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通过分离纯化和酶学性质测定 ,确定耐热对硝基苯磷酸酶 (p nitrophenylphosphatase)是金属酶蛋白 ,活性部位含有镁离子 ;该酶是中度耐热蛋白质 ,金属离子有助于提高其热稳定性 .该酶的Km 为 3 0 31mmol L ,Vmax为 313 5 μmol·min-1·mg-1;二级结构中大约有 74 5 %α螺旋 ,2 5 5 % β转角 .在pH 7 0~ 12 0范围内相当稳定 .该酶在SDS溶液中稳定性较差 ,在TritonX 10 0溶液中较为稳定 ,在Tween 2 0溶液中很稳定 . 相似文献
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大肠杆菌的dnaA46突变能被F′质粒整合抑制。整合抑制的菌林(Sin菌株)在通过转导引入了recA56突变后又变得不能在40℃中生长。标记转移、吖啶橙敏感性,F′质粒消除和mini-染色体质粒转化等实验说明,Sin菌株中F′质粒始终处于整合状态,并且在40℃中细菌染色体的复制由整合状态的F′质粒所带动。比较了Sin recA~ 和Sin recA~-菌株在不同温度中的DNA、蛋白质的生物合成情况。实验结果说明recA基因在DNA复制过程中起作用。前人的工作证明了recA基因在DNA重组和DHA损伤应急修复(SOS)过程中是一个关键的基因。本文的工作为recA基因的功能提供了新的认识。 相似文献
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用标记获救法克隆了整合状态的F′质粒的复制起点,证明了由这一复制起点构成的mini-F质粒在不亲和性和对吖啶橙的敏感性方面和自主状态的F′质粒都没有不同。对这一复制起点和来自自主状态的F质粒的复制起点进行了亚克隆,并作限制性内切酶酶切分析比较,没有发现两者在结构上有差异。本文的结果提示,F质粒和F′质粒在发动染色体复制中对recA基因的依赖性的不同,可能与质粒整合在染色体上的位置不同有关。 相似文献
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在多聚酶链式反应体系中加入甲酰胺可以有效地抑制非特异性扩增,提高特异性扩增,并使反应的灵敏度提高一个数量级。 相似文献
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嗜热脂肪芽孢杆菌FDTP-3编码邻苯二酚2,3-双加氧酶基因的核苷酸全序列分析何知庆,毛裕民,盛祖嘉,沈仁权(复旦大学遗传所,上海200433)嗜热细菌与嗜温细菌相比,在用于分解工业废水的酚菜化合物方面可望处于有利的地位.我们在前文中[1]报道了对一... 相似文献
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