基于UPLC-Q-TOF/MS的归身和归尾补血机制的代谢组学初步研究

通过比较归身和归尾对溶血性血虚大鼠血清内源性代谢物的差异,探讨归身和归尾补血机制的异同。采用乙酰苯肼(APH)复制溶血性血虚大鼠模型,基于UPLC-Q-TOF/MS比较归身和归尾给药后的大鼠血清代谢指纹图谱,采用SIMCA-P14.0软件进行多变量统计分析和单变量统计分析,寻找差异代谢物。与空白对照组比,溶血性血虚模型组中琥珀酸盐、尿嘧啶、乳清酸、胞啶、尿苷、胆酸、焦谷氨酸、胞嘧啶、脱氧尿苷、3-甲基组氨酸、甲基腺苷在模型组中相对含量升高,而左旋谷酰胺、左旋色氨酸、异亮氨酸、PC(16∶0/16∶0)、脯氨酸相对含量降低,归身和归尾给药后,各代谢物出现不同程度的回调,归身组回调更接近正常组。同时,归身和归尾给药后可通过嘧啶代谢、氨基酸代谢、饱和和不饱和脂肪酸代谢及能量代谢等途径调节代谢通路。     

隔山牛皮消、耳叶牛皮消和戟叶牛皮消中四个C_(21)-甾体苷元含量比较研究

传统中药或民间应用对隔山牛皮消(Cynanchum wilfordii)、耳叶牛皮消(Cynanchum auricutalum)和戟叶牛皮消(Cynanchum bungei)三种药材基元植物基本上做白首乌或隔山消混用,其主要活性成分为C_(21)-甾体类成分。三种药材均含有告达亭(caudatin)、去乙酰萝藦苷元(deacymetaplexigenin)、开德苷元(kidjolanin)和加加米宁(gagamine),本文利用HPLC分析技术,检测四个C_(21)-甾体化合物在三种药材中的含量,为合理使用三种药材提供依据。平均每克药材中C_(21)-甾体含量(mg/g)研究结果表明:告达亭在隔山牛皮消中含量(水解前/水解后=0.3542/9.7142)最高、耳叶牛皮消(水解前/水解后=0.2577/4.0825)次之、戟叶牛皮消(水解前/水解后=0.0734/0.1895)最少;其次开德苷元在耳叶牛皮消中含量(水解前/水解后=0.1102/0.6094)比戟叶牛皮消(水解前/水解后=0.0751/0.3225)和隔山牛皮消(水解前/水解后=0.0736/0.2813)高,而后两者含量相近;加加米宁、去乙酰萝藦苷元在三种药材中含量差别不明显。     

白尾地鸦的巢址选择

2017年4和5月,在位于新疆塔克拉玛干沙漠南缘的和田地区民丰县对白尾地鸦（Podoces bidduphi）的巢址选择进行研究。共记录白尾地鸦巢12个,测量了巢参数,用Mann-Whitney U检验分析巢样方与对照样方的差异,用主成分法分析影响白尾地鸦巢址选择的主要因子。结果显示：1）白尾地鸦巢多筑于绿洲边缘的柽柳（Tamarix）灌丛,巢距地面高（109.1 ± 13.2）cm,巢深（8.5 ± 0.5）cm,巢厚（3.8 ± 0.4）cm,内径（13.9 ± 0.9）cm,外径（21.6 ± 1.3）cm;2）巢样方的植被物种数和植被盖度远高于对照样方;3）影响白尾地鸦巢址选择的主要因素为植被物种数及干扰,其中干扰主要指距道路以及距居民点的距离。综上所述,白尾地鸦的巢址选择受食物等生存需求和躲避干扰等安全因素的双重影响,是生存与繁殖权衡的结果。     

长江中下游湖泊短颌鲚线粒体控制区遗传多样性分析

为探明长江中下游不同湖泊中短颌鲚(Coilia brachygnathus)遗传多样性水平和遗传分化程度,以洞庭湖、长湖、巢湖3个地理群体作为研究对象,采用线粒体控制区序列为分子标记,分别应用软件Dna SP 5.0、Arlequin3.1.1、MEGA5.0和Network 5.1进行了遗传参数统计和单倍型间分子变异分析(AMOVA),构建邻接系统树及单倍型网络图。对长江中下游短颌鲚野生群体的遗传多样性和遗传结构进行分析。结果显示,用来分析的1 236 bp D-loop区序列中共90个变异位点,54个简约信息位点。长江中下游3个地理群体中共发现58个单倍型,单倍型多样性(h)范围0.949~0.982,核苷酸多样性范围0.004 99~0.006 21,说明长江中下游3个湖泊短颌鲚地理群体具有较高的遗传多样性水平。3个短颌鲚地理群体遗传分化指数(Fst)为0.265 95,呈现出中等程度的分化水平,主要表现在巢湖群体与其他群体之间处于中等程度分化水平。依据遗传距离构建系统发育树及单倍型网络图也出现相类似结果。     

高等植物叶绿体表达重组蛋白研究进展

近年来,基因工程技术发展迅速,许多重组蛋白得以表达。其中利用植物生物反应器表达特异药物蛋白为人类一些重要疾病的预防和治疗提供了新途径。植物叶绿体遗传转化和表达系统成为目前植物生物反应器的研究热点。因结构和遗传上的特殊性,高等植物叶绿体在重组蛋白表达方面具有独特优势,外源基因表达量高、定点整合,而且叶绿体母系遗传特性保证了生物安全性。很多重要药用蛋白质在植物叶绿体中表达成功。烟草作为高等植物叶绿体转化模式植物,在疫苗抗原、抗体等药物蛋白和其他重要重组蛋白表达方面取得显著进展。高等植物叶绿体遗传转化也为叶绿体基因的表达和调控机制的研究提供新的技术和方法。文中从叶绿体遗传转化原理、载体构建、重组蛋白和重要药物蛋白在叶绿体中的表达以及重组蛋白表达对植物代谢和性状影响等多个角度,对高等植物叶绿体遗传转化体系研究的新进展进行了综述,以期为叶绿体表达平台的开发和重要药用蛋白质的表达提供新思路。     

RP-HPLC法测定不同产地及不同部位马蓝中六种活性成分的含量

建立了RP-HPLC法测定马蓝中色胺酮、2-苯并噁唑酮、靛玉红,靛蓝、阿克苷和角胡麻苷六种活性成分含量的方法,并对不同产地及不同部位药材含量进行了分析。采用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm),以乙腈和水为流动相梯度洗脱,流速为1 m L/min;检测波长280 nm;柱温30℃。马蓝中六种化学成分分离良好,各成分含量与峰面积在测定范围内均呈良好的线性关系(r≥0.999 1),加样回收率分别为100.25%、99.93%、100.46%、99.94%、99.92%、100.02%,RSD值分别为1.46、0.13、0.52、0.09、0.16、0.40。该方法简便快捷、重现性好,可为南板蓝根药材的品质评价和质量控制标准提供科学依据。     

幼年大鼠脾虚腹泻合并肠道菌群失调模型的建立

目的建立一种脾虚腹泻合并肠道菌群失调的模型,为研究中医药治疗小儿脾虚腹泻证的疗效机制提供可行性模型。方法按照随机的原则将20只清洁级3周龄SD幼年大鼠分为正常和模型两组,采用番泻叶、生大黄联合头孢拉定、硫酸庆大霉素灌胃,观察其对幼年SD大鼠外观、体质量、肠道微生物和小肠黏膜的影响。结果与正常组相比,模型组幼年大鼠被毛枯槁、精神萎靡,体质量增长缓慢;4种琼脂培养基培养的肠球菌、大肠埃希菌、细菌、乳酸菌数量差异均有统计学意义(Ps0.01);小肠黏膜层次模糊,结构混乱,小肠绒毛形态破坏。结论番泻叶、生大黄联合头孢拉定、硫酸庆大霉素灌胃能够建立一种合适的幼年大鼠脾虚腹泻合并肠道菌群失调的模型。     

水稻白叶枯病菌的RAPD分型

对植物病原菌的分型是生物技术应用的新领域,水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv． Oryzae)是亚洲地区水稻的主要病害。前人曾根据不同菌株在5个鉴别品种上的反应型将中国白叶枯病菌分为7个致病型⑴。近来,Leach等⑵已开始利用基因组特异的重复顺序对白叶枯病菌株进行DNA指纹分析,章琦等⑶也利用相同的探针对我国部分菌株进行了RELP分型,其结果与传统病理学的分类结果有相符之处．但又有相当的不同,说明传统分类结果尚有许多值得探索之处。与RFLP相比,RAPD(Random　Amplified Polymorphic DNA)具有简便和快速的优点,而且相当灵敏,在动植物基因组分型(gennome typing)上已得到较为广泛的应用〔4.5〕。我们利用RAPD标记对我国28个菌株进行分型,发现随机引物A－14可用以区分所研究的28个菌株。进而对扩增带型进行了相似百分率分析,并利用另一随机引物A一1 3作了进一步分析。本文是用RAPD方法尝试对部分水稻白叶枯病菌分型的首次报道。     

黑曲霉糖化酶基因在酿酒酵母基因组中的整合及其在整合子中的稳定表达

把黑曲霉糖化酶cDNA连同酵母α因子启动子及其分泌序列,通过转化整合到酿酒酵母染色体DNA上,获得了整合型的分解淀粉酵母转化子。Southern印迹分析证明了糖化酶cDNA对酵母染色体DNA的整入。整合型转化子在以可溶性淀粉为碳源的培养基中分泌糖化酶活力达2．5u／m1,在非选择性培养基中连续转移10次．糖化酶分泌活力稳定不变。