烟碱对氨甲酰胆碱降低心率和血压作用的调节

在乌拉坦麻醉的大鼠上,间隔５ｍｉｎ３次静注烟碱１７５ｕｇ／ｋｇ,首剂烟碱后,动物对其负性心认综合利用科生急性耐受,但对其降压作用不产生急性耐受。相同条件下,间隔５ｍｉｎ３次静注氢甲酰胆碱１０ｕｇ／ｋｇ,动物对其负性心率和降压作用均不产生急性耐受。在对烟碱负性心率作用产生急性耐受的大鼠上,静注氨甲酰胆碱５和１０ｕｇ／ｋｇ,负性心率作用显著增强,但降压作用无显著变化。提示烟碱诱导动物对其负性心率作用产     

Tau/APP/PS1三转基因小鼠模型的建立及生物学特征

目的:建立Tau/APP/PS1三转基因小鼠模型,从分子生物学、行为学及病理学角度研究其生物学特征。方法:将自行建立的Tau转基因小鼠与Jackson实验室引种的APP/PS1双转基因小鼠杂交、传代;PCR鉴定小鼠基因型;RT-PCR检测外源基因的转录;Western blot测定外源基因的蛋白表达;Bielschowsky氏染色法和ABC免疫组化法观察大脑神经纤维缠结和老年斑等病理改变;Morris水迷宫观测学习记忆的改变。结果:Tau/APP/PS1三转基因小鼠的大脑可转录和表达Tau、APP和PS1三种外源基因,6~8月龄时大脑皮层和海马可见神经元纤维缠结和老年斑,其学习记忆获得能力在6月龄开始受损。结论:建立的Tau/APP/PS1三转基因小鼠具有Tau和Aβ两种病理改变和学习记忆障碍,为深入探究Tau与Aβ的关系、阐明AD的发病机制以及研发靶点治疗药物提供实验工具。     

缺苞箭竹种子人工老化及不同大小种子的生理研究

为了解缺苞箭竹(Fargesia denudate Yi)种子的老化机理和不同大小种子间的差异,对其进行了人工老化处理和大、中、小三组种子的区分,并分别对种子活力,总抗氧化能力,酶活性,丙二醛含量和电导率进行测定。发现经人工老化后种子活力显著降低,电导率和丙二醛含量随老化程度加深而上升,总抗氧化能力和过氧化氢酶活力随老化程度加深而下降,超氧化物歧化酶的活力则出现上升的趋势,但超氧化物歧化酶与丙二醛的比值呈现先升后降的趋势。总抗氧化能力、超氧化物歧化酶与丙二醛的比值能够很好的反映种子老化的程度和抗氧化能力的变化;总抗氧化能力、电导率和种子活力有很好的相关性。中等大小种子活力最高,总抗氧化能力和几种酶活性均随种子增大而提高,丙二醛含量和电导率则随种子增大而减小,种子大小是与各指标相关的因素。     

转Bt基因抗虫玉米HGK60的农艺性状分析

为了确定转Bt cry1Ah抗虫玉米HGK60的自交系及其杂交后代外源基因的遗传表达稳定性和农艺性状,通过实时荧光定量PCR和ELISA分析外源基因的遗传表达稳定性,通过室内外生测和田间性状考量分析农艺性状。荧光定量PCR结果表明Bt cry1Ah基因在玉米的不同组织中可以正常转录,但RNA表达水平存在一定的差异;ELISA结果表明在转基因植株的不同发育时期、不同器官中Cry1Ah的蛋白表达量顺序:雄穗叶片苞叶籽粒花丝穗轴。两地连续三代的田间及室内抗虫性检测结果表明HGK60抗虫玉米对亚洲玉米螟均表现出很好的抗性。性状考量结果表明HGK60抗虫玉米与受体材料对照比较,种子发芽率、生育期、穗行数、穗长、千粒重等农艺性状均无显著差异。通过多年多点田间试验和分子检测结果证明HGK60转基因抗虫玉米中外源基因稳定的遗传和表达,对亚洲玉米螟有很好的抗性,农艺性状与对照材料无显著差异。HGK60转基因抗虫玉米对亚洲玉米螟的良好抗性使其具有很好的产业化应用前景。     

正交设计优选贯叶连翘中总黄酮提取工艺

本文采用正交设计实验,对影响贯叶连翘总黄酮提取工艺的因素进行了系统考察。结果发现,以总黄酮得率作为考察指标,影响贯叶连翘总黄酮提取的主次因素为:溶媒种类>提取时间>提取次数>溶剂用量,其中溶媒种类、提取时间、提取次数均对总黄酮的提取有显著性影响;贯叶连翘中总黄酮的最佳提取工艺条件为:用10倍量80%乙醇提取3次,每次1h。建立了以UV法测定贯叶连翘中总黄酮的含量方法。     

女贞苦丁茶挥发油成分分析

苦丁茶是我国南方各民族长期饮用的茶代用品之一,其基原植物种类较多,据调查苦丁茶原植物有9科15种植物,其中木犀科(Oleaceae)女贞属(Ligustrum L.)有粗壮女贞[L. robustum (Roxb.) Bl.]、紫茎女贞(L. purpurascens Y.C.Yang)、序梗女贞(L. pedunculare Rehd)、日本毛女贞(L. japonicum Thunb. var. pubescens Koidz.)等[1～8].     

沙利度胺抑制肿瘤细胞分泌VEGF/bFGF机制的探讨*

目的: 探讨Cereblon(CRBN)对沙利度胺抑制人肺癌A549细胞及人肝癌HepG2细胞分泌VEGF/bFGF的影响。方法: 采用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰技术建立稳定敲低CRBN的A549细胞系(A549_CRBN)及HepG2细胞系(HepG2_CRBN)并通过实时定量PCR(Real-time PCR)和蛋白质印记(Western blot)实验验证。将A549细胞分为阴性对照组(A549_luciferase)、CRBN低表达组(A549_CRBN);HepG2细胞分为阴性对照组(HepG2_luciferase)、CRBN低表达组(HepG2_CRBN),以上细胞按照 3×10⁵ cells/well接种到6孔板中,放入37℃,5%CO2的培养箱中培养24 h,分别加入1 ml含100 μmol/L沙利度胺(thalidomide组)和1 ml 1‰ DMSO(control组)的培养液,继续培养24 h再行后续实验,每组设计3个复孔。MTS法检测沙利度胺对细胞增殖的影响;Real-time PCR检测VEGF、bFGF、c-jun mRNA表达,ELISA法检测VEGF、bFGF蛋白表达。结果: 与对照组比较,沙利度胺在浓度为1、10、50、100 μmol/L 时对A549 及HepG2细胞的增殖能力无显著影响(P＞0.05)。与A549_CRBN或HepG2_CRBN组比较,A549_luciferase及HepG2_luciferase组分泌的VEGF及bFGF均显著降低(P＜0.05)。与A549_luciferase或HepG2_luciferase细胞的对照组比较,沙利度胺可抑制A549_luciferase和HepG2_luciferase细胞的VEGF和bFGF的表达(P＜0.05),而对A549_CRBN和HepG2_CRBN细胞中VEGF和bFGF的表达无显著抑制作用;与HepG2_luciferase细胞的对照组比较,沙利度胺可抑制HepG2_luciferase细胞的c-Jun表达(P＜0.01),而对HepG2_CRBN细胞的c-Jun表达无显著抑制作用。结论: 沙利度胺对A549和HepG2细胞VEGF和bFGF表达的抑制作用可能是通过CRBN介导的,而c-Jun可能是抑制作用的关键转录因子之一。     

转Bt cry1Ah基因抗虫玉米的分子检测及农艺性状分析

利用农杆菌介导法将具有自主知识产权的Bt cry1Ah基因转入玉米自交系综31中,在获得的1 764株转基因植株中筛选获得1株对玉米螟有显著抗性的转基因植株。对该抗性植株进行了室内和田间抗虫性分析及外源基因表达分析,并研究了其杂交后代的农艺性状。结果表明,该转基因植株对亚洲玉米螟田间抗虫性达到高抗水平;外源基因能够正常高效表达,在玉米抽穗期的叶片中Cry1Ah蛋白表达量最高,达到1μg/g鲜重;株高、穗位高、穗长、穗粗等与非转基因对照植株相比差异不大,秃尖长明显短于对照,千粒重及单株产量明显高于对照,这种差异在人工模拟虫害爆发情况下达到极显著水平。     

烟碱对氧化震颤素和槟榔碱流涎作用的调节

氧化震颤素和槟榔碱激动唾液腺Ｍ受体剂量依赖性地诱发小鼠流涎,ＥＤ＿（５０）值分别为１１６．２７±２０．１１μｇ／ｋｇｓｃ和９．０２±１．７５ｍｇ／ｋｇｓｃ。烟碱（０．５,１．０ｍｇ／ｋｇｓｃ间隔５ｍｉｎ）预处理后,氧化震颤素和槟榔碱诱发小鼠流涎作用的量效曲线显著左移,ＥＤ＿（５０）值分别降为４３．２５±１１．５２μｇ／ｋｇｓｃ和４．７５±０．７６ｍｇ／ｋｇｓｃ。以美加明阻断Ｎ受体功能后,能对抗烟碱调节Ｍ受体激动剂的流涎作用。以氯化锂抑制肌醇磷酸酶后,能增强烟碱调节Ｍ激动剂的流涎作用。提示烟碱增强唾液腺Ｍ受体对其激动剂的反应性和敏感性,可能与神经元性Ｎ受体干扰唾液腺磷脂酰肌醇代谢有关。