再论分子生物学——科学的革命

1985年我写的“论分子生物学”一文“武汉大学自然科学学报第三期1985”发表后,听到许多不同的反映。由于分子生物学不是一门学科,并且有人认为分子生物学的兴起是当代重要智力的和科学的运动之一,换句话说,是一场科学的革命。因此,我的粗浅论点引起分子生物学者和其它有关学者的议论不是意外的事。人们把分子生物学的理解一时放在这个方面,一时又放在另一个方面,因而给分子生物学下一个确切的定义     

白腹锦鸡的寄生蠕虫

１９９５年１２月,我们对来自昆明安宁县１只野生雄性成年白腹锦鸡内脏进行系统剖检,获得寄生虫３１条,其中,云南（邓木）顿水吸虫３条,棘盘赖利绦虫５条,鹧鸪奇异线虫１６条,裂棘四棱线虫２条,鸟异刺线虫５条。标本保存于云南农业大学动物科技学院。     

卵子皮层在受精中的作用

关于卵子皮层的概念,人们有两种不同的意见:一种意见指卵子质膜下的一簿层细胞质,厚度不到5μm,主要成分为皮层颗粒、色素颗粒以及肌动蛋白等,它在结构和功能上与其下的细胞质不同;另一种意见认为还应将质膜-细胞外被复合体包括在内。本文采纳后一种意见。 (一) 皮层在受精时的动态变化向海胆卵细胞质中注入一个微小的铁粒,并在已知强度的磁场内停留一定的时间,通过测铁粒子的移动速率可以测出皮层硬度。实验结果表明,铁粒子在细胞质中央区域比在皮层中运动快,说明皮层处在一种凝胶状态,皮层的     

棉蚜交互抗性的测定方法

本文利用室内培育的、具有一定生理生化差异的4个溴氰菊酯抗性和3个敏感性棉蚜株系,通过大田罩笼试验,用喷雾法测定了溴氰菊酯抗性棉蚜对速灭菊酯、功夫菊酯、甲胺磷、马拉硫磷和呋喃丹的交互抗性,并将结果与点滴测定法进行了比较。结果得出,喷雾法更接近大田施药情况,能更准确地测定出低水平的交互抗性(如甲胺磷)。同时本文还首次建立了描述交互抗性程度的定量指标。     

单克隆抗体亲和层析柱在纯化羊垂体催乳素中的应用

应用淋巴细胞杂交瘤技术制备出5株抗羊垂体催乳素单克隆抗体。以羟磷灰石柱层析纯化一种单克隆抗体2D2(属IgG₂a)。与环氧氯丙烷活化的sepharose 4B偶联制备免疫吸附层析柱。以此免疫吸附柱从羊垂体粗提液中简单快速地纯化了催乳素。     

重组A型产气荚膜梭菌α毒素C端片段的分离纯化

押在构建出高表达、高活性的A型产气荚膜梭菌α毒素保护性抗原工程菌株pBV/cpa408的基础上,对表达产物进行了分离纯化研究。诱导表达菌液离心后,超声破碎沉淀细菌,上清用80%饱和硫酸铵沉淀,沉淀蛋白经透析,上凝胶过滤层析柱分离纯化,得到纯度达95%以上的表达目的蛋白,经SDS-PAGE测定,相对分子质量为15.5×103,序列与文献报道的相符。     

人源抗狂犬病毒单链抗体基因原核表达质粒的构建及高效表达

在原核系统中高效表达抗狂犬病毒单链抗体scFv41,以便进一步研究其生物学功能,预测临床应用前景。以重组质粒pCANTABscFv41为模板,PCR扩增带NcoI和NotI位点的scFv41基因,克隆入原核表达载体pET-22b( ),酶切鉴定重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。竞争ELISA检测表达蛋白的特异结合活性。酶切鉴定证实scFv41基因已插入原核表达载体pETl-22b( ),重组表达质粒pET-scFv41在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达量约占菌体蛋白总量的30％。竞争ELISA检测结果表明scFv41表达蛋白可特异抑制抗狂犬病毒IGY与狂犬病毒的特异性结合。该实验为进一步研究scFv41的生物学特性和免疫保护作用,及基因工程抗体的制备奠定了基础。     

A型肉毒毒素Hc片段B细胞表位预测

应用4种参数和方法对A型肉毒毒素Hc片段进行综合分析,包括亲水性参数、可及性参数、抗原性参数和二级结构预测等方法,预测A型肉毒毒素Hc片段(BoNT/A-Hc)氨基酸序列的B细胞表位,结果显示B细胞表位可能位于其Hc片段残基第37-42、294-300、355-359、400-411等区域内或附近.分析预测结果将有助于确定BoNT/A-Hc的B细胞表位.     

从噬菌体展示肽库中筛选脂质A的结合肽

以脂质A为靶标,筛选噬菌体展示十二肽库,三轮后随机挑取14个噬菌体克隆进行结合活性鉴定,并对5个克隆进行序列分析。结果表明,14个克隆全部是阳性克隆,测序结果显示4个阳性克隆的序列完全一样。说明筛选到了一个脂质A的结合多肽。