魔芋DNA快速微量提取及其ISSR-PCR扩增

魔芋属天南星科魔芋属草本植物,其组织富含多糖和多酚等次生物质,这类物质的存在不仅使DNA提取变得困难,还会影响下游的分子生物学操作.采用改进的提取方法,主要包括在2 mL Eppendorf离心管中液氮研磨,CTAB-SDS裂解细胞,β-巯基乙醇浓度从2%提高到5%和添加PVP抑制多酚氧化,缓冲液去多糖等步骤,成功的提取了魔芋鲜叶的高质量DNA,其A260/A280位于1.80～2.00之间,产率超过470 μg/g,ISSR-PCR扩增效果好.该方法具有快速、低廉、微量、稳定等特点,为深入研究魔芋资源遗传多样性、标记辅助育种和种芋纯度的鉴定奠定了基础.     

丛枝菌根真菌对烟草香气相关物质代谢的影响

丛枝菌根(AM)真菌能够与植物共生,促进寄主植株营养元素的吸收,提高植株抗逆性,但鲜见其对香气物质代谢作用的报道。本试验研究了AM真菌摩西球囊霉对烟草叶片腺毛和香气相关物质代谢的影响。结果表明: 接种AM真菌能够增加烟草叶片腺毛的密度,并诱导烟草叶片腺体毛状体脂质分泌所必需的腺体特异性脂质转运蛋白基因(NtLTP1)表达量增加;提高香气相关物质绿原酸、茄尼醇和类胡萝卜素含量;同时促进了香气物质合成途径中关键酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)和多酚氧化酶(PPO)活性;诱导香气相关物质代谢关键酶苯丙酰胺转氨酶和多酚氧化酶基因NtPAL和NtPPOE,以及黄酮醇合酶和角鲨烯合酶基因NtFLS和NtTSS表达上调。说明接种摩西球囊霉能够增加香气产生部位腺毛的数量和分泌活性,并促进烟草叶片香气物质的生物合成过程。     

锁骨骨折内固定失效的原因分析及对策

目的：探讨锁骨骨折切开复位内固定术后内固定失效的原因,并寻找补救方案。方法：选择我院2007年5月~2010年5月收治的184例锁骨骨折患者,其中男性123例,女性61例,年龄24~76岁,对手术切开复位内固定失败病例的内固定方法进行对比,分析内固定失效的原因,并选取记忆合金环抱器或天鹅型记忆接骨器作为再次手术的内固定器械,分析其临床疗效。结果：本组所有病例均获得6~24个月随访,所有患者首次手术均行钢板内固定治疗,其中应用重建钢板治疗48例,解剖钢板治疗86例,锁骨钩钢板治疗50例,3例术后发生钢板或螺钉断裂患者选用记忆合金环抱器重新手术内固定治疗,2例痊愈,1例记忆合金环抱器再次发生断裂,改用天鹅型记忆接骨器治疗获得痊愈。3例骨不连患者均选择天鹅型记忆接骨器配合植骨内固定治疗,术后恢复良好。结论：锁骨骨折切开复位内固定术后内固定失败的原因主要与所使用内固定技术不合理及患者早期不正确的功能锻炼有关。记忆合金环抱器和天鹅型记忆接骨器均可作为钢板内固定失败术后的补救方案,但天鹅型记忆接骨器较记忆合金环抱器可提供更好的纵向加压作用,治疗钢板断裂及骨不连患者更为可靠。     

单克隆抗体MGd1 对胃癌SGC-7901 细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究不同浓度的MGd1对体外培养胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT法测定不同浓度MGd1对SGC-7901生长抑制作用;流式细胞术(FCM)进行细胞凋亡分析。激光共聚焦显微镜观察MGd1抗原(MGd1-Ag)的亚细胞定位。结果:MTT结果显示不同浓度的MGd1均对SGC-7901细胞产生明显的抑制效应(P=0.02);流式细胞术分析发现MGd1可诱导SGC-7901发生凋亡并呈浓度和时间依赖性(P<0.01);共聚焦显微镜结果显示MGd1-Ag主要定位于细胞膜上。结论:以上结果证实胃癌特异性单抗MGd1可抑制SGC-7901的增殖并促进凋亡发生。它可能通过与细胞膜上抗原特异性结合,影响下游信号传导,从而发挥抑制效应。     

LaminB1蛋白在食管鳞癌组织中表达的形态学观察

目的探讨laminB1蛋白在食管鳞癌患者的癌组织及上切缘正常粘膜上皮中表达的形态变化。方法制备组织切片原位核基质,应用免疫组化的方法检测核基质制备前后正常粘膜上皮及癌组织中laminB1的表达;同时提取组织核基质蛋白,应用Westen blot检测核基质蛋白中laminB1的表达。结果正常食管粘膜上皮及食管鳞癌组织核基质制备前后laiminB1表达的阳性率分别为:正常粘膜上皮93.3%、正常粘膜上皮核基质86.7%、癌组织96.7%、癌核基质86.7%。正常粘膜上皮laminB1表达阳性细胞从基底层至颗粒层逐渐减少,制备核基质后正常粘膜上皮核基质laminB1表达阳性细胞数目减少、强度明显减弱,阳性细胞集中于基底层,多数细胞整个胞核着色。癌组织laminB1表达阳性细胞散在分布,无规律;癌核基质laminB1表达阳性强度减弱,阳性颗粒在核周较集中。癌核基质laminB1表达的阳性强度比正常粘膜上皮核基质高,差异有显著性(x2=5.042,P<0.05)。Western blot检测显示正常粘膜核基质的laminB1条带比癌核基质弱。结论laminB1蛋白在食管正常粘膜上皮及食管鳞癌组织中广泛存在。制备核基质后,laminB1蛋白在癌核基质的表达比正常粘膜上皮核基质强;且癌核基质中laminB1的分布与正常粘膜上皮核基质存在差异。     

魔芋试管苗移栽死苗原因分析及防治技术研究

分析了魔芋试管苗移栽过程中死苗的原因,主要是由没有经过药剂消毒所致。研究了农用链霉素、多菌灵等农药对试管苗的消毒效果,结果表明:单一药剂处理以农用链霉素效果最好,25 d之内发病率为0,30 d内发病率低于5%;其次是多菌灵,15 d之内发病率低于5%,30之内低于15%;冠菌清有一定的效果,但在30 d之内发病率达到了29.2%;威尔达甲托和百菌清单独使用对试管苗病害的发生没有效果,比不用药剂处理发病率更高;综合药剂处理以百菌清+农用链霉素和冠菌清+农用链霉素效果最好,30 d之内发病率均低于5%;多菌灵+威尔达甲托很差,仅比对照低24.6%,30 d之内发病率达到了56.2%。     

与大鼠Morris肝癌7777相关的染色质蛋白的免疫亲和层析分离与鉴定

 用5mol/L尿素,将大鼠Morris肝癌7777染色质解离为染色质非组蛋白 (UP组分)及染色质沉淀(UC组分)。UP(含90—95％非组蛋白)用免疫亲和层析(与大鼠Morris肝癌7777去组蛋白染色质抗体交联)分级,经2mol/L NaSCN及8mol/L尿素分部洗脱。将UP及UC,来自UP亲和层析的2mol/L NaSCN及8mol/L尿素洗脱组分同时进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。以大鼠Morris肝癌7777去组蛋白染色质抗体作探针,进行免疫显迹(Immunoblot)测定。在UP部分出现二条阳性带,分子量为:200K及116K。UC部分有三条染色不很深的阳性带,分子量为200K,118K及91K。来自UP亲和层析的2mol/L NaSCN及8mol/L尿素洗脱部分分别有一条浓而清晰的阳性带,分子量分别为74K及83K。用酶联免疫吸附法(E1isa)测试从UP凝胶上切割下的阳性区带,其免疫特异性显著。     

植物引种驯化过程中的病虫害问题及其防治对策

植物园在引种驯化过程中存在的病虫害问题是：病虫随植物的引种大量带入园区,且严重为害,造成很大损失;生境的改变及栽培管理的不当使植物的抗病虫能力下降;农药的过分使用,造成环境污染,病虫抗药性的产生及对有益生物的大量杀伤,破坏了自然界的生态平衡。防治对策提出了加强植物检疫及栽培管理、利用生物防治、合理使用化学农药等措施。     

鄂中丘陵平原村级生态农业类型分析

应用娄量化方法Ｉ和系统聚类法对鄂中丘陵平原村级生态农业类型进行了分析。结果表明,依据该区自然资源特点和生态农业建设现状,可将２５个村分成４种生态经济环境类型和８个生态农业类型,并提出了该区生态农业的发展模式。