Ribozyme抑制端粒酶活性的肿瘤基因治疗

针对端粒酶RNA组分模板区设计合成锤头状端粒酶核酶(teloRZ),构建了teloRZ基因体外转录质粒P^SPT19-teloRZ和真核表达质粒P^{XJ-neo-teloRZ}.用T₇/SP₆体外转录系统检测了teloRZ对端粒酶RNA组分的体外切割效率,达60%左右.用脂质体介导法, 将P^{XJ-neo-teloRZ}导入HeLa细胞和裸鼠移植瘤,结果使HeLa细胞端粒酶活性降至对照细胞的11%～12.5%, 细胞生长速度明显变慢,传至19～20代时出现95%凋亡.裸鼠移植瘤注射P^{XJ-neo-teloRZ} 14 d后,端粒酶活性下降69%,抑瘤率达62%.实验表明,该核酶可望成为有效的端粒酶抑制剂,在肿瘤治疗中发挥作用.     

受烤烟花叶病病毒侵染后叶中保护酶活性和超微结构的变化

研究受侵染程度不同的烤烟花叶病烟株叶中保护酶活性和超微结构的结果表明,病毒伤害烟株的原因之一是不能及时清除活性氧,导致活性氧和丙二醛积累,引起质膜伤害,最终导致超微结构破坏,烟株生长受抑制,生物量积累下降。据此认为,烟草花叶病防治,除了防除病源外,还应注意超微结构的保护和恢复。     

结构域相互作用数据库的产生、发展与应用

结构域是进化上的保守序列单元,是蛋白质的结构和功能的标准组件．典型的两个蛋白质间的相互作用涉及特殊结构域间的结合,而且识别相互作用结构域对于在结构域水平上彻底理解蛋白质的功能与进化、构建蛋白质相互作用网络、分析生物学通路等十分重要．目前,依赖于对实验数据的进一步挖掘和对各种不同输入数据的计算预测,已识别出了一些相互作用/功能连锁结构域对,并由此构建了内容丰富、日益更新的结构域相互作用数据库．综述了产生结构域相互作用的8种计算预测方法．介绍了5个结构域相互作用公共数据库3DID、iPfam、InterDom、DIMA和DOMINE的有关信息和最新动态．实例概述了结构域相互作用在蛋白质相互作用计算预测、可信度评估,蛋白质结构域注释,以及在生物学通路分析中的应用．     

Beagle犬血清与胎牛血清生化特性及其对体外培养的人肺癌细胞生长的影响

目的比较Beagle犬血清与胎牛血清生化特性,探讨它们对体外培养的人肺癌细胞生长的影响。方法收集、制备Beagle犬血清与胎牛血清,采用全自动血液生化分析仪测定23项血清生化指标,比较分析两组血清生化特征差异。取对数期人肺癌细胞QG-56,分别培养于含10%FBS或Beagle-S的RPMI-1640合成培养基中,于第0、24、48、72、96、120和144 h各取出一块培养板进行检测,观察不同血清对细胞生长MTT曲线、细胞形态学的影响。结果FBS中CK、CK-MB、LDH、HBDH、GGT水平明显高于Beagle-S（P〈0.05）;CHE水平却明显低于Beagle-S,两者之间比较,均具有显著统计学意义。血清中的BUN、CRE、GLU、TP、ALB、ALT、ALP、TBIL、DBIL、TG、K^＋、Na^＋、Cl^-、Ca^2＋、Pi^3-水平在Beagle犬与胎牛间无显著性差异。MTT曲线和细胞形态学观察,两组于干预后24、48、72、96、120、144 h对QG-56细胞株生长的影响无显著性差异（P〈0.05）。结论Beagle犬的血清生化特性及其对体外肺癌细胞生长的影响与胎牛相似,可作为血清药理研究的优选动物之一。     

实时荧光定量PCR技术及其应用

实时荧光定量PCR技术是一种多色荧光检测核酸定量技术,该简要介绍实时荧光定量PCR技术的原理及其应用。     

金柚贮藏真菌病害及保鲜技术研究

1998年5月-2000年10月间调查了梅州柚果贮藏期的真菌病害,它们是:①柚果绿霉病(Penicilliumdigitatum),②柚果炭疽病(Collettrichumgloeosporioides),③柚果黑腐病(Alternariacitri),④柚果焦腐病(Diplodianatalensis)和⑤柚果酸腐病(Oosporacitri-aurantii)等5种.从几种安全性高的保鲜剂中筛选出1个混用配方,该配方对柚果贮藏防腐保鲜效果明显,贮藏5个月无病斑果达100%,6个月也只有20%的柚果出现少量病斑,且柚果几项质量指标较好.     

HMBA诱导人肝癌SMMC—7721细胞分化的观察

In this paper, the effects of HMBA on the differentiation of human hepatocarcinoma cell line SMMC-7721 were investigated. After treated with 5 mmol/L HMBA, the proliferation of SMMC-7721 cells was inhibited remarkably, the cell growth inhibitory rate amounted to 64.14%, the cell mitotic index was declined by 53.88%. Light microscopy and transmission electron microscopy showed that the morphology and ultrastructure of the cells treated with HMBA undergone restorational alteration. Cytochemistry and immunocytochemistry assay revealed that the activities of gamma-GT declined and the levels of AFP and PCNA downregulated while the activity of TAT increased significantly after HMBA treatment. In the meantime, flow cytometry analysis showed that HMBA could arrest the cells in G0/G1 phase. The results showed that HMBA could effectively inhibit the proliferation, reverse the malignant morphology and ultrastructure, alter the levels of enzymes and antigens, arrest the cells in G0/G1, and induce the differentiation of human hepatocarcinoma SMMC-7721 cells in vitro.     

几丁质酶的三级结构和催化机制

几丁质酶广泛存在于各种生物中 ,包括含有其底物 (几丁质 )的真菌、昆虫等生物中 ,也存在于不含几丁质的植物中。因而它在各种生物中有不同的作用。细菌产生几丁质酶可以分解几丁质物质而获得营养 ;真菌中几丁质酶在其细胞分裂和形态建成等方面发挥着作用 ;昆虫等节肢动物中几丁质酶在它们的蜕皮等生长发育中起着重要作用 ;植物以及高等动物的几丁质酶可能主要在于防御病原物的侵染。近来 ,由于几丁质酶在抗真菌中的作用而备受关注。几丁质酶根据其氨基酸序列的同源性被分成 1 8和 1 9两个家族。1 8家族广泛存在于各种生物中 ,而 1 9家族大…     

基于PC/Linux的核酸序列分析系统的构建及其应用

基于PC机和Linux操作系统, 利用Phred/Phrap/Consed软件和Blast软件, 构建了核酸序列大规模自动分析系统. 该套系统可自动完成从测序峰图向核酸序列的转化、载体序列去除、序列自动拼接、重复序列鉴定以及序列的相似性分析, 可加速对大规模测序数据的分析和利用.     

植物几丁质酶的结构与功能、分类及进化

近年来对几丁质酶的研究越来越深入,资料也愈来愈多。有的植物几丁质酶除具有几丁质酶活性,还具有其它的活性。典型的几丁质酶由N_端信号区、催化区和C_端延伸区组成,有的还有几丁质结合域。各功能域具有各自的功能。对植物几丁质酶的分类已经过多次改进,目前公认的是分成4组9个亚组。有证据表明植物几丁质酶在进化过程中有遗传转座现象,但具体进化过程还有待进一步确证。对几丁质酶与其它一些蛋白的关系的了解有助于理解几丁质酶的起源和进化。由于几丁质酶具有独特的抗真菌特性,因而几丁质酶基因成为目前抗真菌基因工程研究的热点之一。