .经流式细胞仪 (FCM )检测 ,能与肿瘤细胞特异性结合 .结果表明 ,ATF PAI2CD融合蛋白成功地在毕赤酵母中表达 ,且具有抑制uPA及与肿瘤细胞表面uPAR特异性结合的双重功能 .提示该融合蛋白可能具有良好的应用前景 . 相似文献
37.
组织型转谷氨酰胺酶的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,tTG,TGⅡ)是转谷氨酰胺酶家族成员之一,作为一种多功能的蛋白质,具有催化蛋白质谷氨酰胺残基与赖氨酸残基交联的活性,还能结合和水解GTP,在胞内和胞外产生多种功能,最初由于tTG在细胞凋亡中所起的重要作用而受到研究者的关注,最近的研究更表明它在细胞分化,基质的稳定、伤口愈合、信号转导、动物发育等许多生理和病理过程中起着重要作用,因而受到越来越多的研究。 相似文献
38.
尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)是参与细胞外基质降解的重要成分 ,在肿瘤细胞的侵袭和转移中起着重要作用。人们对uPA的结构、功能以及它与纤溶酶原激活抑制物 1 (PAI 1 )、uPA受体 (uPAR)的相互作用都进行了深入的研究。单链uPA是一种糖蛋白 ,含有 41 1个氨基酸。其结构可分为四部分 ,依次为 :上皮生长因子区、环状结构区、连接区和丝氨酸蛋白酶区。纤溶酶可裂解Lys1 5 8 Ile1 5 9之间的肽键 ,使单链uPA转变为双链uPA。uPA与其细胞表面受体结合后激活纤溶酶原 ,自身激活也增强。结合在细胞膜上的uPA… 相似文献
39.
nm23-H1-GFP融合蛋白在人肺癌细胞株中的表达及其对肿瘤细胞体外侵袭能力的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
研究 nm2 3- H1在肿瘤细胞中的定位及其对肿瘤细胞体外侵袭能力的影响 .用 RT- PCR方法检测人高和低转移肺巨细胞癌细胞株 95 D和 95 C中 nm2 3- H1的表达 ;利用分子克隆技术构建nm2 3- H1 -绿色荧光蛋白 ( GFP)融合基因表达质粒 ( p NM2 3- GFP) ,经脂质体转染将此质粒导入95 D和 95 C细胞中 ,筛选高荧光强度的克隆 ,用 Boyden小室模型检测其体外侵袭能力的变化 .结果显示 nm2 3- H1在 95 C细胞中的表达比 95 D高 .95 D细胞中表达的 nm2 3- H1 c DNA未发生突变 .表达的 nm2 3- H1 - GFP融合蛋白位于细胞的胞浆近胞膜处 .转染 p NM2 3- GFP质粒的 95 D和 95 C细胞体外侵袭能力明显比对照组低 .这些提示 nm2 3- H1高表达能明显降低肿瘤细胞体外侵袭能力 . 相似文献
40.
为了解尿激酶型纤溶酶激活物 (urokinase typeplaminogenactivator,uPA)的氨基末端片段 (amino terminalfrag ment,ATF)和纤溶酶激活物抑制剂 2 (plasminogenactivatorinhibitortype 2 ,PAI 2 )突变体PAI 2CD融合蛋白在大肠杆菌的表达情况及进一步研究其生物学活性、将ATF PAI2CD融合基因与大肠杆菌表达载体pLY 4重组得到表达质粒pZWE ATF PAI2CD ,以其转化大肠杆菌JF112 5 ,经温度诱导 ,ATF PAI2CD获得较高水平表达 ,融合蛋白质以包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白质的 15 %。包涵体经洗涤、8mol L尿素溶解、稀释复性及离子交换色谱一步分离 ,纯度达 90 % ,分子量与理论值相符。每升发酵液得重组融合蛋白质 5 0mg。经牛奶板法检测具有纤溶抑制活性 ,比活性达 12 0 0 0IU mg ;应用放射竞争法证实融合蛋白质能与肿瘤细胞表面的uPA受体特异性结合。双功能融合蛋白质的纤溶抑制活性与野生型PAI 2 (或PAI 2突变体 ,PAI 2CD)基本一致 ,与肿瘤细胞表面的uPA受体的结合能力同pro uPA。 相似文献