武汉大学微生物学系列课程国家级教学团队的特色与建设思路

武汉大学微生物学系列课程国家级教学团队的特色与建设思路     

一种筛选自然感受态缺陷突变株方法的改进*

对平板筛选自然感受态缺陷突变株的方法进行了改进,采用改进后的方法可以节省转化ＤＮＡ用量８０％以上,而且筛选时转化ＤＮＡ相对浓度提高约１倍,筛选效果较好。     

面向21世纪的微生物学教材改革──国内外微生物学教材浅谈

面向２１世纪的微生物学教材改革──国内外微生物学教材浅谈沈萍,彭珍荣（武汉大学生命科学学院,武汉４３００７２）１国外优秀教材的特色国外“微生物学”教材中,比较有影响和具有特色的主要有如下几本：（１）Ｍ．Ｊ．Ｐｅｌｃｚａｒ,ＪＲ．等人的“Ｍｉｃｒｏ－ｂ...     

细菌感受态细胞摄取和分泌DNA的相关性研究① I. 含有质粒的枯草芽孢杆菌自然感受态缺陷突变株的诱变和分离

以携带pUB110质粒的枯草芽孢杆菌BR151菌株为出发菌株,利用亚硝基胍作诱变剂,直接在LB平板上进行诱变。从2949个菌落中筛选出一个转化频率低于出发菌株2～3个数量级的突变株,并对其营养缺陷型、UV的敏感性及Km抗性和质粒进行了检测,确证其转化能力降低为自然感受态缺陷而非营养缺陷型的改变或重组缺陷所致。 Abstract　Natural competence-deficient mutant of Bacillus subtilis　BR151, which carries plasmid pUB110, was obtained by nitrosoguanidine mutagenesis on solid medium. From 2949 clones, a mutant, the transformation frequency of which is 102～103　times lower than that of the control, was obtained and tested for the changes of trophic type, resistance to Km, plasmid and sensitivity to UV. The results indicate the reduction of transformation frequency is due to competence-deficient mutation.     

嗜麦芽假单胞菌（P.maltophila）质粒的研究

本文用4种不同的方法对18株嗜麦芽假单胞菌是否含有质粒进行了检测,实验结果表明其中5株含有质粒。对其中的P2株不同生长期质粒存在状况的研究表明,该菌所含质粒与宿主不同生长期具有明显的相关性,其最高含量出现在稳定生长期,当细菌进入衰亡期时,其质粒量也随之减少,直至完全消失。 通过双向琼脂糖凝胶电泳、限制酶切分析以及分子量测定等方法,确定了嗜麦芽假单胞菌P2只含有1种质粒,分子量约为4.4×10~6道尔顿。有BamHⅠ、PitⅠ、XbaⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ单一酶切位点。该质粒可望进一步改建成十分有用的克隆载体。     

Bacillus subtilis自然感受态缺陷株蛋白质表达谱的初步分析

利用蛋白质双向电泳对枯草芽孢杆菌自然感受态缺陷突变株BR151pm感受态形成期的全细胞蛋白质进行比较分析,发现有28个蛋白质斑点出现变化。利用基质辅助激光解析/电离串联飞行时间质谱对其巾2个明显缺失的蛋白斑点进行分析鉴定,确定这2个蛋白质分别为直接参与自然感受态形成的Nin蛋白和RecA蛋白,进一步确证了BR151pm为自然感受态缺陷突变株。     

tRNA特异性的主要决定子研究进展

1988年5月12日的Nature杂志上刊登了一篇题为“一种简单的结构特征是转移RNA特异性的主要决定子”(A Simple structural feature is a major determinant of the identity of a transfer RNA)的文章,立刻引起了轰动,5月13日的纽约时报和其它有关报刊大量刊登了许多著名分子生物学家的评论文章,对此项研究结果作了高度的评价,称tRNA特异性的这一决定子为“第二遗传密码”。这个使科学家们困惑了20年之久的难题终于得到了解答。这一难题是,在蛋白质的合成过程中,在翻译中起关键作用的tRNA分子如何识别特定的氨基酸,也就是说,究竟是tRNA分子的哪一部位对氨基酸的特异性结合起着决定性的作用。     

λ 原噬菌体缺失突变株的诱导和分离

对CSH45(λcI857S7)菌株进行热诱导(42℃),原噬菌体DNA产生部分缺失的菌株,然后用λcIb221进行感染,并通过EMB-麦芽糖平皿进行粗筛。最后在不同温度条件下,分别以λvir和λcIb221感染,从而分离得到5株所需菌株,筛选频率为10％。这些菌株在EMB-麦芽糖平皿上为红色菌落。在32℃时能被λvir裂解,而对λcIb 221具有免疫性;在42℃时既能被λvir裂解,也能被λcIb221裂解,从而证实了这些菌株仍携带有原噬菌体的cI基因,可作为控制携带有λpLN基因的克隆载体的受体菌株。     

海狸腺的组织学研究

该文通过对４０只成年雄性海狸鼠的海狸腺体,利用石蜡包埋切片法,并分别进行苏木素伊红染色法和过碘酸Ｓｃｈｉｆ氏组织化学染色法。在光学显微镜（ＮｉｋｏｎＪａｐａｎＯＰＴＩＰＨＯＴ２）×３２０、×６４０、×１６００下进行系统观察。结果发现,海狸腺属于皮脂腺,腺细胞为全浆分泌方式,且有一套完整的导管系统;利用过碘酸Ｓｃｈｉｆ氏组织化学方法,对其有效成分,糖蛋白和粘蛋白进行定性、定位。此物质存在于腺细胞的胞质内,尤其是接近成熟的腺细胞。     

二种简便迅速分离 RNA 的方法

RNA是基因表达的第一产物,但有些病毒中(如RNA病毒、反转录病毒)的遗传物质就是RNA。近年来的研究表明,某些RNA还有酶的功能,因此RNA在基因表达过程中和在生命起源的研究方面均占有重要地位。随着对RNA研究工作的迅速开展,分离RNA的方法也不断改进和完善。