B淋巴瘤细胞条件液中促进CFU-Gm增殖放大活性的研究(简报)

在证实小鼠M 12.4.1-B淋巴瘤细胞条件液(M 12.4.1-CM)含有促进多向性造血祖细胞、粒单系祖细胞增殖放大活性的基础上,本实验对这种增殖放大活性做了进一步的研究。M 12.4.1-B淋巴瘤细胞株无血清培养过程中,条件液中促进CFU-Gm增殖放大活性随培养时间延长,呈逐渐增强趋势,促进CFU-Gm增长率在48小时达244.4±46.1;当延续至72小时后,其增殖放大活性不再明显增殖。     

泰国雨久花属（雨久花科）一新变种——窄叶鸭舌草

描述了泰国雨久花属Monochoria C.Presl一新变种:窄叶鸭舌草M.vaginalis var.angustifolia G.X.Wang。该新变种与原变种鸭舌草M.vaginalis var.vaginalis都具有类似的总状花序,但前者的叶片为窄披针形,3-7×0.3-2.0cm,叶片宽长比在0.1-0.4之间,叶基部裂片最长不超过2mm,总状花序具花3-7朵,而原变种鸭舌草的叶片较宽,为卵心形或心形,4-9×2-8cm,叶片宽长比在0.5-0.95之间,叶基部裂片最长可达到2cm,总状花序     

调胃承气汤加减联合苦参汤药浴治疗斑块型银屑病（风热血燥证）疗效观察

摘要 目的：观察调胃承气汤加减联合苦参汤药浴治疗斑块型银屑病（风热血燥证）临床疗效。方法：选取2020年3月~2021年3月湖南中医药大学第二附属医院收治的斑块型银屑病患者96例,按抛掷硬币法分为对照组（n=48,基础对症治疗）和观察组（n=48,在对照组基础上给予调胃承气汤加减联合苦参汤药浴综合治疗）。比较两组临床疗效、炎症反应[肿瘤坏死因子-α （TNF-α）、白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-22（IL-22）]、血清血管内皮生长因子（VEGF）和转化生长因子β1（TGF-β1）水平、银屑病皮损面积、严重程度指数（PASI）和瘙痒程度及不良反应。结果：与对照组77.08%比较,观察组总有效率93.75%更高（P<0.05）。两组治疗后IL-17、TNF-α、IL-22水平及PASI、瘙痒程度评分均较治疗前降低,且观察组较对照组低（P<0.05）。两组治疗后VEGF和TGF-β1水平均较治疗前降低,且观察组较对照组低（P<0.05）。观察组不良反应总发生率为10.42%略高于对照组4.17%,经比较两组无统计学差异（P>0.05）。结论：针对斑块型银屑病患者而言,调胃承气汤加减联合苦参汤综合治疗具有较好的临床疗效,可减轻炎症反应,预防纤维化和抑制血管新生,改善PASI评分和瘙痒程度,安全性较好。     

产木聚糖酶枯草芽孢杆菌构建及表达条件优化

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有很强的分泌能力,产酶能力强,属于食品级安全微生物.以枯草芽孢杆菌为宿主菌异源表达木聚糖酶,采用同源重组的方法将木聚糖酶基因连接到载体pWB980上,构建表达载体pWB980-xynZF-2,电击转化枯草芽孢杆菌WB600,获得重组工程菌WB600-pWB980-xy...     

V1C、G116D、N171H定点突变对黑曲霉(Aspergillus niger)XZ-3S木聚糖酶XynZF-2热稳定性的影响

[目的]探索V1C、G116D、N171H定点突变对木聚糖酶Xyn ZF-2热稳定性的作用。[方法]生物信息学方法确定木聚糖酶Xyn ZF-2可突变位点,引入Cys、Asp、His;定点突变V1C、G116D、N171H,PCR扩增突变基因xyn CDH,构建大肠杆菌表达载体,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达目的蛋白并测定酶活,分析酶学性质。[结果]突变酶Xyn CDH的最适温度由40℃上升到45℃。40℃条件下突变酶Xyn CDH半衰期t40℃1/2由55 min延长到60 min;在45℃条件下,突变酶Xyn CDH的半衰期t45℃1/2由7min提高到15 min。[结论]定点突变V1C、G116D、N171H能增强木聚糖酶Xyn ZF-2热稳定性,为加深木聚糖酶分子改造的研究提供参考。     

GDNF的生物学效应对脂筏中胞膜蛋白定位的重要性研究*

摘要目的：探讨GDNF的生物学效应对胞膜蛋白在脂筏的定位的影响。方法：首先以PBS 或GDNF 预处理体外培养的真核细 胞,提取脂筏,以免疫印迹方法检测三种胞膜蛋白（RET,NCAM140 及integrinβ1）在脂筏的含量变化。结果：GDNF预处理组RET 和NCAM140蛋白在脂筏的含量增加,而integrinβ1 蛋白的含量无显著性变化。在脂筏中也可检测到integrinβ1 蛋白。结论： GDNF 可影响某些胞膜蛋白在细胞膜上的定位,使其招募到脂筏,这可能是GDNF的一种重要生物学效应。     

乙型肝炎病毒PreS2S基因在毕赤酵母中表达的研究

构建重组质粒PHIL-D2/PreS2S以研究乙肝病毒PreS2(120-146)S基因编码蛋白在毕赤酵母中的表达。通过PCR扩增获得PreS2S片段,插入含AOX1启动子的Pichia Pastoris表达载体PHIL-D2中,构建重组表达质粒PHIL-D2/PreS2S,转化酵母宿主菌GS115。挑取阳性克隆摇床培养,甲醇诱导表达。通过ELISA、RPHA鉴定表达产物。成功构建了PHIL-D2/PreS2S真核表达载体,经过序列分析,插入的基因为在中国流行的adr亚型。在毕赤酵母中重组载体表达了S蛋白,S蛋白的表达量为34.9 mg/L,PreS2抗原检测为强阳性。利用毕赤酵母表达系统能够有效地表达乙型肝炎病毒的PreS2S蛋白,PreS2S蛋白具有良好的生物学活性。     

A33启动子结肠癌特异性探究及SV40增强子对其转录活性影响

为了探究A33核心启动子结肠癌特异性及SV40增强子对其转录水平的影响,该研究通过构建A33核心启动子和带SV40增强子的A33核心启动子(eA33)的荧光素酶报告基因载体pGL3-A33和pGL3-eA33,与内参照pRL-SV40质粒共转染至不同的细胞系中,利用双荧光素酶检测系统检测分析了A33和eA33启动子在不同细胞系中的转录活性。结果显示,A33核心启动子在结肠癌细胞系中具有转录活性低,但结肠癌特异性好的特点,而在其他类型癌细胞中基本没有活性。同时发现,eA33在各类癌细胞中的转录水平与A33相比,均呈大幅度提高,有显著性差异(P<0.01),但SV40增强子能显著增强A33启动子转录活性的同时减低了其结肠癌特异性。这为靶向癌症基因—病毒治疗策略在结肠癌的生物治疗应用中寻找结肠癌特异性的启动子奠定了研究基础。     

一个热诱导穿梭表达载体的构建及其在链霉菌中的应用

为探索大肠杆菌λ噬菌体表达调控元件在链霉菌中的应用,构建了一个链霉菌大肠杆菌穿梭表达载体pHZ1080,并将来自链霉菌FR-008的聚酮合酶(PKS)基因置于其中的λ噬菌体启动子P_R下游,得到表达PKS的穿梭质粒pHZ1067。与在大肠杆菌中一样,该质粒在变铅青链霉菌中也受热诱导表达100kD的PKS蛋白;表达的PKS蛋白可由SDSPAGE和Western-blot实验检测到。PKS在链霉菌中的热诱导表达表明,构建的载体也能用于链霉菌诱导表达外源基因。  