β-淀粉样蛋白单体及寡聚体鉴定方法的改进与优化北大核心CSCD

β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)经过自身聚集形成寡聚体,是导致阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病的重要风险因素之一。鉴定Aβ寡聚状态对于细胞毒性和寡聚抑制的研究非常重要。本文通过优化Aβ42蛋白用量、增加交联剂、尺寸排阻色谱法(size exclusion chromatography,SEC)和硫磺素T(thioflavin T,Th T)荧光分析等方法,对Aβ42的蛋白质聚集状态进行检测。得到改进和优化的方案:(1)对电泳和电镜的优化,16.5%的Tris-tricine胶,最适合分析Aβ42寡聚状态。使用电泳和电镜对Aβ42检测时,其用量有较严格的限制。电泳的上样量应为0.5μg最佳。50μg/m L Aβ42单体浓度,最适合电镜观察;(2)对Aβ42交联的优化,终浓度为0.3mmol/L BS3,有利于对Aβ42寡聚体的区分;(3)SEC可以利用凝胶孔隙的大小,实现Aβ42单体和寡聚体在非变性条件下的分离。与Aβ40相比,Aβ42进行SEC分析时,单次上样量需达到6.75μg以上;(4)细胞毒性实验和Th T检测,可以反馈Aβ42寡聚状态的鉴定效果。上述检测方法的细化和改进,将为Aβ42肽在AD的研究中提供一定的参考。一些Aβ42特异性寡聚体的鉴定方法本文未提及,仍需要在今后的研究中进一步改进与优化。     

西伯利亚鲟在高温下饥饿后的补偿生长

在高温(29±1)℃下将西伯利亚鲟幼鱼(21.61±0.03)g饥饿0(对照)、6、12和18d后恢复摄食3周, 研究摄食、生长和鱼体组成的变化。结果表明, 经过不同程度饥饿的鱼体重均显著低于对照组(P0.05), 而饥饿18d(S18组)的鱼体重显著低于对照(P0.05)。在饥饿过程中,鱼体脂肪含量和肝脏肝糖原含量下降的同时, 各饥饿组的灰分含量上升, 但仅S18组与对照差异显著(P0.05)。结果表明, 西伯利亚鲟在高温下表现出完全补偿现象, 且是通过同时提高摄食率和饲料效率来实现补偿生长的, 因此在夏季高温时对鲟鱼进行一段时间适度的饥饿可以在不影响生长和体成分的前提下节约饲料成本, 减少因过量投饵而引起的环境污染。       

氨基酸等化学刺激物对异育银鲫摄食行为的影响

实验采用撞球法中的双球法研究异育银鲫对氨基酸等刺激物的摄食行为的反应,运用实验鱼对实验球和空白球啄咬次数不同判断刺激物是否具有促摄食作用,运用刺激物与10-5mol/L丙氨酸啄咬次数的比值来比较不同刺激物间的反应。实验鱼体重为(46.5±9.3)g,刺激物为10-6-10-2mol/L的天冬氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、精氨酸、丙氨酸、组氨酸、甜菜碱和乳酸,以及10-6-10-2g/L的鱿鱼提取物复合物。实验记录从第2分钟到第10分钟的数据。结果发现,异育银鲫对多数刺激物的刺激没有反应。天冬氨酸在10-6-10-4mol/L浓度范围内具有明显的促摄食作用,但10-3-10-2mol/L浓度范围内则具有微弱的摄食抑制作用。10-5mol/L和10-4mol/L的天冬氨酸溶液、10-4mol/L的精氨酸溶液对异育银鲫的促摄食作用最强,分别为10-5mol/L丙氨酸刺激作用的4.86、5.15和4.6倍。精氨酸、甜菜碱和乳酸的反应具有明显的浓度-反应效应,平均相对啄咬率分别在10-4mol/L、10-5mol/L、10-5mol/L浓度下达到最高,其他刺激物引起的反应在各浓度下差异不显著。蛋氨酸和乳酸在10-6-10-2mol/L各浓度下显著性地抑制异育银鲫的摄食行为。10-4mol/L精氨酸、10-5mol/L丙氨酸以及10-6、10-3和10-2mol/L赖氨酸对异育银鲫的撞球反应具明显的刺激作用。除甜菜碱和天冬氨酸外,多数刺激物引起摄食行为反应在2-9min期间非常稳定。甜菜碱和天冬氨酸刺激异育银鲫所产生的摄食行为反应有随记录时间的延长逐渐适应的趋势,特别是在10-6-10-4mol/L。       

金樱子提取液对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用

目的:研究金樱子提取液对糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)大鼠的肾脏保护作用。方法:在高糖高脂饲料喂食SD(Sprague-Dawley)大白鼠的基础上腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病肾病大鼠模型,随机分为糖尿病肾病模型组(DN组)和金樱子治疗组(DN+RLM组),同时另设正常对照组(NC组)和金樱子对照组(NC+RLM组)。检测金樱子提取液对各组大鼠血糖(fasting blood-glucose,FBG)、糖化血红蛋白(glycosylated haemoglobin,GHb)、24小时尿微量白蛋白和尿量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及肾脏结构的影响。结果:与DN大鼠相比,糖尿病肾病大鼠经金樱子提取液治疗后,大鼠FBG、GHb水平、24 h尿微量白蛋白、24 h尿量、肾脏指数明显降低,血脂紊乱、肾功能损害以及DN肾脏病理明显改善,且无明显副作用。结论:金樱子提取液可明显降低DN大鼠血糖,改善DN大鼠血脂、肾功能紊乱及肾脏病理变化,对糖尿病大鼠肾脏具有较强的保护作用。     

利用RAPD标记构建木耳属种间关系的研究

摘 要: 利用RAPD标记以银耳属的2个种为外类群研究了木耳属8个种的分子系统发育关系。根据UPGMA 构建的树状图结果表明木耳属(Auricularia)和银耳属(Tremella)分别为单一的分类单元。木耳属的8个种被分成3个明显不同的组,第一组包括盾形木耳(A.peltata Lloyd)和角质木耳(A.cornea Spreng.),第二组包括所有供试的黑木耳(A.auricula Underw.),第三组包括皱木耳(A.delicata Henn.)、琥珀木耳(A.fuscosuccinea Farl.)、毛木耳(A.polytricha Sacc.)、大木耳(A.maxima Y. R. Guo)和网膜木耳(A.reticulata L. J. Li)五个形态种。种间发育关系表明角质木耳和毛木耳应是两个不同的种而非同种异名,子实体横切面中髓层的有无并不表明不同种间亲缘关系的远近。     

利用氨基酸分子比鉴别放线菌胞壁类型的研究

对已知细胞壁为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型的21株（10属）放线菌进行了胞壁氨基酸组分的分析。结果表明,所有被检测菌株的细胞壁在氨基酸分析仪上均显示有谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸和二氨基庚二酸（DAP）。而同一种胞壁类型的菌株,尽管是不同的种或属,氨基酸的总量也各不相同,但这4种氨基酸的分子比却有一个共同而稳定的相似比值,不同的胞壁类型则有不同的比值。从而使每种胞壁类型具有各自的特征,可以作为鉴别的一种有效指标。实验还发现,4株胞壁为111型的弗兰克氏菌以及Ⅳ型的1株诺卡氏菌和1株地中海拟无技酸菌,在薄层层析中除显示有me     

重金属污染土壤原位化学固定修复研究进展

重金属污染土壤原位化学固定修复是通过添加不同外源物质固定土壤中重金属元素,达到降低重金属迁移性和生物有效性的一种重要方法.由于操作方便和效果快速,使其在污染土壤治理过程中有着不可代替的作用,尤其对于耕作土壤中的面源污染.许多具有俘获土壤中重金属离子能力的自然物质和工业副产品如磷矿石、泥炭土、石灰和有机肥等都可用在实地的固定修复中.采用实验室评价和实地应用评价,一方面可以评估这些固定物质在土壤中对重金属离子的固定效率;另一方面可以评估重金属的溶出、释放和生物毒性等生态风险.本文对原位修复过程中采用的不同固定物质的来源和分类进行了概述,对化学固定过程的机理进行了探讨,同时阐述了重金属污染土壤化学固定修复应用过程中的实验室评价和实地应用评价方法,分析了化学固定修复的局限性并提出了今后的发展方向.     

云南西双版纳兰科植物

云南西双版式纳是我国兰科植物分布最集中的地区之一,经多年的野外考察和采集整理后,迄今计有96属335种和2个变种,有2个属为全国新记录,190种为西双版纳的新记录,其中50个种是全国新记录,21种为本区特有种,该地区的兰科种属类群远超过海南省而相当于台湾省。     

钙／钙调素依赖性蛋白激酶对17.7kD和6kD胰腺蛋白的磷酸化

本文报导了胰腺提取物中两种可被钙／钙调素依赖性蛋白激酶磷酸化的热稳定蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其表观分子量分别为１７．７ｋＤ和６ｋＤ。经钙／钙调素依赖性蛋白激酶磷酸化后,其最大磷酸参入最为８．８μｍｏｌ／ｇ蛋白。同时磷酸化作用导致１７．７ｋＤ蛋白在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中迁移率发生变化。本文还进一步分析了各种阳离子对磷酸化的影响,并对此两种蛋白可能的生理功能进行了初步探讨。     

云南大山包越冬黑颈鹤迁徙路线的卫星跟踪

2005年2月26日和3月1日在云南省昭通大山包黑颈鹤国家级自然保护区，分别为4只越冬黑颈鹤佩戴卫星信号发射器（PTTs），跟踪研究其迁徙路线和迁徙停歇地。2005年春季迁徙中，有2只跟踪黑颈鹤到达繁殖地，其中1只黑颈鹤在2005年11月和2006年3月分别完成从繁殖地返回越冬地和从越冬地再次到达繁殖地的迁徙过程。2只春季迁徙黑颈鹤的迁徙路线大致相同——沿着长江上游金沙江、大渡河一直向北到达黄河上游白河及黑河沿岸若尔盖湿地内。春季迁徙过程中，途中停歇3—4次，总迁徙距离是674—713 km，迁徙全程所用时间3—4天。秋季迁徙全程所用时间8天。在4个PTTs工作期间，共确定有13个黑颈鹤迁徙停歇地，其中11个停歇地在河流滩地；其他2个停歇地在高山湖泊附近。总体上，黑颈鹤一般选择海拔在1 900 m以上湖泊、河流等湿地内，距离耕地较近且人、畜干扰较少的栖息地停歇。