c-Abl蛋白酪氨酸激酶形成同源二聚体

c-Abl是非受体酪氨酸激酶,它在细胞内被一些基因毒性的、氧化的及其它形式的压力所激活。目前研究证明：应用标记的c-Abl发现其在细胞内可以相互形成同源二聚体,并且一分子c-Abl的N末端区域与相应的另一分子的C末端相互作用形成二聚体。实验进一步表明： cAbl SH3 结构域结合到另一c-Abl 分子富含脯氨酸的C-末端约958-982氨基酸区域。如果去除c-Abl 富含脯氨酸的结构域,就会阻止二聚体的形成。这些结果首先证实了c-Abl在细胞内可以相互形成同源二聚体,并暗示着二聚体的形成可能影响着c-Abl活性的调节。     

高毒力肺炎克雷伯菌的毒力机制研究进展

肺炎克雷伯菌是一种常见的革兰阴性杆菌,是第二大容易引起院内感染的细菌。高毒力肺炎克雷伯菌(HvKP)又称高黏性肺炎克雷伯,是从传统肺炎克雷伯菌中分离出来的具有高毒力、高黏性的侵袭性细菌,其表现出的高毒力会引起健康人发生侵袭性感染,严重者会危及生命。目前,临床实验室主要通过拉丝实验与传统的肺炎克雷伯菌相鉴别。研究发现,Hv KP的高黏性与其K1、K2、K57等血清型,编码荚膜相关基因及铁载体相关。对HvKP的毒力增强因素以及该菌引起的肝脓肿做简要综述。     

铅对水稻植物激素含量的影响

目的:研究铅对水稻植物激素含量的影响.方法:以湘早籼24和八两优100为材料,通过盆栽试验,采用高效液相色谱法测定不同浓度铅处理下水稻根和叶中植物激素的含量.结果:在低浓度铅胁迫下,湘早籼24叶中GA1和CTK含量以及与ABA比值、八两优100叶中GA1和IAA含量以及与ABA比值均增加,两个品种根中GA1和IAA含量以及与ABA比值增加、而ABA含量均有降低趋势.在高浓度铅胁迫下,两个品种的叶和根中GA1、IAA和CTK含量以及与ABA比值均降低;根中ABA含量增加.两个品种叶中ABA含量均随铅处理浓度的增加而增加.结论:低浓度铅能促进水稻的生长发育,而在高浓度铅胁迫下,水稻的生长发育受到抑制,这些作用与其差异调节水稻体内多种植物激素含量和激素间比值有关.     

自噬相关基因LC3-I的基因表达及单克隆抗体的制备

目的：通过克隆LC3．I基因,体外原核表达LC3-I蛋白后制备抗LC3单克隆抗体,作为自噬研究中的标记分子检测自噬的发生和发展过程。方法：RT．PCR方法从RAW264．7细胞基因组中克隆LC3基因,亚克隆至pQE80L原核表达载体后转化E．cobDH5a进行诱导表达,SDS—PAGE电泳及Westemblot鉴定表达蛋白。蛋白纯化后免疫BALB／c小鼠。采用淋巴细胞杂交瘤技术,制备分泌抗LC3．I杂交瘤细胞株,体内诱生腹水制备mAb,间接ELISA法测定其效价,辛酸一硫酸铵沉淀法及亲和层析法纯化mAb。结果：成功克隆了LC3一I基因,并对其在E．coilDH5a进行诱导表达,SDS-PAGE分析表明在相对分子量Mr为20×10^3有特异条带,Westernblot验证表达产物具有一定的生物学活性。建立了3株稳定分泌特异性抗LC3-ImAb的杂交瘤细胞株,诱导产生的腹水获得的抗体效价在10^5-10^7之间,结论：在E．coli中对LC3-I进行表达,并制备特异性较强抗LC3-I蛋白的单克隆抗体。为自噬研究提供了良好的标记分子,可对自噬形成和发展进行有效的检测。     

恶性疟原虫红内期cDNA库的组建及克隆的筛选

从体外培养的恶性疟原虫中分离纯化总mRNA,将其逆转录为cDNA,组入表达型载体λgt11,建立了恶性疟原虫中国海南岛分离株Fccl／HN红内期cDNA库。经大肠杆菌表达后用抑制性单克隆抗体M26—32、F6—c2、F6—D3筛选。杭有27个克隆与M26—32作用、34个克隆与M26—32和F6—C2都反应。对筛选结果进行了分析。这些阳性克隆的表达产物有可能作为疟疾疫苗的组成部分。     

冰雪灾害对江西九连山常绿阔叶林的影响

以江西九连山国家自然保护区常绿阔叶林为对象,研究林分不同层次优势种受灾程度,分析物种海拔、坡度对受灾程度的影响。结果表明:乔木上层和中层树木以断稍为主,乔木下层树木以断稍和腰折为主,小树和幼树以压弯为主。在平均受损指数MDI(Mean Damage Index)方面,乔木上层米槠MDI值最高,拟赤杨最低; 乔木中层鸭公树MDI值最高,浙江新木姜子最低; 乔木下层米槠MDI值最高,浙江新木姜子最低; 小树米槠MDI值最高,细枝柃最低; 幼树二列叶柃MDI值最高,狗骨柴最低。海拔对不同林分层次树木的部分受损指标有显著影响(P<0.05); 整体上,不同林分层次树木的受损指标在700～760 m海拔生境高于640～700 m海拔生境。不同坡度生境下树木的受损指标均无显著差异(P>0.05)。     

红系特异的GFP基因在转基因小鼠中的整合和表达

应用荧光定量PCR技术对由位点控制区LCR的HS2元件和 β 珠蛋白基因启动子指导的红系特异表达绿色荧光蛋白 (GFP)基因的转基因小鼠中外源基因拷贝数进行测定 ,使用荧光显微镜和流式细胞仪检测小鼠外周血中GFP的表达水平 ,并运用荧光原位杂交技术 (FISH)确定了其中两只转基因小鼠中外源基因的整合位点 ,结果表明 :在转基因小鼠中外源基因的拷贝数各不相同且相差较大 ,而且拷贝数与GFP基因的表达量之间未呈现出相关性 ;FISH分析确定出两只转基因小鼠的外源基因整合于不同的染色体上 ;杂交信号的强弱与拷贝数的多少相一致     

差异显示技术及植物发育基因的克隆

介绍了差异显示技术的原理和实验程序,及该技术在植物发育基因克隆上的具体应用。     

恶性血液病患者外周血淋巴细胞亚群变化及其临床意义的研究

目的: 探讨恶性血液病外周血淋巴细胞亚群变化特征及临床意义。方法: 采用流式细胞仪检测64例初诊的血液系统恶性肿瘤患者的外周血淋巴细胞亚群。病种包括急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)、急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma,HL)、非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkinlymphoma,NHL)。分析比较30例正常人的外周血淋巴细胞亚群与实验组的差异,并对64例恶性血液病患者中连续动态监测的21例急性白血病患者外周血淋巴细胞亚群结果变化与预后关系进行分析。结果： 不同成人恶性血液病患者年龄分组淋巴细胞亚群变化无明显差异;恶性血液病患者中CD3 ⁺CD8 ⁺ T淋巴细胞百分比、Treg细胞百分比均增加;CD16 ⁺/CD56 ⁺NK细胞百分比及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值均下降;CD3 ⁺T淋巴细胞数量、CD3 ⁺CD4 ⁺淋巴细胞数、CD3 ⁺CD8 ⁺淋巴细胞数量、CD3 ^-CD19 ⁺淋巴细胞数量、CD16 ⁺/CD56 ⁺NK淋巴细胞数量及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值均减少;急性白血病及恶性淋巴瘤患者外周血淋巴细胞亚群与正常对照组比较存在一定的差异;急性白血病未缓解组的Treg细胞比例明显高于急性白血病首疗程缓解组及对照组;急性白血病复发组Treg细胞比例明显高于急性白血病持续缓解组以及对照组;对21例急性白血病患者动态监测的淋巴细胞亚群发现,化疗缓解的患者Treg在化疗过程中逐渐下降,至第3~6个疗程逐渐接近正常对照,化疗未缓解的患者Treg细胞在化疗过程中逐渐上升或持续大于10%,明显高于完全缓解组,复发患者Treg在化疗过程中先下降后明显上升。 结论： 恶性血液病患者免疫功能显著低于健康人,且伴随免疫功能紊乱,且不同疾病类型、不同的疾病状态免疫紊乱的程度不一,Treg细胞比例可以用来预测急性白血病患者疗效及复发,可以为患者的临床治疗方案及用药强度提供指导依据。     

尿培养中病原菌分布及耐药性分析

目的研究大连市中心医院2007年1月至2012年9月尿培养中常见病原菌（真菌除外）的分布及其耐药性,为临床治疗尿路感染提供诊断及用药依据。方法采用MicroScan—Walkaway40全自动微生物鉴定药敏分析仪和ATBExpression自动细菌鉴定仪及K—B纸片法药敏试验,应用WHONET5．4软件对结果进行回顾性统计分析。结果五年间尿培养中共分离出病原菌1012株（真菌除外）,其中革兰阴性菌802株（79．2％）,主要是大肠埃希菌538株（53．2％）、肺炎克雷伯菌95株（9．5％）、铜绿假单胞菌51株（5．1％）、奇异变形杆菌30株（2．9％）、鲍曼不动杆菌26株（2．6％）。革兰阳性菌210株（20．8％）,主要是粪肠球菌86株（8．6％）,屎肠球菌83株（8．2％）,凝固酶阴性葡萄球菌21株（2．1％）,金黄色葡萄球菌13株（1．3％）。抗生素敏感试验中碳青霉烯类（亚胺培南及美洛培南）对肠杆菌科细菌大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌抗菌活性最强,无耐药菌株,对非发酵菌中铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌耐药率为30％～40％,革兰阳性菌对糖肽类（万古霉素、替考拉宁）和利奈唑胺等抗菌药物高度敏感。结论应当根据主要易感菌种类及其抗生素敏感试验结果指导临床合理使用抗生素。