固定化真菌漆酶降解氯苯嘧啶醇农药

在葡萄糖培养基中,栓菌420(Trametes sp.420)经6mmol/L邻甲苯胺诱导,漆酶活力达到4535U/L(愈创木酚法)。用弱阴离子交换层析可分离得到纯化漆酶。以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂对漆酶进行固定化,30g壳聚糖与30U漆酶混合,酶活回收率高达69%。在酸性条件下,固定化漆酶对农药氯苯嘧啶醇具有良好的降解作用。     

鄂东南后睾吸虫二新种记述（复殖目：后睾科）

本文报道在鄂东南富水流域收集的吸虫标本中,发现后睾科吸虫二新种,即寄生于大灵猫胆管中的细长次睾吸虫,新种Metorchis elongata sp. nov. 及寄生于鳖胆管和肠道的通山对体吸虫,新种Amphimerus tongshanensis sp. nov. 本文对二新种的形态作了详细描述,对新种与近似种的主要特征列表进行比较,并讨论了建新种的依据。     

Trametessp.AH28-2漆酶A的诱导合成及其基因5′-端调控区的克隆与分析

Trametessp.AH28_2漆酶同工酶的合成需要铜离子的存在,较高浓度的Cu2+有利于漆酶合成。在以葡萄糖为碳源补加0·5mmol/LCu2+的培养基中生长时,发酵液漆酶活性为44·3u/L,同时补加4·0mmol/L邻甲苯胺时,漆酶酶活提高到71·0u/L;而在补加Cu2+和邻甲苯胺的纤维二糖培养基中,酶活上升至2584u/L,为葡萄糖培养基的36·4倍。邻甲苯胺和铜离子诱导产生的漆酶同工酶组分,均为漆酶A(LacA)。竞争性RT_PCR分析表明,漆酶A基因(lacA)转录本的累积伴随有发酵液漆酶活性的增加,邻甲苯胺对lacA的调控发生在转录水平。lacA结构基因长2110bp,含有10个内含子;lacA的cDNA序列为1560bp,编码520aa的漆酶蛋白,其氨基酸序列与其它真菌漆酶具有较高的相似性。采用改进的反向PCR技术,扩增得到的lacA5′_端调控区长1881bp,分析表明,该区域上分布有1个TATA框、7个CAAT框和多个潜在的顺式作用元件序列位点,包括5个MRE元件、9个CreA结合位点、4个XRE元件、2个STRE元件和7个氮因子调控位点等。这些序列位点的存在部分地对应了菌株摇瓶发酵条件下lacA的表达规律。     

菌根食用菌研究进展

与植物根系共生的菌根食用菌（edible mycorrhizal fungi,EMF）,具有较高的营养价值、经济价值和生态价值。总结了菌根食用菌（EMF）种质资源分布与利用、生理与生态学研究、驯化与栽培技术研究最新进展,分析了我国EMF开发利用所面临的挑战与机遇,探讨了EMF研究动向与发展前景。     

椰甲截脉姬小蜂在中国的适生性分布

研究极端温度对椰甲截脉姬小蜂Asecodes hispinarum Bouek存活的影响。在2℃、33℃和36℃恒温条件下放置48h后,该蜂羽化率较对照来说大大降低,基本上不能羽化;而在0℃和39℃恒温条件下即使只放置24h,该蜂全部死亡。在该实验的基础上,结合其它生态学特性的研究结果,利用地理信息系统ARC VIEW3.2分析预测该虫在我国的可能适宜分布范围。结果表明:椰甲截脉姬小蜂在我国的最适宜分布范围在16.53°~19.1°N,108.61°~112.33°E,只集中在海南省的南部;适宜分布范围大体在20.03°~24.27°N,101.98°~117.65°E,集中在海南、广东、广西、云南和福建5省;潜在分布范围大体在23.3°~33.4°N,98.5°~122.1°E,主要集中在西南、华东、华中等地区的172个县。     

《侵权责任法》第六十条抗辩事由立法技术若干问题

《中华人民共和国侵权责任法》在解决医疗损害侵权案件中起了非常关键的作用,考虑到医疗行为是一个高风险行为,在有些情况下,即便医疗机构和医务人员不存在违法违规的过失行为,进行医疗活动也有可能发生患者人身损害的后果,立法者为了保护医生的合法权益,在《侵权责任法》第六十条规定了三种抗辩事由。但是在其立法技术上,第六十条却错误的使用了封闭列举免责事由,导致其在实践中的运用的非常困难,保护医生合法权益的立法目的的实现受到很大的限制。     

栓菌漆酶在毕赤酵母中高效表达及重组酶的性质

栓菌420（Trametes sp. 420）漆酶基因lacD以两种方式在巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）进行异源表达,产生两种重组漆酶：rLacDx（具有天然N-末端）和rLacDe（N-末端带有8个额外的氨基酸残基）。摇瓶发酵18d,rLacDx和rLacDe的产量分别为1.21×10⁵u/L、7.38×10⁴u/L ［以2,2′-连氮-3-乙苯-二噻唑-6磺酸（ABTS）为底物］。在高密度发酵条件下,rLacDx的产量增加到2.39×10⁵u/L,同时其生产周期降至7.5 d。两种重组酶对愈创木酚底物的氧化特性相似,且在50℃和pH3～10的范围内均稳定。然而,rLacDx对底物ABTS的比活力（1761u/mg）高于rLacDe （1122u/mg）,其表观K_m值(427μmol/L)低于rLacDe (604μmol/L)。