定量分析丝氨酸/甘氨酸转换影响胃癌细胞增殖的动力学机制

目的 胃癌（GC）严重影响人类的健康生活,研究表明其与丝氨酸/甘氨酸代谢密切相关。丝氨酸/甘氨酸代谢对于肿瘤细胞的增殖能力具有重要影响。本文的研究目的是探究丝氨酸/甘氨酸代谢能够影响胃癌细胞增殖能力的分子机制。方法 本文通过一种基于随机和非梯度系统的势能景观所建立的大型代谢网络动力学建模方法,构建了一个稳定的胃癌细胞代谢动力学模型。基于对模型的调控,定量分析丝氨酸/甘氨酸代谢影响胃癌细胞增殖的动力学机制。对一般代谢网络动力学方程添加随机噪声,通过随机动力学分解得到代谢网络参数空间的李雅普诺夫（Lyapunov）函数。进一步减少与随机波动相关的Lyapunov函数变化,从而得到稳定的代谢网络。结果 在动力学参数不足的情况下,成功构建了胃癌细胞代谢网络的动力学模型。当胞外丝氨酸可用时,模型优先消耗丝氨酸;当甘氨酸生成丝氨酸的速率增加时,模型显著上调生成S-腺苷甲硫氨酸（SAM）和S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）的稳态通量。结论 本文证明了胃癌细胞对于丝氨酸的优先摄取以及丝氨酸/甘氨酸转化速率对SAM生成的重要作用,其可能通过调节细胞甲基化进程影响胃癌细胞的增殖能力,为靶向丝氨酸/甘氨酸代谢的癌症治疗提供了新的思路和方向。     

栽培红花山玉兰的传粉生物学

研究了栽培红花山玉兰（Ｍａｇｎｏｌｉａｄｅｌａｖａｙｉ）的开花生物学和传粉生物学特性,并探讨了红花山玉兰只开花而不结实的原因以及提高其结实率的技术措施。红花山玉兰的花被片为９,呈３轮排列。外轮花被片先张开,而内２轮花被片仍紧密地包裹着雌雄蕊群,约２４ｈ后,内２轮花被片才张开。在外轮花被片张开而内２轮花被片未张开时,柱头就有授粉能力,但雄蕊尚未成熟。因内２轮花被片紧密地包裹着雌雄蕊群而阻碍了传粉者进入花内传粉。当内２轮花被片张开时,雄蕊成熟,花药裂开而散发花粉;柱头外露,但此时的柱头已变棕红色,完全失去了授粉能力。若外轮花被片刚张开时,去掉全部花被片,蜜蜂可成为有效传粉者,其结果率可达到５３．３％;若去掉全部花被片,并施以人工异花授粉,其结果率可高达１００％。研究结果表明,红花山玉兰是雌雄异熟的,且异花授粉是亲和;其开花生物学特性适合甲壳虫携带花粉进入花内传粉。红花山玉兰只开花而不结实的原因可能是其开花生物学特性所要求的携带花粉进入花内传粉的甲壳虫无法进入花内传粉或者缺乏。     

麦双尾蚜发生数量与小麦播种期的关系

新疆伊犁和塔城冬、春麦田的麦双尾蚜Diuraphis noxia (Mordvilko) 有虫株率和百株蚜量,与小麦播种时间密切相关。在小麦正常播种期内,冬小麦晚播可以显著减少麦双尾蚜数量,每晚播种10天,第二年麦双尾蚜有虫株率可以下降40%～70%;春小麦每晚播种10天,麦双尾蚜有虫株率增加30%～88%。     

保水剂用量对小麦不同生育期根系生理特性的影响

在河南禹州试验基地进行田间试验,研究了保水剂不同施用量（0、30、60、90 kg·hm^-2）对两个冬小麦品种（郑麦9694和矮抗58）根系生理生化特征、生物量及产量的影响,以探明保水剂对不同生育阶段冬小麦根系的作用机理.结果表明：施用保水剂降低了冬小麦根系质膜透性和可溶性糖含量,提高了根系活力.在各生育期,郑麦9694根系质膜透性降低幅度均大于矮抗58;除90 kg·hm^-2处理外,矮抗58的根系活力均显著大于郑麦9694.在孕穗期和灌浆期,郑麦9694的可溶性糖含量降低幅度显著大于矮抗58.在各生育期内,60 kg·hm^-2处理的两品种质膜透性和可溶性糖含量均最小,90 kg·hm^-2与60 kg·hm^-2处理差异不显著.随保水剂用量的增加,郑麦9694的根系活力显著提高,而矮抗58 在60 kg·hm^-2处理下最高.施用保水剂还提高了小麦根系生物量,在拔节期和孕穗期,矮抗58的根系生物量大于郑麦9694;而在灌浆期,矮抗58在60 kg·hm^-2和90 kg·hm^-2处理下根系生物量显著低于郑麦9694.郑麦9694和矮抗58产量均以60 kg·hm^-2处理增幅最高.综上,保水剂对郑麦9694的作用效果较矮抗58显著,并以60 kg·hm^-2施用量为佳.     

电场中的蛋白质结晶

人们一直致力于寻求提高蛋白质晶体质量的方法,利用电场诱导蛋白质结晶即是诸多方法中的一种。已有文献报道显示,电场对蛋白质结晶的影响是积极的。我们从直流电场、交流电场、内置电场、外置电场对蛋白质结晶的影响及相关结晶设备,电场中生长的蛋白质晶体质量的评估,电场中蛋白质结晶的原理及影响因素等方面,对已报道的电场中的蛋白质结晶研究工作进行了总结。     

中国云粉蝶属分类研究(鳞翅目,粉蝶科)

系统地整理了中国云粉蝶属Pontia Fabricius,1807的全部种类,共3种12亚种,包括2新亚种:云粉蝶且末亚种Pontia edusa qiemoensis ssp.nov.、云粉蝶黑龙江亚种Pontia edusa heilongjiangensis ssp.nov.和2个中国新纪录亚种:箭纹云粉蝶卡洛亚种Pontia callidice kalora(Moore,1865)、绿云粉蝶青藏亚种Pontia chloridice alpina(Ver-ity,[1911]).阐述了各亚种的主要识别特征及其地理分布,提供了分种检索表及全部种类的雄、雌性外生殖器特征图,并附所有中国亚种的成虫彩色照片.模式标本保存在中国科学院动物研究所昆虫标本馆.     

杜仲光合特性的研究

杜仲（Ｅｕｃｏｍ ｍｉａ ｕｌｍ ｏｉｄｅｓＯｌｉｖ．）叶片的光饱和光合速率为６～１０ μｍ ｏｌＣＯ２·ｍ － ２·ｓ－ １,表观光合量子需要量最低约为１７。光合作用的ＣＯ２ 补偿点略大于１００ μｍ ｏｌＣＯ２·ｍ ｏｌ－ １,属Ｃ３ 型光合作用类型。其光合日变化有明显的中午降低现象,降低的原因除气孔限制外可能还有光抑制等其它因素。光合作用进行时光合产物只有约１４％ 输出叶片     

丙型肝炎病毒E1蛋白活化MAPK／ERK信号通路促进肝癌细胞增殖

目的研究丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus,HCV）编码蛋白E1的生物学功能。方法分别构建编码HCV重要蛋白E1、E2、NS3、NS5a、NS5b的腺病毒载体Ad—E1、Ad—E2、Ad—NS3、Ad—NS5a、Ad—NS5b;将重组并包装的腺病毒分别感染SMMC-7721细胞,测定感染滴度,通过RT—PCR方法在转录水平鉴定HCVE1、E2、NS3、NS5a、NSSb的表达,用Western印迹在蛋白水平鉴定E1蛋白的表达。腺病毒感染SMMC-7721细胞后,通过细胞增殖实验筛选生物学功能最明显的蛋白。将筛选到的Ad—E1感染SMMC-7721细胞,用MTS、结晶紫、细胞周期实验观察体外过表达E1蛋白对感染细胞增殖的影响;Western印迹检测p-ERK、ERK的表达;RT—PCR检测c—Myc、cyclinD1、c—Jun、c．Fos基因的表达。结果成功扩增了能够编码HCV重要蛋白E1、E2、NS3、NS5a、NS5b的高滴度腺病毒Ad—E1、Ad—E2、Ad—NS3、Ad—NS5a、Ad—NS5b,并且通过RT—PCR方法在转录水平鉴定了目的基因的表达,Western印迹方法在蛋白水平鉴定了E1蚩白的表达。通过细胞计数、MTS、结晶紫实验证实Ad—E1感染组细胞较对照组增殖速度加快,细胞周期显示Ad-E1感染组细胞34．38％处于S期,明显高于Ad—GFP（27．32％）（P〈0．05）对照组;Ad-E1感染绢p-ERK蛋白表达量增高,同时与细胞增殖相关的MAPK／ERK下游基因转录水平上凋。结论体外过表达HCVE1蛋白可以明显促进SMMC-7721细胞的增殖,其促增殖作用可能与MAPK／ERK信号通路的活化相关。     

阿帕替尼与白蛋白结合型紫杉醇在MDA-MB-231乳腺癌细胞系中的协同抗癌作用

目的阐明阿帕替尼 (apatinib)和白蛋白结合型紫杉醇 (nab-Paclitaxel)诱导MDA-MB-231乳腺癌细胞凋亡的分子机制。方法本研究以MDA-MB-231乳腺癌细胞为研究对象,并以apatinib和nab-Paclitaxel处理细胞后分组:0.1 %DMSO处理为阴性对照组;10 μmol/L apatinib处理组 (APA组);经5、10、15、20 nmol/L nab-Paclitaxel 处理组 (Nab-p 5组、Nab-p 10组、Nab-p 15组和Nab-p 20组);以及10 μmol/L apatinib分别与5、10、15、20 nmol/L nab-Paclitaxel 联合处理组 (APA+Nab-p 5组、APA+Nab-p 10组、APA+Nab-p 15组和APA+Nab-p 20组)。使用乳酸脱氢酶释放测定法测定apatinib和nab-Paclitaxel对MDA-MB-231细胞诱导的细胞毒活性,结合流式细胞术分析不同处理组细胞凋亡情况,通过JC-1染色法测定不同干预方式对MDA-MB-231细胞线粒体膜电位变化 (ΔΨ_m)的影响,借助FAM-FLICA荧光成像检测caspase-8和caspase-9 活性,通过彗星试验评估apatinib和nab-Paclitaxel对非致瘤上皮细胞株MCF-10A细胞DNA损伤的影响。两组之间独立样本t检验或单向ANOVA进行比较,多组之间使用Tukey事后检验。结果细胞毒性检测结果显示,与阴性对照组相比,Nab-p 20组MDA-MB-231细胞杀伤率在24 h时接近90 %;与单药处理组 (Nab-p 5组和Nab-p 10组)相比,APA+Nab-p 5组和APA+Nab-p 10组联合处理24 h和48 h后,分别检测到约85 %和95 %细胞死亡,差异均具有统计学意义 (P 均 < 0.001)。流式细胞术统计结果显示,与Nab-p5组和Nab-p10组相比,APA+Nab-p 5组和APA+Nab-p 10组24 h时MDA-MB-231细胞凋亡率(31.8 %±1.48 %、33.25 %±1.77 %比76.11 %±1.14 %、89.4 %±1.07%)升高 (P 均 < 0.05)。线粒体膜电位检测结果表明,与对照组相比,在单药处理组中,仅APA组和Nab-p 10组24 h时去极化细胞 (12.35 %±1.05%比78.33%±1.11%、46.74%±1.75%)增多;在联用处理组中,APA+Nab-p 5组和APA+Nab-p 10组24 h时去极化细胞 (68.47%±1.94%比90.03%±1.79%)增多,差异均有统计学意义 (P 均 < 0.05)。FAM-FLICA荧光成像结果显示,相较于单一处理组,apatinib和nab-Paclitaxel联用处理组的caspase-8和caspase-9蛋白高度活化。结合彗星试验分析,apatinib和nab-Paclitaxel 干预对MCF-10A非致瘤上皮细胞株DNA完整性没有显著影响。结论 apatinib/nab-Paclitaxel联用通过内源性的线粒体功能扰动和外源性的caspase激活诱导三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡,发挥协同抗癌作用。     

乙肝患者抗HBs独特型抗体特异性免疫复合物的检测与意义

根据用终浓度分别为35.0g/L和17.5g/L聚乙二醇沉淀循环免疫复合物,去除游离抗HBs-Ab_2,再以胰蛋白酶解离复合物的原理,建立了检测抗HBs-Ab_2-ICs的ELISA法。结果表明,38例急性乙型肝类和83例慢性活动性乙肝患者的IgG、IgM类抗HBs-Ab_2-ICs总阳性率分别为13.2％(5/38)和18.1％(15/83)。IgG、IgM类抗HBs-Ab_2-ICs检出率无显著差异(P>0.05)。实验证实乙肝患者体内存在含抗HBs-Ab_2-ICs。提示抗HBs-Ab_2尚可与抗HBs结合,抑制其中和HBV的作用而利于HBV复制。