大鼠接种灭活仙台病毒疫苗后抗体的产生和母仔间抗体的传递

用吐温—80—乙醚、福尔马林及紫外线处理的仙台病毒灭活疫苗接种成年大鼠,观察血抑抗体动向,得到以下看法。 血抑抗体效价与接种量有关。一次皮下接种10~5HAU后,7日检出抗体,21日后达最高峰,200日后慢慢下降,但462日仍可检出抗体。皮下接种10~3及10~4HAU后,10日呈阳性,其后的变化,大体与10 HAU组相同,402日后呈阴性。雌鼠与雄鼠之间未见差异。静脉、腹腔、肌肉、皮下四种途径之间没有发现显著性差别。10~5HAU经静脉与腹腔接种4天,肌肉与皮下接种后7天均可检出抗体,14天后看不出差别。鼻腔接种组接种后21天虽可检出抗体,但与其他途径组相比,效价低。二次接种都比一次接种的抗体效价高。 Sv-V所产生的抗体能通过母乳很好地传递给仔鼠,胎盘传递不明显。即使母鼠的抗体效价高,胎儿或新生仔的抗体效价低;哺乳1～3周龄仔鼠的抗体效价几乎与母鼠相等,断乳后迅速下降,至10周龄时不能检出。     

大鼠红细胞葡萄糖代谢的异头物选择性

为研究大鼠红细胞对葡萄糖利用的异头物选择性及其作用机制,应用大鼠红细胞,对葡萄糖的两种异头物作了异构化速率、乳酸生成量、内流速度和大鼠红细胞已糖激酶作用下的磷酸化速度等进行了测定．结果指出,３７℃时大鼠红细胞的Ｄ－葡萄糖β－异头物和α－异头物代谢成乳酸的速度分别是０．２７μｍｏｌ／ｇＨｂ（３ｍｉｎ）和０．２１μｍｏｌ／ｇＨｂ（３ｍｉｎ）,即前者快于后者３０％．同时β－Ｄ－葡萄糖向红细胞内转运速度也快于后者：分别是５．０和３．５μｍｏｌ／ｇＨｂ（３ｍｉｎ）．大鼠红细胞已糖激酶的葡萄糖磷酸化速率实验结果指出：β－异头物比α－异头物快３０％;对于该两种异头物已糖激酶的Ｋｍ值均为５３μｍｏｌ／Ｌ．红细胞与α－和β－Ｄ－葡萄糖保温１ｍｉｎ后,其葡萄糖浓度均达到１ｍｍｏｌ／Ｌ左右,说明至少在１ｍｉｎ内对于已糖激酶的磷酸化此两种异头物的葡萄糖浓度均已饱和．这些结果提示,大鼠红细胞葡萄糖利用的β－异头物优选性主要与其磷酸化速度有关,而与其转运速度关系不大．     

美国劳卡德教授部分讲学内容简介

根据我国教育部与联合国开发计划署及联合国教科文组织合作项目的规定,应天津第三中学的邀请,美国马里兰大学J·D·劳卡德教授于今年5月25日至29日来津作生物学讲学。参加这次活动的有北京、河北、辽宁、江苏、福建、广东、湖南、湖北和天津等省市的中学生物教师,从事中学生物教材编写、教学法研究、师资培训的同志,共40余人。中央教育部中学教育司的同志也参加了这次活动。     

利用人工Mu转座技术研究解淀粉芽孢杆菌的功能基因

目的:利用人工Mu转座技术研究解淀粉芽孢杆菌的功能基因。方法:使用加入0.5%甘氨酸的M9-YE培养基,细菌生长到D600nm值为0.5时制备感受态细胞,加入Mu转座复合物(含42ngMuDNA),以1.8kV电压电击获得转化子。对转化子进行功能突变表型筛选、基因克隆、DNA序列分析,以确定插入突变的功能基因。结果:获得最佳电转化效率1.9×103CFU/μgDNA。同时获得2个芽孢杆菌抑真菌作用的调节基因rpmGA和yxlC。结论:人工Mu转座技术是研究芽孢杆菌功能基因的快速有效的好方法。     

南京迈皋桥社区人群甲状腺功能减退症的流行研究

目的:研究南京迈皋桥社区人群甲状腺功能减退症(甲减)的流行特征。方法:采用随机整群抽样方法按全国城市人口普查的年龄构成在南京迈皋桥地区抽取≥20岁,5年之内不会动迁的常驻社区居民。采集空腹血清1540份,测定促甲状腺激素(TSH)、三碘甲状腺游氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4),甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)。结果:(1)南京迈皋桥地区社区人群的临床甲减和亚临床甲减的患病率分别为0.45%,3.96%。(2)男性亚临床甲减的患病率低于女性(P<0.01),临床甲减患病率男女之间无显著差异(P>0.05)。(3)男性不同年龄段间临床甲减和亚临床甲减的患病率均无差异(P>0.05)。女性临床甲减的患病率有随年龄增加而升高的趋势(P=0.02),50岁以上女性亚临床甲减患病率显著增高(P<0.01)。结论:与临床甲减相比,南京社区人群的亚临床甲减患病率显著升高,应加强对其随访和早期防治。     

台湾省趋流摇蚊属一新种(双翅目:摇蚊科)(英文)

记述采自台湾省关渡水笔仔红树林趋流摇蚊属一新种,命名为台湾趋流摇蚊Rheocricotopus taiwanensissp.n.新种隶属Psilocricotopus亚属与R.(P.)chalybeatus近似,但所有翅脉缺少大毛;腋瓣只具少数缘毛;抱器亚端背脊明显凸出而且触角比值(AR)明显低于后者。该属在中国台湾省属首次记录。     

半胱氨酸脱硫酶突变体H104Q,E156Q,D180G,Q183E和K206A通过改变对磷酸吡哆醛的结合影响酶活性

大肠杆菌半胱氨酸脱硫酶（cysteine desulfurase,IscS）是一类依赖磷酸吡哆醛（pyridoxal phosphate,PLP）的同质二聚体的酶.IscS能催化游离底物L-半胱氨酸脱硫,生成L-丙氨酸和单质硫.在此催化过程中,可形成与酶结合的半胱氨酸过硫化物中间物,并出现了7种具有不同特征性吸收峰的中间反应物.为了研究PLP的结合及中间反应物的形成及累积,对IscS中与PLP结合相关,及IscS半胱氨酸活性口袋中特定氨基酸残基位点（His104,Glu156,Asp180,Gln183和Lys206）进行定点突变,结果发现：1）IscS突变体H104Q、D180G、Q183E、K206A对PLP的结合能力具有不同程度的减弱,酶的活性明显降低甚至消失,PLP与蛋白结合的特异吸收峰消失,或发生明显偏移并出现新的吸收峰,且这些新出现的吸收峰又与蛋白形成的各种中间反应物的吸收峰一致|2）IscS突变体E156Q的活性增高,PLP与蛋白结合的吸收峰明显增加.这些结果都表明,IscS氨基酸残基可通过影响PLP的结合及质子转移引起催化过程中不同中间反应物的形成及累积,同时提高或降低蛋白的活性.     

铜绿假单胞菌PA1550基因对泳动及蹭动的影响

[目的]:研究与铜绿假单胞菌运动能力相关的基因.[方法]:以一株临床分离的铜绿假单胞菌PA68做受体菌,应用人工Mu转座技术建立了库容为2000的突变子文库,从中筛选出泳动能力和蹭动能力丧失或减弱的突变子,通过基因克隆、测序,GenBankBLAST比对测序结果,互补基因表达确定与铜绿假单胞菌运动能力相关的基因.[结果]:突变子Y46在丧失了泳动运动能力的同时,蹭动能力也发生了减弱.在Y46突变子中,Mu转座子插入到功能完全未知的基因PA1550中.对极性效应及PA1550所在操纵子的分析表明,Mu转座子对插入点下游的基因的转录并不造成影响.[结论]:PA1550与铜绿假单胞菌的泳动及蹭动能力有关.     

铜绿假单胞菌新基因PA0058插入失活对氨基糖苷类抗生素耐药性的影响

【目的】铜绿假单胞菌是一种重要的条件致病菌,临床上常引起难治性和顽固性感染,随着各种抗生素的广泛使用,该菌对多种抗生素呈现耐药性,研究其耐药性机理有着重要意义。【方法】以一株临床分离株Pseudomonas aeruginosa PA68作为出发菌株,应用人工Mu转座技术构建突变文库并从中筛选得到一株对链霉素抗性明显增强的菌株M122,并对突变株M122进行测序分析及表型检测。通过Southern杂交实验证实转座子是否为单拷贝插入,对突变株M122的基因表达谱与野生型PA68菌株进行对比分析。【结果】确定了Mu转座子在M122基因组上为单拷贝插入,插入位点为基因PA0058的第214 bp处。对M122进行表型检测,发现其对多种氨基糖苷类抗生素的耐药性均得到增强,通过转入携带完整基因PA0058的表达质粒可以使突变株M122的耐药性有所降低,利用同源重组的方法,在模式菌株P.aeruginosa PAK中进行PA0058基因敲除,得到的敲除株具有链霉素耐药性升高的表型。基因PA0058的缺失引起多种基因表达水平改变,尤其是katB、ahpC、ahpF等抗氧化酶基因转录表达显著增高。【结论】首次发现铜绿假单胞菌PA0058基因的插入失活提高了细菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性,且导致突变株M122中抗氧化酶基因转录表达水平的上调。     

铜绿假单胞菌最佳电转化条件的研究

以临床分离的一株铜绿假单胞菌 (Pseudomonasaeruginosa)PA68作受体菌 ,将具有卡那霉素抗性标记的质粒pSMC2 8通过电转化导入到受体菌中 ,研究细胞生长状态、电击电压、细胞浓度、感受态细胞的贮备方式对转化效率的影响。结果表明 ,在细胞生长至OD5 40 =0 7～ 0 8时收集菌体 ,在低温 (2℃ )条件下 ,制备浓度为 10 11个细胞 mL的感受态细胞 ,在较高的电压 (2 6kV)电击下 ,能获得较高的转化效率。最高可达 1 68× 10 8个转化子 μgDNA(CFU μgDNA)。用此优化的转化条件 ,在国际上首次成功地将Mu转座复合物导入到P .aeruginosa中 ,并获得 2 4× 10 4 CFU μgDNA的高转化效率。由于Mu转座重组技术具有随机单点插入的优点 ,克服了传统转座子能在染色体上迁移的缺点 ,保证了表型的改变与转座子插入位点所在的基因突变的一一对应关系 ,为进一步研究P .aerugi nosa的基因组功能奠定基础