抗人P185^erbB2的scFv—Fc融合蛋白的表达及免疫功能分析

为提高鼠源单抗用于体内治疗的效应功能及降低人抗鼠抗体反应 ,将编码抗人P185 erbB2 单抗轻、重链可变区 (VL、VH)融合构建的单链抗体 (scFv)基因片段与人IgG1的Fc区基因片段融合构建了scFv Fc融合基因 ,并将其克隆到哺乳动物细胞表达载体pCIDN中。用重组载体转染CHO细胞 ,通过G4 18筛选获得稳定高表达克隆。更换无血清培养基培养 ,经重组蛋白质A亲和层析柱纯化scFv Fc融合蛋白。融合蛋白质在还原SDS PAGE中表现为5 2kD的条带 ;与SK BR 3细胞裂解液共培育可特异性地沉淀出P185 erbB2 蛋白 ;FACS分析表明融合蛋白质识别P185 erbB2 蛋白的胞外段 ;ELISA测定融合蛋白质对细胞表面抗原P185 erbB2 的亲和常数为 7.5× 10 -10 (mol/L) -1。构建scFv Fc融合基因 ,将其克隆到表达载体 ,进一步稳定表达抗P185 erbB2 的scFv Fc融合蛋白 ,为进一步的体外、体内研究鼠源单抗治疗效果创造了条件。     

植物对重金属的吸收和分布

植物修复是利用植物来清除污染土壤中重金属的一项技术。该技术成功与否取决于植 物从土壤中吸取金属以及向地上部运输金属的能力。植物对金属的吸收主要取决于自由态离子活度。许多螯合剂能诱导植物对重金属的吸收。金属离子在液泡中的区域化分布是植物耐 重金属的主要原因。同时,细胞内的金属硫蛋白、植物螯合肽等蛋白质以及有机酸、氨基酸等在金属贮存和解毒方面也起重要作用。本文还论述了重金属在植物体内运输的生理及分子 方面的研究进展。     

虫囊菌两个中国新记录种*

平顶虫囊菌 图 1 Laboulbenia yurikoi Sugiyama et. Majewski, Trans. mycol. Soc. Japan 26: 125~144, 1985. 菌体稍呈弓形或微呈“S”形,自足细胞至子囊壳顶端,长 241.2~248.6m; 至附属枝着生细胞,长164.5~166.9m。足细胞呈倒圆锥形,黑色,7.4~19.2×7.4~8.8m．细胞 I 直或下半部稍弯,近长圆柱形, 48.7~51.7×16.2 ~19.2m,上下近等宽,细胞壁较厚, 4.4~5.9m,近番红花色。细胞 II 比细胞 I 长近 1/3, 呈近长圆柱形,51.7~63.5×19.2~32.5m,基部与细胞 I 宽度相等或接近,向上逐渐变宽,与细胞 I 同色,细胞壁较厚,5.9…     

中国附丝壳属研究IV.

附丝壳属Appendiculella二个新种:赤苍藤附丝壳Appendiculella erythropali和忍冬附丝壳Appendiculella lonicerae,分别寄生在赤苍藤科植物赤苍藤Erythropalum scandens和忍冬科植物忍冬Lonicera japonica上。有拉丁文和英文描述,附了显微结构图。模式标本保存于广东省微生物研究所标本室(HMIGD)。     

小煤炱属三个新种

小煤炱属三个新种:交让木生小煤炱Meliola daphniphyllicola,火绳树生小煤炱Meliola eriolaenicola和六萼藤小煤炱Meliola stixis。它们分别寄生在交让木科植物海南虎皮楠Daphniphyllum paxianum、梧桐科植物火绳树Eriolaena sp和白花菜科植物六萼藤Stixis suaveolens上。模式标本保存在广东省微生物研究所标本室(HMIGD)和中国科学院微生物研究所菌物标本馆(HMAS)。     

用一种新型的PCR方法快速制备人TNF-α缺失突变体

人肿瘤坏死因子 α(hTNF α)的 2个Loop区 2 9～ 36、141～ 146是受体的主要结合部位 .应用一种新型的PCR方法 ,快速制备了这 2个Loop区的缺失突变体 ,并对其活性进行了研究 .结果表明 :这种新型的PCR方法在制备缺失突变体中具有快速、简便、经济等优点 ,值得推广 ;缺失蛋白对L92 9细胞的毒性作用明显降低 ,表明这 2个区域为hTNF α发挥其生物作用所必需     

新型双核铂(Ⅱ)配合物通过p53-Bak途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

新型双核铂(Ⅱ)配合物{［cis-Pt(NH3)2Cl］2L}(NO3)2（L=4,4′-methylenedianiline)对多种肿瘤细胞有一定的抑制作用,但作用机制不明。本研究以顺铂为对照,探讨了该双核铂(Ⅱ)配合物对MCF-7细胞增殖抑制、细胞周期、细胞凋亡及凋亡相关因子p53、P-p53(ser15)、p21、Bcl-2、Bak、Cleaved- caspase-3、cPARP（cleavage of poly(ADP-ribose)polymerase）的影响。MTT法检测配合物或顺铂在不同浓度或不同作用时间后对MCF-7增殖的影响,其中作用48 h后配合物对MCF-7的IC50为1.59 μmol/L,顺铂为7.95 μmol/L。原位移植瘤实验显示,配合物组肿瘤抑制率为54.1%,高于顺铂组（36.2%）。同等条件下,配合物处理的MCF-7细胞,经Hoechst33342染色后出现明显细胞体积缩小和染色质固缩现象。流式细胞检测技术分析显示,经该配合物处理后,大部分MCF-7细胞停滞在S期,并出现了细胞膜外表面的磷脂酰丝氨酸外翻与线粒体内膜急剧下降等典型的细胞凋亡现象。Western 印迹结果显示,随着配合物浓度增加,Cleaved-caspase-3、p53、P-p53(ser15)、cPARP、Bak蛋白表达增强,而p21、Bcl-2表达水平下调。上述结果表明,该配合物可能通过p53-Bak途径诱导DNA损伤,进而导致MCF-7细胞发生凋亡。     

中国武夷山脉地区野生毛桃资源收集与初步评价

为明确中国武夷山脉地区野生毛桃(Prunus persica(L.) Batsch)资源分布现状,对浙江、江西、福建武夷山脉地区野生毛桃资源进行了系统的考察、收集和评价。此次考察共收集野生毛桃资源244份,来自于武夷山脉地区24个采集点。物候期评价发现这些资源多态性丰富。相关性分析显示,叶芽萌动期、花期与采集点海拔、纬度呈极显著正相关。果实评价显示果实性状多态性丰富。通过2年抗涝性评价,初步筛选出53株较抗涝野生毛桃资源后代单株。净光合速率、气孔导度、蒸腾速率与淹水时间相关性分析显示淹水时间与净光合速率、气孔导度、蒸腾速率均呈极显著负相关,而净光合速率、气孔导度、蒸腾速率三者之间呈极显著正相关关系。     

单节段颈椎人工椎间盘置换术治疗颈椎病的临床研究

目的:探讨单节段颈椎人工椎间盘置换术(CDA)治疗颈椎病的临床效果。方法:选择2013年5月到2015年5月在我院收治的80例颈椎病患者,按手术方式不同分为颈椎人工椎间盘置换组(CDA组)和前路颈椎减压融合组(ACDF组),各40例。两组患者均于术前、术后3个月、术后6个月及术后1年进行末期随访时,采用颈椎功能障碍指数(NDI)评价患者颈部功能,采用颈痛视觉模拟评分(VAS)和上肢痛VAS评价患者颈部疼痛,采用X线片在过伸和过屈位测量患者术前和术后手术节段相邻节段的活动度。结果:两组患者术后3个月、6个月及术后1年时的NDI评分、颈痛VAS及上肢痛VAS均明显低于术前,差异具有统计学意义(P0.05),然而两组间比较差异无统计学意义(P0.05)。CDA组患者术后3个月、6个月及术后1年时的手术相邻上节段活动度和手术相邻下节段活动度与术前比较差异无统计学意义(P0.05),而ACDF组患者术后3个月、6个月及术后1年时均明显高于术前及同期CDA组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:单节段CDA治疗颈椎病的临床疗效与ACDF相近,另外其不会引起手术相邻节段活动度的增加,值得在临床上推广应用。