人胰腺干细胞建系及移植诱导胰岛治疗大鼠糖尿病

供体不足已成为移植胰岛治疗Ⅰ型和部分Ⅱ型糖尿病的主要障碍,分离克隆胰腺干细胞作为种子细胞并诱导其分化为功能性胰岛可提供丰富的移植资源．本研究从人流产胎儿胰腺组织分离获得1例单克隆胰腺干细胞系．无菌取流产胎儿胰腺组织,0．1％Ⅳ型胶原酶消化分离为单个细胞和细胞团．低糖DMEM＋10％FBS培养,单个细胞和细胞团贴壁,原代上皮样胰腺干细胞克隆性生长．0．25％胰蛋白酶＋0．04％已二胺四乙酸（EDTA）消化传代,成纤维样细胞和其他细胞逐渐被消除,上皮样胰腺干细胞逐渐被纯化．克隆环筛选,获得单克隆人胰腺千细胞．在培养液中添加10ng／mL表皮生长因子（EGF）,单克隆人胰腺干细胞快速生长至单层,呈铺路石样．继续传代培养,1例来源于4月龄男性流产胎儿胰腺干细胞已传50代．液氮冷冻保存细胞1×10^9个以上．染色体核型分析,该干细胞系为正常的二倍体细胞．免疫组织化学反应,共表达pdx1,glucagon,nestin及CK19蛋白,不表达insulin,CD34,CD44及CD45．RT-PCR检测,转录pdx1,glucagon,nestin及CK19的mRNA,不转录insulin．β-巯基乙醇诱导,分化为神经细胞,免疫组织化学反应表达NF蛋白．烟酰胺诱导,分化为DTZ染色阳性,转录表达insulin,分泌insulin和C肽的功能性类胰岛．将单克隆人胰腺干细胞体外诱导胰岛移植在STZ制备的糖尿病大鼠肾囊内,能降低糖尿病大鼠血糖水平,延长寿命．     

影响枯草芽胞杆菌和荧光假单胞菌原生质体再生的因素

目的：为了提高再生率,对影响革兰阳性菌枯草芽胞杆菌KR株和革兰阴性菌荧光假单胞菌B13株原生质体再生的因素进行研究。方法：研究了酶解时间,再生方式,再生培养基中稳定剂的种类,Ca^2＋、Mg^2＋、琥珀酸钠、L-色氨酸的浓度及培养基的放置时间对KR和B13株原生质体再生的影响。结果：对KR株酶解20min,采用夹层培养,再生培养基中加入0.6mol/L蔗糖、0.03mol/L Ca^2＋、0.02mol/L Mg^2＋、0.3mol/L琥珀酸钠、0.2mol/L L-色氨酸,培养基在37℃放置72h,原生质体再生率可达42.7%;对B13酶解15min,采用夹层培养,培养基中加入0.6mol/L NaCl、0.02mol/L Ca^2＋、0.01mol/L Mg^2＋、0.3mol/L琥珀酸钠、0.1mol/L L-色氨酸,培养基在37℃放置48h,原生质体再生率可达15.3%。结论：影响革兰阳性菌枯草芽胞杆菌KR株和革兰阴性菌荧光假单胞菌B13株原生质体再生的因素是不同的。     

抗噬菌体菌株C224发酵生产2KG的条件试验

以ZKG生产菌株球状节杆菌K1022为出发菌株,选育出的抗噬菌体菌株C224发酵条件试验的实验结果表明:C224菌能利用淀粉水解糖、葡萄糖酸钙、葡萄糖发酵产生2KG;以葡萄糖为原料发酵生产2KG的条件为:接种量8％以上,250mL摇瓶装量20mL,31℃265r/min,振荡培养72h;发酵最佳配比组成为:葡萄糖18％,玉米浆1.65％,尿素0％,KH_2PO_4 0.0015％,CaCO_3 5％。     

钙蛋白酶嫩化肉类机理

本文综述了宰后肉成熟过程中肌原纤维的结构弱化及其原因,并阐述了钙蛋白酶使肉类嫩化理论。     

大白菜细胞质雄性不育系和其保持系的RAPD分析

利用RAPD技术对大白菜细胞质雄性不育系CMS341-7和其保持系3411-7的基因组DNA进行了比较分析,共使用了269个随机引物,其中有163个引物在两系之间都得到了扩增产物,79个引物扩增结果在两系之间表现出了遗传多态性。找到了不育系和保持系的特异扩增条带CMSOPL01670和MOPB04600。并对这些特异片段的来源及其在细胞质雄性不育中的作用进行了讨论。     

长鞭红景天中一个新的葡萄糖甙

从云南怒江产的长鞭红景天 (Rhodiolafastigiata (Hook .f.etThoms.)S .H .Fu)根茎中分离得到 13个化合物 ,它们的结构通过波谱和化学方法得到鉴定。其中 ,化合物 1被鉴定为新的葡萄糖甙 (2_O_β_D_吡喃葡糖基_3_甲基_戊酸甲酯 ) ,命名为长鞭红景天素甲 ,化合物 2和 5～ 9首次从该植物中分离得到     

蒸制温度对老年蔬菜类易食食品质构特性的影响

目的：研究蒸制温度对增稠后的老年蔬菜类易食食品质构特性的影响,确定增稠老年蔬菜类易食食品的最佳蒸制温度。方法：利用质构仪和冷冻离心机分别对增稠后的老年蔬菜类易食食品进行质构测试和持水力测试,分析比较不同蒸制温度条件下增稠食品的质构、硬度均一性和持水力。结果：90℃蒸制温度时样品硬度、硬度均一性和持水力均相对较低;100℃蒸制温度时样品硬度、硬度均一性和持水力均较好;110℃蒸制温度与100℃蒸制温度相比,样品硬度、硬度均一性和持水力差异不大;120℃蒸制温度时样品的硬度开始降低。结论：增稠蔬菜类易食食品最佳的蒸制温度温度为100℃。     

膳食来源中硒的生物利用率研究进展

介绍了硒元素对生物体的健康功效及不合理摄入硒对人体造成的危害,从硒在人体的吸收、转运角度解释了硒的生物利用率的含义,总结了硒在人体的吸收代谢情况、生物利用率的测定方法及当前研究现状、硒生物利用率的影响因素,初步得出补硒关键控制点,为提高硒的生物利用率提供理论依据。     

全基因组关联研究通路分析方法现状

全基因组关联研究(genome-wide association study, GWAS)自2005年首次发表以来已不断增进人们对疾病遗传机制的认识,结合系统生物学并改进统计分析方法是对GWAS数据进行深度挖掘的重要途径。通路分析(pathway analysis)将GWAS所检测的遗传变异根据一定的生物学含义组合为集合进行分析,有利于发现对疾病单独效应小却在通路中相互关联的遗传变异,更有利于进行生物学解释。当前通路分析在GWAS数据上已有较为广泛的应用并取得初步成果。与此同时,通路分析的统计方法仍在不断发展。本文旨在介绍现有直接以SNP为对象的GWAS通路分析算法,根据方法中是否采用核函数分为非核算法和核算法两大类,其中非核算法主要包括基因功能富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)和分层贝叶斯优取(hierarchical Bayes prioritization, HBP),核算法包括线性核(linear kernel, LIN)、状态认证核(identity-by-status kernel, IBS)和尺度不变核(powered exponential kernel)。通过介绍这些方法的计算原理和优缺点,以期为新算法的构建提供更好的思路,为GWAS领域研究方法的选择提供参考。     

肝细胞在HBx刺激和低氧压力时表达IL-2

肝细胞肝癌有极端坏的预后,主要归因于它的高转移性复发．我们曾经报道过对于乙型肝炎相关性肝癌患者,癌周组织的白介素2 (IL-2)水平越高就倾向于有更低的肝内转移复发率,而且IL-2的免疫组化显示主要着色于癌周的肝细胞．然而,是否肝细胞能在体外表达IL-2以及其内在机制仍未被揭示．本研究里,比较了有和没有肝炎病史的肝癌患者的癌周组织IL-2表达水平,然后在永生化的成人肝细胞THLE-2里过表达了乙型肝炎病毒x蛋白(HBx),并用过氧化氢处理模拟氧压力微环境．实验证实肝细胞在HBx刺激和低氧压力同时存在下能通过MAP3K7/NF-κB通路表达IL-2．研究结果提示靶向调节微环境氧化压力为预防和治疗乙肝相关性肝癌的转移复发提供了新的方向．