应用CRISPR-Cas9技术构建NFIB敲除的膀胱癌细胞株及其转录组学分析

为了探究NFIB(nuclear factor I/B)基因在膀胱癌中的生物学功能,该研究应用CRISPR-Cas9技术构建NFIB敲除的膀胱癌细胞株,然后通过转录组学技术分析对照细胞NFIB-NC与NFIB敲除细胞株NFIB-KO-I和NFIB-KO-II之间的差异表达基因,同时对其进行KEGG富集分析,并通过Western blot和qRT-PCR技术对转录组学结果进行验证。结果显示,与对照细胞NFIB-NC相比,NFIB敲除细胞株NFIB-KO-I中有134个差异表达基因,其中上调基因62个,下调基因72个;NFIB-KO-II中有131个差异表达基因,表达上调和下调的基因分别为50个和81个。KEGG分析结果显示,差异表达基因与PI3K-AKT信号通路密切相关,Western blot结果证实敲除NFIB基因后,膀胱癌细胞中的p-AKT水平显著上调。qRT-PCR结果表明,敲除NFIB后,ITGA4基因表达水平上调,TNC和ANGPT4基因表达水平下调。该研究初步揭示了NFIB基因在膀胱癌细胞中调控的分子信号通路,也为后续研究NFIB基因介导膀胱癌发生发展的分子机制提供了依据。     

香菇顺式调控元件的克隆及其序列分析

应用顺式调控元件探测载体G221构建了一个香茹Lentinula edodes基因组文库。G221为大肠杆菌-酿酒酵母穿梭载体,含有一个由酵母Cycl基因基本启动子控制的lacZ标记基因,能以转录增强活性筛选香茹DNA片段。用这个基因组文库转化酵母菌,获得了一批lacZ阳性转化子。对其中表达较强的阳性转化子进行质粒抽提和双酶切鉴定,筛选到50个香茹顺式调控元件DNA片段。对其中部分片段进行了测序,并对其中一个序列进行了序列分析,鉴别了该序列上的几个与转录相关的特征序列。该研究也探讨了利用酵母表达系统克隆香茹顺式调控元件的可行性。     

风景这边独好——本溪水洞考察记

现在,我们要向读者介绍的是迄今世界上最长的一个水洞。在这里游人可以划着小船,在清澈见底的流水中,一边听着清脆悦耳的滴水声,一边欣赏着气象万千的美景。这个水洞不在别处,它就在我国东北的辽宁本溪。历史的回顾水洞座落在本溪谢家崴子村西南太子河畔一座山脚下。地理座标是东经124°5′,北纬41°18′(图1)。 1960年,省、市考古队在这个洞的洞口及洞口对面太子河的阶地上,曾发现过一些新石器时代的遗物——陶片、石刀、石斧、石网坠等等。所以说这个洞穴的存在以至于被人们发现已有上万年的历史,只是对其中之奥妙还不尽知道罢了。为了开发祖国的旅游事业,1981年     

杉木细菌性叶枯病及其防治

福建省各地几年来相继发生杉木细菌性叶枯病,闽南一带尤为严重。杉木感病后,轻者叶部枯死,重者整株梢部死亡。严重地威胁了林木的正常生长。三年来,我们对杉木病害进行了调查研究和防治工作,初步掌握了杉木细菌性叶枯病的发生发展规律,摸索了一些防治措施,现将结果报告如下。     

环境介质中的抗生素及其微生物生态效应

环境介质中的抗生素因存在浓度较低被称为微量污染物,其对生态系统和人类健康的影响已逐步得到认知。长期以来,抗生素被用于人和畜禽细菌性感染疾病的治疗。然而,随着集约化养殖业的发展,抗生素被大量添加于饲料中来预防畜禽和鱼虾的养殖疾病。因此,环境介质中抗生素种类和含量随着畜禽和水产养殖业的快速发展逐年增加。本文综述了环境中抗生素的来源、残留浓度及其环境微生物生态学效应。医用、兽用抗生素和人畜粪便的农用是抗生素进入环境的主要来源,其在不同环境介质中残留浓度不一：地表水含量为μg?L-1,土壤含量为?g?kg-1,沉积物含量为μg?kg-1—mg?kg-1之间。抗生素进入土壤、水和沉积物等环境介质,经吸附-解吸、迁移和降解等过程重新分配,其降解方式主要有水解、光解和生物降解。抗生素影响环境介质中微生物的生物量、活性和群落结构,并诱导产生抗性基因,但对生态系统服务及其功能的干扰和影响尚有待进一步研究。     

海洋N2O的排放及其关键微生物过程作用机制研究进展

氧化亚氮(N_2O)是一种重要的温室效应气体,同时也是造成平流层臭氧损耗的主要化合物。海洋是大气中N_2O的重要排放源,海洋中的N_2O产生和释放主要由微生物的代谢过程介导。本文对海洋N_2O的释放通量、海水N_2O的分布特征、环境影响因素以及海洋N_2O产生的微生物调控机制等几个方面的最新研究进展进行综述,并结合低氧与N_2O产生的关系以及近岸海域低氧区的扩大等科学问题,对河口近岸生态系统N_2O的释放通量以及其关键微生物过程进行展望。     

论文中阿拉伯数字的使用克雷伯氏肺炎杆菌HR526快速合成1,3-丙二醇发酵特性研究

研究了实验室筛选的一株高产1,3-丙二醇(PDO)菌株克雷伯氏肺炎杆菌HR526(Klebsiella pneumoniae HR526),在5 L B.Braun发酵罐进行甘油补料流加发酵30 h,PDO达到91.47 g/L,胞外代谢通量分析显示,PDO在对数中期通量达到最大,而乳酸在稳定期通量达到最大.结合酶学检测分析了PDO合成关键酶PDO氧化还原酶(PDOR)、甘油脱水酶(GDHt)和甘油脱氢酶(GDH)酶活的变化,PDO氧化还原酶活性在对数中期达到最高,甘油脱水酶/甘油脱氢酶在对数期远大于稳定期、衰退期,与代谢通量变化一致甘油脱水酶/甘油脱氢酶活性比例不均衡是3-HPA对数期积累的原因,PDO合成主要集中在对数期,是生长偶联的代谢产物.