自剪切多肽P2A对自然杀伤细胞的高效诱导扩增作用的研究

目的改进现有过继性人自然杀伤（NK）细胞体外诱导、分化及扩增方法,实现高效定向分化及大量扩增NK细胞的目的。 方法利用自剪切多肽P2A连接IL-15和4-1BBL基因,通过慢病毒感染和药物筛选的方法制备稳定表达IL-15和4-1BBL的K562滋养层细胞株。该方法可刺激人PBMC细胞向NK细胞分化及高效增殖。实验结果以 ±s表示并用两样本t检验进行比较。 结果经该方法培养的CD3^- CD16⁺ 56⁺ NK细胞增殖倍数达到（4480.43±37.80）倍;CD3^- CD16⁺ 56⁺ NK细胞纯度达到94.79%;细胞内表达IFN-γ和TNF-α的NK细胞比例为（63.07±3.37）%和（54.85±2.04）%,分别高于对照组（16.28±2.86）%和（14.53±1.15）%（t = 62.25,22.66,P均< 0.01）;细胞分泌至培养上清液中的IFN-γ和TNF-α浓度为（111.39±6.95）?pg/ml和（32.76±3.23） pg/ml,分别高于对照组（44.99±4.74）pg/ml和（11.09±2.45）?pg/ml（t = 20.56,7.21,P均< 0.01）;在体外,该方法培养的NK细胞对K562细胞的杀伤效率为（78.52±7.36）%,高于对照组（48.53±6.66）%（t = 11.56,P < 0.01）;对H520细胞的杀伤效率为（65.03±3.27）%,高于对照组（35.85±3.99）%（t = 11.35,P < 0.01）。 结论利用自剪切多肽P2A构建稳定高表达的IL-15和4-1BBL的K562滋养层细胞株,从而提高了NK细胞增殖倍数、纯度和细胞毒性。     

先天性白内障大鼠血液生化及血液流变学分析

目的：测定先天性白内障大鼠血液常规、生化正常值及血液流变学变化。方法采用XS-800i血常规分析仪和OLYMPUS AV2700生化自动分析仪对185～211 g大鼠共计90只进行血液常规和生化检测及用SA-6600自动血流变测试仪对血液进行流变学的测定。结果血像检测结果是白内障与正常对照同性比较无差异显著性（P ＞0.05）;小眼白内障与正常对照同性比较红细胞宽度（RDW）间差异显著（P ＜0.01或 P ＜0.05）。血生化检测结果是白内障大鼠与正常对照组同性间比较白蛋白（ALB）差异显著（P ＜0.01或P ＜0.05）雌性与对照组比较尿素（Ure）差异显著（P ＜0.01）,小眼白内障雌性与正常对照比较肌酐（Cr）差异非常显著（P ＜0.01）。白内障、小眼白内障大鼠的红细胞是雄性的低于雌性（P ＜0.05,P ＜0.01）而血小板是雄性的高于雌性（P ＜0.01）,肌酐是雄性低于雌性P ＜0.01）,正常组雄雌间无差异;血液流变学各组间无差异显著性。结论白内障大鼠与正常组大鼠间某些血常规及生化指标有一定的差异,该数据为该鼠在这领域的使用提供参考。     

GFP在绿色荧光裸鼠不同组织中的表达及分析

目的研究外源绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,简称GFP）基因在BALB/c绿色荧光裸鼠主要器官组织中的表达及其差异。方法小动物成像系统和RT-PCR方法检测GFP的组织分布以及荧光表达水平情况。结果经活体荧光影像系统观察及PCR方法检测发现GFP可以在裸鼠多个器官组织中表达,其中在胰腺、心脏、全脑、皮肤、睾丸中表达量较高。结论外源绿色荧光蛋白可以在模型动物体内成功表达且稳定遗传,其中在胰腺组织中高表达。     

秦芄挥发性成分研究

目的:研究秦芄(Radix Centianae Macrophyllae)中的挥发性成分.方法:利用水蒸气蒸馏法提取秦芄挥发油,用GC/MS进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量.结果:分离出8个组分,鉴定出7个化学成分.检出率为91.40%.秦艽挥发性成分大于1%的分别确定为萜品烯-4-醇1.224%,(E,E)-2,4-癸二烯醛1.295%,棕榈酸乙酯32.009%,棕榈酸54.608%.结论:首次报道了用GU/NS对秦艽挥发性成分的研究,为该类植物的研究开发提供必要的试验数据.     

国产奥西康与进口洛赛克治疗消化性溃疡出血的临床观察

目的:对比国产与进口奥美拉唑注射治疗消化性溃疡出血的临床效果。方法:按照电脑产生的随机数列将2013年4月至2015年5月期间在我院消化科接受治疗的118例患者随机分为2组各59例,对照组给予进口药物洛赛克进行治疗,研究组给予国产药物奥西康进行治疗,两组均连续治疗7天,比较胃肠道反应、头晕及心悸发生率,平均治疗时间,以及临床治疗效果,另外分析两组患者的治疗成本。结果:研究组患者胃肠道反应、头晕及心悸发生率以及平均治疗时间与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);两组治疗效果经过秩和检验整体差异无统计学意义(P0.05),且治疗总有效率相当(96.61%vs 94.91%),差异无统计学意义(P0.05);使用国产药的成本低于进口药物。结论:国产奥西康与进口洛赛克治疗消化性溃疡出血临床疗效无明显差异,均能有良好的治疗效果,但其经济性更好。     

广东大亚湾六种海洋刺钩类纤毛虫的形态学研究

利用活体观察及银染法首次对采自广东大亚湾沿岸的盐菲阿虫Phialina salinarum Kahl,1928,海洋长吻虫Lacrymaria marina Kahl,1933,惊扰伪颈毛虫Pseudotrachelocerca trepida(Kahl,1928)Song,1990,贪食纤口虫Chaenea vorax Quennerstedt,1867,柱核柱毛虫Cyclotrichium cyclokaryon Meunier,1907和加冈栉毛虫Didinium gargantua Meunier,1910六种刺钩类纤毛虫进行了形态学研究,补充了活体形态学以及纤毛图式等分类学新信息。首次观察到了海洋长吻虫体纤毛基部的皮层颗粒和柱核柱毛虫大亚湾种群较青岛种群具有更多的体动基列等若干新信息。研究表明,刺钩类纤毛虫在大亚湾近岸水域具有较高的物种多样性。       

生物素生物合成的研究

综述了大肠杆菌、球形芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌中生物素生物合成操纵元基因的结构、转录和表达、基因的特点和作用,以及实验室条件下生物素操纵元的表达情况,并对宿主菌的生长抑制现象作了概述。     

花生四烯酸高产菌株的选育

本研究以一株能产生花生四烯酸的被孢霉菌为出发菌株,通过紫外线诱变筛选出一株高产花生四烯酸的突变株Ｍ１０,发酵试验结果表明：突变株Ｍ１０的每升培养液中干菌体得率为３１ｇ,油脂含量为８．３ｇ,而原菌株仅为２０．３ｇ和５．４ｇ,气相色谱分析结果Ｍ１０所产花生四烯酸的量占总脂的１０．０６％（０．８３ｇ／Ｌ培养液）。同时对Ｍ１０菌株的生长和发酵特性及发酵过程中菌丝体形态变化作了一定的探讨。     

不同发育期反枝苋对黄瓜根缘细胞的化感作用

以黄瓜为实验材料,采用悬空气培养法研究了不同发育期反枝苋水浸提液对根缘细胞的化感效应.结果表明:在反枝苋水浸提液作用下,黄瓜根果胶甲基酯酶(PME)活性升高,但随着水浸提液浓度的升高,这种促进效应逐渐降低;而黄瓜根缘细胞存活率随着水浸提液浓度的升高而下降.相同发育期反枝苋不同部位的化感作用差异不显著,不同发育时期反枝苋化感作用差异较为明显,其化感作用以幼苗期最强,现蕾期次之,成熟期最弱.推测化感作用是反枝苋发育初期取得竞争优势,迅速占领生态位的原因之一.