金黄色葡萄球菌核酸酶基因的片段缺失与定点突变

金黄色葡萄球菌核酸酶R(SNase R)是金黄色葡萄球菌核酸酶(SNase A)的一种类似物,具有与SNaseA相同的酶活性,与SNase A唯一不同之处是在N端多出6个氨基酸残基。为了得到完整的SNase基因并使其在E.Coli中表达,我们利用单链U模板—单引物突变法,将为6个额外氨基酸残基编码的18个氨基酸残基删除,其突变率可达90％。进而,完整的SNase A基因被重组入表达载体pBV221。细菌表达产物的PAGE分析结果指出,SNase A在E.coli中得到高效表达。与此同时,我们利用两个不同的引物在单链U模板上同时介导两种不同类型的突变(片段缺失、碱基取代)其突变率可达83％以上,这为进行多种类型的高效突变提供一个有用的方法。本文也对影响突变率的某些实验因素进行了讨论。     

药用真菌灵芝液体培养过程中的抗氧化活性研究

灵芝Ganoderma lingzhi是一种重要的药用真菌,已被《中国药典》正式收录。本研究主要以菌丝体干重、多糖含量、多酚含量、黄酮含量、抗坏血酸（ascorbic acid,AA）含量、总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力、2,2′-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)[2,2′-azino-bis(3- ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid),ABTS]自由基清除能力、铁离子还原能力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）和亚铁离子螯合能力为测定指标,对灵芝液体培养过程中的抗氧化活性进行了评价。结果显示,该菌具有较高的抗氧化活性,体现在液体培养过程中生长代谢旺盛,可分泌大量多糖、多酚、黄酮、AA等物质和SOD等酶类,对羟自由基、超氧阴离子、DPPH自由基及ABTS自由基等的清除效果显著,且具有较强的铁离子还原能力和亚铁离子螯合作用,这也说明该菌的抗氧化活性与其自身的生长状况、次级代谢产物分泌及还原能力等密切相关。此外,一定的环境胁迫压力也可以激发该菌启动自身的抗氧化系统以保护机体免受氧化损伤。     

金黄色葡萄球菌核酸酶N末端片段的折叠研究

采用一维１ＨＮＭＲ谱和二维１ＨＮＯＥＳＹ谱对金黄色葡萄球菌核酸酶Ｎ末端片段ＳＮＲ１２１与ＳＮＲ１３５进行了定性研究。通过对化学位移分布、ＮＯＥ等ＮＭＲ参数进行的分析,指出两个Ｎ末端片段均含有一定数量的二级结构。在ｐＤ值为５．４时ＳＮＲ１３５即有稳定的反平行β片层存在,而ＳＮＲ１２１只是在ｐＤ７．０下才可观察到稳定的反平行β片层的存在。本文同时还研究了ｐｄＴｐ、Ｃａ２＋以及胍对ＳＮＲ１２１结构的影响,指出该肽段仍具有折叠回天然状态的能力。     

三种植物提取物对菟丝子及大豆生长发育和宿主保护酶活性的影响

利用不同浓度的苦楝树皮和叶、隆缘桉叶和乌桕叶的乙醇提取物对菟丝子及其宿主大豆幼苗进行处理,15d后评价三种提取物对菟丝子和大豆幼苗的影响。结果表明:三种提取物在低浓度时对菟丝子及其宿主大豆幼苗生长发育均无显著影响,在高浓度(0.25g/mL)下,桉树叶提取物对大豆和菟丝子的损伤程度分别达到了64%和70%,苦楝树皮提取物对菟丝子损伤程度为78%,但对大豆幼苗仅为7%。桉树叶和苦楝树皮提取物处理均导致大豆叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性升高,最高值分别为相应对照组的2.37倍和2.0倍;但对过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响不同,桉树叶提取物使大豆幼苗POD活性最大值为对照组的2.28倍,而苦楝树皮提取物处理则是CAT活性升高,最大值为对照组的1.58倍,提示桉树叶提取物对大豆较强的伤害作用与其较低的CAT活性有关。     

苦玄参甙A和B的结构(简报)

<正> 从苦玄参(Picria fel-terrae Lour.)抗癌有效的B部分,分离出二种新四环三萜甙,称苦玄参甙A和B(Picfelterraenin A和B)。经元素分析确定其分子式为C_(41)H_(62)O_(13)和C_(42)H_(64)O_(14)。二者的IR均有羟基(3420cm~(-1))、羰基(1685cm~(-1))、与羰基共轭的双键(1585cm~(-1))及强的C—O伸缩振动吸收峰(1160—950cm~(-1))。二者     

十齿花属分类地位的研究

本文对过去认为与十齿花属近缘的科,属的形态,木材解剖,花粉形态等方面的特征进行了较全面的比较研究。结果支持最初作者置于卫矛科的意见,并建立十齿花亚科,置于卫矛亚科和雷公藤亚科之间。滇西北产者订为一所种。     

龙鹿丸联合来曲唑对多囊卵巢综合征不孕症患者性激素、Th1/Th2免疫失衡和临床结局的影响

摘要 目的：探讨龙鹿丸联合来曲唑对多囊卵巢综合征（PCOS）不孕症患者性激素、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2（Th1/Th2）免疫失衡和临床结局的影响。方法：选择2020年4月~2023年4月期间在湖南省妇幼保健院接受治疗的135例PCOS不孕症患者。采用双色球法将患者分为对照组和联合组,分别为67例和68例。对照组接受来曲唑治疗,联合组接受龙鹿丸联合来曲唑治疗。对比两组疗效、性激素指标[雌二醇（E₂）、促卵泡激素（FSH）、孕酮（P）和黄体生成素（LH）]、Th1/Th2免疫失衡相关指标[干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）和Th1/Th2]、临床结局和安全性。结果：与对照组相比,联合组临床总有效率更高（P<0.05）。治疗后,联合组E₂、FSH、P高于对照组,LH低于对照组（P<0.05）。治疗后,联合组IFN-γ、IL-4、Th1/Th2低于对照组（P<0.05）。联合组的排卵率、妊娠率高于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比未见差异（P>0.05）。结论：PCOS不孕症患者采用龙鹿丸联合来曲唑治疗,可通过更好地改善性激素水平和提高抗病能力来改善其临床结局。     

蚯蚓纤溶酶组分的分离纯化和分析

通过以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基的亲和层析,从蚯蚓（大平二号, 即赤子爱胜蚓）纯化出的纤溶酶是一组非均一的纤维蛋白水解酶.经DEAE-纤维素离子交换和制备电泳进一步分离纯化,得到12个单一组分. 这些组分的等电点(pI)按照它们在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)图谱上的顺序从4.0开始依次降低; SDS-PAGE证明, 除3、4外,其余组分均只含一种多肽链,分子质量在22～34 ku之间;用shiff试剂和酚-硫酸染色, 显示1、2、6.5和7是糖蛋白,其中7的糖含量最高; 以BAEE、Chromozym UK和Chromozym PL为底物测定,7的纤溶酶活性最高.     

微生物酶不对称水解合成S(+)-布洛芬的研究 Ⅰ.高度立体选择性菌株的筛选

从361株细菌和酵母菌中分别筛选到12株可不对称水解布洛芬乙酯生成R(-)-布洛芬的细菌(5株菌对映体过量(ee)可达85%)和15株具有不对称水解布洛芬乙酯活性的酵母菌,其中皮状丝孢酵母T158生成S( )-布洛芬,ee可超过92%.该酵母菌最适碳源为葡萄糖,浓度以1.0—1.5%适宜,蛋白胨浓度低于0.3%或高于0.5%对水解拆分均不利.酵母膏的加入显著提高水解活性,最适浓度0.3%.在培养基中添加表面活性剂吐温80(0.2%)既可提高拆分专一性,又能增强水解能力.