重组抗体药物研究进展及应用

重组抗体药物的发展经历了鼠源单克隆抗体（McAb）、人 鼠嵌合抗体、人源化抗体和全人抗体等阶段,目前初步应用于抗肿瘤、抗自身免疫病、抗感染等领域。保持和提高抗体的亲和力、降低抗体的免疫原性是抗体药物基因工程改造的两大原则。在嵌合抗体成功的基础上,通过CDR移植、表面修饰、抗体库以及转基因鼠技术,逐步提高人源化程度至100%。然而,实验室水平的研究结果与实际应用仍然存在一定差距。就重组抗体药物的基本概况、现存的问题与可能的解决办法以及在肿瘤、病毒性疾病和阿尔茨海默病治疗上的应用情况等进行了综述。     

球孢白僵菌热休克蛋白基因Bbhsp70的cDNA及上游序列克隆与分析

运用SMART RACE RT-PCR技术与DNA步移技术,首次从球孢白僵菌中克隆出完整的热休克蛋白基因Bbhsp70编码区序列及上游序列。该基因cDNA全长2405bp,5′端非翻译区171bp,3′端非翻译区263bp,开放阅读框(ORF)1971bp,编码656个氨基酸。成熟蛋白理论分子量为71.3kDa,理论等电点为4.92。上游序列长度3559bp,其中有305bp序列与cDNA序列重叠。分析表明,上游序列中没有明显的TATA-盒和CAAT-盒,但含有CCAAT-bindingfactor、GC-box等重要的转录因子结合位点,以及热激应答元件(HSE)和GATA元件等启动子顺式调控元件。     

球孢白僵菌羧基转运蛋白基因RNA干扰的沉默效应

羧基转运蛋白基因是近年来分离出的新基因,在虫生真菌中可能与穿透昆虫体壁时的能量代谢有关。构建了针对该基因的双链RNA干扰载体,采用芽生孢子转化法将载体质粒转入球孢白僵菌,并通过RT-PCR检测转化前后BbJEN1的表达情况。RT-PCR检测结果显示,球孢白僵菌转化子BbJEN1基因的表达水平显著下降,表明干扰载体具有明显的沉默效应。在两种培养基上,转化子与原始菌株的生长速度和产孢量差异均不显著,而分生孢子萌发则显著滞后于原始菌株。使用马尾松毛虫幼虫对转化子和原始菌株进行生物测定,原始菌株的半致死浓度、半致死剂量和半致死时间分别为2.79×106个孢子/mL、84.12个孢子/mm2和6.49d,而转化子的半致死浓度、半致死剂量和半致死时间则分别增加到1.27×107个孢子/mL、382.92个孢子/mm2和8.09d,毒力显著下降。由此表明BbJEN1基因与球孢白僵菌分生孢子发芽以及毒力均有关。     

靶向PrP及Aβ的治疗性抗体研究进展

朊病毒病与阿尔茨海默病具有蛋白质异常折叠的共同特征, 患者均有痴呆的症状, 但前者具有传染性, 而后者没有. 这引起人们的研究兴趣, 从不同角度开展了二者的比较研究. 近年来, 靶向其关键蛋白PrP和Aβ的免疫治疗研究进展很快. 本文结合实际研究工作, 着眼于治疗性抗体的疾病靶向性和构象特异性等主要特征, 综述了针对PrP和Aβ治疗性抗体研究中的新视点和新策略, 以期为探索这两种疾病的共同机制及治疗方法提供参考.     

玉米叶片细胞原生韧皮部筛分子的分化和超微结构：原生质体的变化

玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓＬ．）叶片细脉原生韧皮部筛分子开始分化时,首先出现的长的粗面内质网潴泡和增厚的细胞壁,随丘质体中出现其特征性的拟晶体内含量。随着分化的进行,长的粗面质网漪泡转化为较短的形态,最后聚集成一些小的堆叠并失去其核糖体。细胞核发生退化,但常到成熟期的后期,此时的细胞核由双层核膜或某些部位仅由核膜包被,内含 电子致密的不定形染色质团块。随后双层核膜破裂而变得不连续。在细胞核开始退时,核     

单纯疱疹病毒形态发育的多样化方式II．单纯疱疹病毒的囊裹发育

对单纯疱疹病毒fHSV)在八种感染系统中的囊裹发育方式通过电镜观察进行了比较。就HSV在多种不同感染系统中共同存在的囊裹发育现象进行了描述,对其发育方式作了归纳和总结。发现HSV感染细胞中出现的均质致密体形态学改变与HSV的形态发育关系密切。提出了HSV囊裹发育过程中可能具备方式多样、位置广泛有利于快速发育为原则等特占．并对HSV囊裹发育方式多样化的物匝基础进行了初步讨论。     

维吾尔族人Bf因子的遗传多态性及与GLO连锁不平衡参数的估计

用琼脂糖高压电泳及免疫固定法对222份维吾尔族人血浆进行了备解素B因子(Bf)遗传多太性检测,发现其Bf^*S、F、S07、F065、F1的基因频率分别为0.6622,0.2680,0.0586,0.0090及0.0023。x²检测表明,这种分布与Hardy-Weinberg遗传平衡定律相吻合。结合对GLO的研究,比较两座位间的连锁不平衡参数,发现Bf^*S与GLO¹的Δ值较大。     

一种白僵菌中MAO抑制剂的分离纯化和结构鉴定

本研究对前期筛选出的一株具有较强的单胺氧化酶(MAO)抑制活性的白僵菌菌株Ba02进行了液体培养;通过不同提取剂的提取效果比较,发现乙酸乙酯能较好地提取出该发酵液中单胺氧化酶抑制剂。通过活性指导下的色谱分离,从乙酸乙酯提取物中得到了一种深红色粉末状化合物。活性测定结果显示该化合物在15μg.mL-1时对MAO-A和MAO-B的抑制率分别为97.50%和95.34%。MS和NMR的鉴定结果表明该化合物为卵孢菌素(Oosporein)。虽然该化合物是一已知化合物,但其对单胺氧化酶的抑制活性尚属首次发现。     

半纤维素水解物生物转化生产木糖醇

木糖醇在食品、医药及化工行业中有着广泛的用途而深受关注。但是,传统的化学法生产木糖醇需要一系列复杂的分离纯化步骤,过高的生产成本限制了木糖醇的使用范围。发酵工艺生产木糖醇无需木糖的纯化步骤,是取代化学合成法的一条可行工艺路线。本文着重介绍产木糖醇的微生物,酵母对木糖的同化途径,半纤维素水解物的脱毒方法,影响木糖醇发酵的工艺条件等。