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催化吲哚生成靛蓝的细胞色素P450BM-3 定向进化研究 总被引:6,自引:0,他引:6
以催化吲哚产生的靛蓝在 630 nm 处具有特殊的吸收峰为高通量筛选指标,将来源于 Bacillus megaterium 的细胞色素 P450BM-3 单加氧酶的基因序列用易错聚合酶链式反应进行定向进化,通过多轮突变,在原有的能产靛蓝的高活力突变酶的基础上成功获得了三个高于亲本酶的突变酶,突变酶的酶活分别是亲本酶的 6.6 倍 (hml001) , 9.6 倍 (hml002) 和 5.3 倍 (hml003) ,并对突变酶的动力学参数进行了分析 . 突变酶 DNA 测序的结果表明, hml001 含有一个有义氨基酸置换 I39V , hml002 含有三个有义氨基酸置换 D168N , A225V , K440N , hml003 含有一个有义氨基酸置换 E435D ,这些突变位点有些远离底物结合部位,有些位于底物结合部位 . 相似文献
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胰腺干细胞生物学特性研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
胰腺干细胞是一类来源于胎儿或成年胰腺组织中的成体干细胞.多数研究认为胰腺干细胞体外培养时,贴壁生长,呈多角形上皮样,具有较高的扩增性;表达胰腺发育过程中的一些决定因子Pdx1、HNF3β、Ngn3、Th及Isll等,还共表达胰腺终末细胞释放的激素glucagon、insulin等,甚至共表达来源于其它胚层细胞的表达物CK19、nestin等;具有多分化潜能,其特点是在自然分化过程中,优先分化为胰腺组织细胞,在特定的条件下,也可转分化为其它组织细胞.胰腺干细胞生物学的不断深入研究,为分离、克隆胰腺干细胞及定向诱导其分化为功能性胰岛移植治疗人类糖尿病奠定了基础. 相似文献
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目的 了解医院应对流感大流行的能力。方法 通过现场调查方法调查6家二级及以上医院和5家一级医院。结果 (1)二级及以上医院呼吸相关科室医生218人(14.15 %),护士314人(19.26%),病床数469张(19.68%),呼吸机27台(36.99%);一级医院呼吸相关科室医生29人(14.79%),护士24人(35.29 %),病床数53张(22.27%); 呼吸相关科室医护人员比例除1家外,其余均低于1:2; 2家医院ICU病床数占整个医院总床数比例低于2%。(2)5家二级及以上医院设置了呼吸相关科室,5家一级医院设置了传染病接诊室。所有医院均能提供口罩和手套,棉纱口罩和N95口罩各有4家医院(36.36%)能够提供,部分医院能够提供洗手设备和洗手用品;2家医院为职工(18.18%)医院接种流感疫苗。(3)10家(91.91%)医院只储备部分个人防护用品,3家(27.27%)储备抗病毒药物。结论 目前医院应对流感大流行的能力有限。 相似文献
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利用光能驱动二氧化碳(carbon dioxide, CO2)还原生产化学品对于缓解环境压力、解决能源危机具有重要意义。光捕获、光电转化和CO2固定等作为影响光合作用效率的关键因素,同时也制约着CO2的资源化利用效率。为了解决上述问题,本文从生物化学与代谢工程相结合的角度,系统总结了光驱动杂合系统的构建、优化与应用,并从酶杂合系统、生物杂合系统以及杂合系统应用3个方面分析了光驱动CO2还原合成化学品的最新研究进展。在酶杂合系统方面,采用的策略主要有提升酶催化活性、增强酶稳定性等;在生物杂合系统方面,采用的方法主要包括增强生物捕光能力、优化还原力供应以及改善能量再生等;在杂合系统应用方面,主要阐述了光驱动CO2还原生产一碳含能化合物、生物燃料以及生物食品等。最后,从纳米材料(包括有机材料和无机材料)和生物催化剂(包括酶和微生物)两个方面,展望了人工光合系统的进一步发展方向。 相似文献
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