西妥昔单抗联合低温热疗诱导CNE细胞凋亡的研究

目的:观察西妥昔单抗联合低温热疗诱导人鼻咽癌细胞株CNE凋亡的效果,并初步探讨其可能的机制.方法:试验分对照组、单靶组、单热组及热靶组,MTT法测定西妥昔单抗对CNE细胞株48h20～30%抑制的药物浓度;以该浓度药物与低温热疗(43℃,30分钟)联合,Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞术检测24h、48h凋亡率;Western blot检测Bax、Bcl-2、EGFR蛋白的表达.结果:以48h20～30%抑制率的药物浓度(IC20～30)为试验的工作浓度,确定西妥昔单抗对CNE细胞株的工作浓度为10 ug/ml;荧光染色法观察到热靶组CNE细胞发生典型的凋亡形态学改变;流式凋亡检测显示24、48 h热靶组凋亡率显著高于相应单靶组、单热组及对照组(P＜0.05). western blot检测显示各处理组较之对照组都有上调Bax、下调Bcl-2、EGFR蛋白表达的作用,以热靶组最为显著(P＜0.05);热疗后EGFR蛋白表达逐渐下调.结论:西妥昔单抗联合低温热疗能显著增加CNE细胞的凋亡率,这可能与EGFR的下调与受抑,进而上调Bax、下调Bcl-2蛋白的表达促进凋亡有关.     

PMSG、E_2、PGF_(2α)和hCG组合处理对初情前蓝狐卵巢和子宫的影响

为了完善提高狐狸繁殖效率的超排技术,探讨了用PMSG、E2、PGF2α和hCG的不同组合处理对诱发初情前雌性蓝狐发情及其对卵巢和子宫发育的影响.EPP组(E2、PMSG和PGF2α组合)和EPPh组(E2、PMSG、PGF2α和hCG组合)分别有2只和3只发情,而对照组未见发情;EPP和EPPh组卵巢指数和有腔卵泡百分率显著高于对照组(P<0.05),而初级卵泡所占百分率则显著低于对照组.此外,EPPh组次级卵泡所占百分率与对照组相比显著降低(P<0.05);当用EPP和EPPh法处理雌性蓝狐后,子宫指数、子宫壁和子宫内膜厚度显著高于对照组(P<0.05).结果 表明,EPP和EPPh处理不仅具有诱发雌性蓝狐发情的功效,而且能够提高初情前雌性蓝狐卵巢指数和增加有腔卵泡数量.     

化学切割重组融合蛋白制备人胸腺肽β_4

目的：在大肠杆菌中表达人胸腺肽β4（Tβ4）的融合蛋白,通过CDAP介导的化学切割将融合部分切除,获得人Tβ4。方法：分别以质粒pET-Tβ4和pET-L12为模板,扩增Tβ4和核糖体亚基蛋白L12的基因片段,再以这2段基因为模板进行重叠PCR,并在连接处引入一个半胱氨酸（Cys）密码子,将得到的融合蛋白Tβ4-Cys-L12基因片段与pET-22b载体连接,构建表达质粒,将其与N-末端乙酰转移酶质粒共转化至大肠杆菌BL21（DE3）并共表达,获得N端乙酰化修饰的融合蛋白Tβ4-Cys-L12;利用CDAP氰基化Cys的巯基,于pH10.0条件下在Cys残基N端完成切割,分离纯化获得Tβ4。结果：质谱分析目的产物相对分子质量为4962.70,与天然Tβ4一致,表明获得了Tβ4。结论：CDAP介导的化学法可以有效切割融合蛋白获得Tβ4,建立了一套Tβ4的生物制备方法。     

GSK公司和Merck公司的轮状病毒疫苗Ⅲ期临床试验获得理想结果

轮状病毒是引起幼儿以及小儿腹泻关联疾患甚至导致死亡的主要原因之一。当务之急是需要开发安全而且有效的疫苗。英国GlaxoSmithKline公司（GSK公司）和美国Merck公司各自开发的轮状病毒疫苗（“Rotarix”和”ROTATEQ“）Ⅲ期临床试验的结果都证实了各自的有效性和安全性。这两项试验结果都发表在New England Jounral of Medicine杂志2006年1月4日号上。     

血液因素对龈下菌斑BANA试验结果的影响

目的检测血液因素对慢性牙周炎龈下菌斑BANA试验敏感性、稳定性的影响。方法将不同血液成分及混有健康人血的牙龈卟咻菌菌液分别进行BANA试验。结果各检测稀释滴度的全血、冻融全血、血浆样本BANA试验反应均为阴性;当全血各稀释梯度中牙龈卟啉菌菌量大于10^5时反映结果呈现为BANA试验阳性,胰蛋白酶样酶A600nm值均大于0．20。结论BANA试验的敏感度并不受血液成分混入的影响而降低,证实试验具有较好的稳定性。     

液相BANA试验检测口腔关键厌氧菌方法的建立

目的建立液相苯甲酰精氨酸萘酰胺(简写BANA)水解试验快速检测牙周病关键厌氧菌的新技术。方法利用牙周病相关关键微生物可产生胰蛋白酶样酶使人工合成的酶底物———BANA水解的原理检测这些重要口腔厌氧菌。结果BANA试验可检测出8.0×105以上的牙龈卟啉菌,特异性良好、不受标本采集中血污染的影响;71.88%活动期牙周炎龈下菌斑BANA试验阳性,4%的健康人龈下菌斑BANA试验阳性。结论BANA试验可望成为牙周病诊断新的辅助指标。     

成品矫形器矫正先天性肌性斜颈术后残留畸形的效果

目的:探讨应用成品可调式斜颈矫形器矫正先天性肌性斜颈术后残留畸形的效果.方法:成品可调式斜颈矫形器分大、中、小号,且每种型号还可以调节大小和角度.应用对象选择年龄2～18岁手术后仍有明显斜颈畸形患者25例,配戴该矫形器2～6个月,最长12个月,随访1～2年.结果:按疗效标准判定,优20例(80%),良4(16%),尚可1例(4%),均无复发.结论:本矫形器配戴快捷、固定确切、可靠、轻便,具有可调节性,不需取模制作,适用于先天性肌性斜颈术后患者,可明显提高矫形效果.     

揭示植物在黑暗中变绿之谜

<正>东京大学生命科学院、立命馆大学生物科学与应用生物学、名古屋大学生物科学研究院以及大阪大学蛋白质研究所的研究人员共同合作,阐述了光独立的原叶绿素酸脂还原酶(Pchlide)X射线晶体结构,揭示了植物在黑暗中变绿之谜。该文章4月18日发表于《Nature》网络版,5月6日刊登在《Nature》杂志上。     

影响草地早熟禾（Poa pratensis L.）基因枪转化关键因素研究

将含有DREB1A基因的表达载体,通过基因枪法转化草地早熟禾的胚性愈伤组织,探讨了金粉沉淀剂、金粉直径等因素对转化的影响,同时通过不同浓度潮霉素（Hygromycin,简称Hy）对未转化愈伤组织的筛选,获得最佳筛选浓度。结果表明,适合于草地早熟禾基因枪轰击的条件为：Ca（NO3）2＋PEG4000包被质粒DNA;1μm金粉作为质粒DNA的载体;合适的轰击高度为6cm、轰击次数为1次、无渗透处理。采用Hy作为草地早熟禾转基因植株抗生素筛选标记时,Baron品种愈伤组织继代的临界筛选浓度为100mg/L。     

国内重要抗源品种水源11、水源92及Hybrid46抗条锈基因关系分析

小麦著名抗源品种水源11、水源92及Hybrid46在我国小麦抗病育种中发挥了重要作用,为了明确其抗锈 遗传规律,研究用条中29号及其弱株突变系CY29-mut3,分别接种这3个品种的双列杂交F2、F3代各株系幼苗。结果表明,水源11、水源92与Hybrid46所含抗条锈基因不同,而同来自朝鲜的品种水源11、水源92可能含相同的或完全连锁的抗条锈基因。水源92有3对基因抗中国条锈小种,且不同小种及细胞质对基因表达都有影响,水源92为父本时分别对CY29-mut3及条中29号小种有3对显性基因起抵抗作用（其中两对基因表现为累加作用）;而当水源92为母本时分别对CY29-mut3及条中29号小种有1对完全显性基因和两对隐性基因表达抗病作用。国际已知基因品种Hybrid46为母本时对CY29-mut3有两对基因起作用（可能是两对隐性基因,也可能是存在累加作用的两对显性基因）,而对CY-29小种有3对独立遗传的显性基因表达抗病作用。