快中子辐射处理卡那霉素产生菌

快中子辐射用于抗生素产生菌的诱变育种已有报道。我们在北京辐射中心的协作下,从1976年开始,用400千电子伏高压倍加器产生的14MEV快中子,处理卡那霉素产生菌,获得一些高产菌株。本文报道这方面的试验结果。     

抗A型肉毒毒素人源单链抗体融合蛋白的重组设计*

以获得的抗A型肉毒毒素单链抗体为模板,进行融合改构,将人IgG1的Fc片段连接到ScFv的C端,在大肠杆菌中实现抗体融合蛋白ScFv-Fc的表达,表达量30%以上,蛋白以包含体形式存在,经过体外变复性的抗体融合蛋白ScFv-Fc,进行Prote in G Sepharose柱亲和层析纯化,纯度达90%~95%。体外活性检测结果表明,重组抗体融合蛋白ScFv-Fc可以特异结合A型肉毒类毒素抗原,其相对亲和力近似于母本单链抗体,其稳定性高于母本单链抗体。     

人成骨蛋白成熟肽基因在毕氏酵母(Pichia Yeast)中的高效表达

采用PCR方法,根据文献报道的人成骨蛋白（osteogenic protein-1,OP-1）成熟肽基因序列,设计并合成一对引物,从构建的含人成骨蛋白基因的质粒中扩增获得大小为420bp的DNA片段,连接到pGEM-T载体进行测序,证明获得人成骨蛋白成熟肽基因片段,并以pPIC9K为表达载体构建重组表达质粒,转化大肠杆菌细胞,经鉴定的阳性重组质粒并线形化,电转化毕氏酵母细胞GS115,于30℃进行甲醇诱导分泌表达,表达产物存在于培养基中,占分泌蛋白的10％.重组表达产物进行Western Blot可以检测到重组表达产物,ELISA检测其具有特异性结合活性.     

丝状固氮蓝藻柱胞鱼腥藻原生质球的培养再生

丝状固氮蓝藻柱胞鱼腥藻 (Anabaena cylindrica)在含 0 .1mol/ L KCl的 Allen液体培养基中培养7～ 9d,90 %以上细胞转化为原生质球或半原生质球 ,对低渗敏感或抗低渗。此种材料经 0 .1%溶菌酶 ,在 2 8℃下处理 3～ 4h,细胞低渗破裂率约 10 0 % ,成为质量较高的原生质球。用 0 .15mol/ L Ca Cl2 液体无机盐培养基培养 ,原生质球再生和分裂。不同原生质球再生不同步 ,最快培养 3 d分裂。再生分裂的主要方式为均等分裂 ,但有不规则分裂和出芽方式 ,再生率在 2 5%以上。     

梭菌神经毒素分子作用机制的相关研究进展

厌氧梭菌产生的神经毒素可以引起严重的神经失调,甚至威胁生命.作为具有很高同源性的7种毒素分子,它们既具有相似的发病机制又有不尽相同的结构基础和分子作用方式,从而产生不同的毒素活性.主要就神经毒素分子作用机制相关的毒素蛋白结构、毒素受体、毒素活性的发生、毒素与底物的作用、底物的调节作用与应用等内容的研究进展作一综述.     

人源抗狂犬病毒糖蛋白稳定型抗体精氨酸密码子突变株的构建及其在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达

目的：对人源抗狂犬病毒糖蛋白（GPRV）单链二硫键稳定抗体（ScdsFv）进行精氨酸密码子修饰,实现其在酵母中的分泌表达,并检测其生物学活性。方法：参照巴斯德毕赤酵母偏好密码子,对抗GPRV ScdsFv原核表达基因进行密码子修饰,并通过点基因融合技术构建ScdsFv重组酵母表达基因,连接pPIC9K构建重组表达质粒pPIC9K-ScdsFv,电转化毕赤酵母GS115,经筛选后进行甲醇诱导表达。结果：SDS-PAGE及Western blot检测到重组表达质粒在30℃经甲醇诱导表达的蛋白相对分子质量为30000;荧光抗体试验验证ScdsFv能靶向结合GPRV;MTT试验说明ScdsFv能中和狂犬病毒,具有一定的细胞保护作用。结论：重组ScdsFv在酵母系统中可以有效表达。具有较好的生物学活性。     

人成骨蛋白成熟肽基因在毕赤酵母中的克隆及其序列分析

采用PCR方法,根据献报道的人成骨蛋白-1（OP-1）成熟肽基因序列,设计并合一对引物,从含人成骨蛋白基因的质粒中扩增获得大小的420bp的DNA片段,连接到pGEM-T载体进行测序,证明获得人成骨蛋白成熟肽基因片段,继之以pPIC3.5k为表达载体构建重组表达质粒,并经PCR及酶切鉴定。     

对有机体的感情

《对有机体的感情》是一本传记,评述细胞遗传学家麦克林托克(Barbara McClintock)的生平和科研成果,包括基因转座的发现以及30多年中她在学术生活中的坎坷历程;并且紧密地联系科学和科学研究的哲学思想问题。由于涉及的问题对科研工作可能有所启示,本文主要探讨这些问题的意义。一种新的见解,新的概念往往是从客观事物反映到科学家的头脑而产生的。但是概念成为科学体系的组成部分必得到科学家所属的社会(学术社会)所接受,同时社会的集体智慧对新见解的成长又提供了条件。从整体说,科学知识是由个人的创造和社会的确认之间的相互作用而成的,这种关系有时比较复杂但又微妙地配合,有时这种相互的作用又告失败。失败的原因可能是由于个人因素,或者是由于学术的偏见而没有被社会     

肉毒毒素和其它微生物神经毒素的性质及其在医学上的应用

引言 1989年12月,美国FDA批准A型肉毒毒素作为新药投产,以治疗12岁以上人的肌肉紊乱性斜视、偏侧面肌痉挛和眼睑痉挛。还可用于许多其它肌张力障碍和运动失调等疾病的实验性治疗。此举为毒素应用于人的神经和肌肉组织开辟了一个新领域。     

辽东湾小凌河口湿地土壤微生物群落结构与微生态环境因子的关系

为揭示河口湿地微生态环境因子对土壤微生物群落的影响,在辽东湾小凌河口设置5条监测样带,每条监测样带设置4个监测样点,其中1条(样带G)位于围海养殖圩堤附近,另外4条(样带A、B、C、D)依次从圩堤向河口水域靠近,采集了不同样带的土壤样品,利用磷脂脂肪酸法分析其土壤微生物群落结构分异特征。结果表明:养殖塘圩堤显著改变了湿地土壤微生态环境特征和微生物群落结构,圩堤以外湿地土壤微生物丰度沿样带环境梯度先升高后降低,最高值(样带C)比近河口水域区域(样带D)细菌、革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌丰度分别增加了33.33%、22.00%、50.07%和35.65%;土壤微生物群落结构与钾离子(K⁺)、钙离子(Ca²⁺)、总氮、镁离子(Mg²⁺)及硝态氮呈显著相关关系;方差分解分析显示,盐基离子累积可以解释微生物群落结构变异的72.9%,随着土壤中镁钙离子比(Mg²⁺/Ca²⁺)的升高,真菌、放线菌和革兰氏阳性细菌丰度呈幂函数显著降低。因此,河口湿地围海养殖和湿地盐基离子的变化对土壤微...