单克隆人胰腺干细胞分化特性的研究

研究1例来源于4月龄男性流产胎儿胰腺组织的单克隆人胰腺干细胞（monoclonal human pancreatic stem cell,mhPSC）系的体内外分化特性。将mhPSCs接种在铺有0．1％明胶的培养皿内,扩增培养3d后,加高糖DMEM诱导液诱导培养25d。相差显微镜下．观察细胞生长状况。采用双硫腙染色法、RT—PCR及葡萄糖刺激释放胰岛素和C肽实验．对体外定向诱导mhPSCs分化为功能性胰岛进行检测。将mhPSCs悬液注射在成年雄性裸鼠腹股沟皮下．注射30d时,取出移植物,采用SP法进行免疫组织化学反应,以检测mhPSCs的体内自然分化潜能。体外扩增培养,mhPSCs贴壁生长,呈多角形上皮样。生长至单层．呈“铺路石”状。体外定向诱导,细胞逐渐由多角形变成圆形,并聚集成类胰岛。诱导培养15d时．形成的类胰岛中少数细胞分化为B细胞,双硫腙染色阳性。诱导培养25d时,多数细胞分化为8细胞,双硫腙染色阳性,转录表达胰岛素的mRNA。用不同浓度葡萄糖刺激．诱导胰岛不仅释放胰岛素和C肽,而且其释放量随糖刺激浓度升高显著增加（0．01〈P〈0．05）。体内分化实验显示,mhPSCs在裸鼠背部形成类畸胎瘤。类畸胎瘤易与裸鼠分离,色白,血管丰富。显著表达pdx1、胰岛素、胰高血糖素、CK、MBP及NF蛋白。该研究结果证实单克隆人胰腺干细胞系体外定向诱导分化为包含大量β细胞的功能性类胰岛,在体内自然分化为胰岛、上皮及神经组织细胞。     

新型数值分类软件X-Cluster的开发及应用

针对目前常用数值分类软件的不足,采用多种设计模式开发了新型数值分类软件X-C luster。该软件具有界面友好、操作方便、体积小、速度快、功能强大、应用范围广等特点,能够满足大多数情况下数值分类研究工作的需求,并在芽孢杆菌分类研究中得到了验证。     

MMP - 9、VEGF、bFGF 在非何杰金淋巴瘤的表达及临床意义

目的：探讨MMP-9、VEGF、bFGF在非何杰金淋巴瘤（NHL）中的表达及意义。方法：免疫组化法。结果MMP-9、VEGF、bFGF在NHL中表达率分别为43．66％、33．80％、25．35％,均高于正常淋巴结组织中的表达,差异均有显著性（Pm=0．0023,Pv=0．001,Pb=0．0049）。组5年生存率明显低于MMP-9（-）组（P=0．008）。VEGF在T细胞型中表达率高于B细胞型（P=0．019）,VEGF阳性组治疗缓解率低（P=0．045）。巨块型NHL中bFGF表达率较高（P=0．028）,bFGF（＋）组5年生存率明显低于bFGF（-）组（P=0．041）。MMP-9、VEGF、bFGF之间无协同表达。结论：MMP-9、VEGF、bFGF在NHL中的表达高于正常淋巴组织,可能与淋巴组织恶变有关。MMP-9、bFGF均与生存期呈负相关,是NHL预后差的指标,联合检测更有助于判断预后。VEGF阳性组治疗效果差,提示VEGF阳性NHL患者加用VEGF靶向治疗可能会提高疗效。     

红豆杉(Taxus chinensis (Pilger) Rehd.)化学成分研究(简报)

自七十年代发现了紫杉醇（taxol）独特的抗癌机制一促进微管蛋白聚合、抑制微管蛋白解聚后,紫杉醇及其类似物紫杉烷类二该化合物的资源调查和化学研究倍受重视。紫杉醇主要存在于红豆杉科的大多数植物中,红豆杉科（Taxaceae）红豆杉属（TaxuS）植物全球大约有11种,我国有4种和1个变种。我们从采自湖北神农架的红豆杉（Tchinens周树皮中分离得到8个结晶性物质,本文报道其中已鉴定的3个成分,即taxinineJ（l）,ldiydroxybaccatinl（2）和taxol（3）。据文献报道,已经从红豆杉分离得到二十多种紫杉烷类化合物l'l,而我们分离得到的1和2…     

Ⅱ型糖尿病的红细胞膜GPA基因表达

为了研究Ⅱ型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜血型糖蛋白Ａ（ＧＰＡ）的基因表达,采用不连续聚蔗糖（Ｐｅｒｃｏｌ）密度梯度法分离１５名正常人和２５例ＮＩＤＤＭ患者外周血的网织红细胞,提取其总ＲＮＡ,继以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交观测此两组的红细胞膜ＧＰＡ基因的表达水平．采用碱性磷酸酶酶联免疫检测完成红细胞膜ＧＰ的Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹．结果表明,ＮＩＤＤＭ患者组红细胞膜ＧＰＡ的ｍＲＮＡ含量较正常人组显著增加（分别为１１．９２±１０．５和１０．１８±１．０８积分光密度,Ｐ＜０．０１）．免疫印迹图谱显示,有６例ＮＩＤＤＭ患者的区带３ａ、３ｂ界限模糊,３例的区带３ａ、３ｂ和４明显浅染．推测ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜ＧＰＡ减少可能引起其基因表达呈代偿性增强,而障碍或许出现在翻译环节上,这些与ＮＩＤＤＭ患者红细胞变形能力（ＲＣＤ）的明显降低甚为相符．     

戊唑醇对小麦纹枯菌超微结构的影响

用光镜和电镜技术研究了新型三唑类杀菌剂戊唑醇对小麦纹枯病菌发育的组织学和超微结构的影响,光镜和电镜观察发现戊唑醇处理导致病菌发生一系列变化：菌丝呈现念珠状异常膨大和缢缩,菌丝原生质体内液泡和电子致密体增多,菌丝细胞壁不规则加厚,部分菌丝的隔膜发育受阻成畸形,不能形成正常的桶孔隔膜和桶孔覆垫。有些菌丝原生质体内出现菌丝内套菌丝的现象,这些变化最终导致菌丝细胞解体死亡。     

中国秋海棠属植物的叶表皮特征及其分类学意义

在光学显微镜下,对中国秋海棠属(Begonia)植物7组52种2变种的叶表皮进行观察。结果表明秋海棠属植物叶表皮形态在属内组间具有较大的相似性,表皮细胞为多边形或近多边形,垂周壁平直或弓形,大多数种类表皮细胞内具有晶体,气孔器仅分布于下表皮,且以不等型为主。叶表皮综合特征,例如表皮细胞形状,表皮毛类型,表皮细胞内晶体的类型和形态,气孔器形态以及与一些种类独有特征的组合,在种间,尤其在近缘种之间具有明显的差异。     

非吞噬细胞NAD(P)H氧化酶生成的活性氧参与基因表达和信号转导

以前认为,NAD(P)H氧化酶仅存在于吞噬细胞,负责吞噬细胞呼吸爆发时产生活性氧(ROS)以杀灭微生物。现在发现正常非吞噬细胞也有NAD(P)H氧化酶,称之为类NAD(P)H氧化酶。该酶在生长因子和细胞因子的刺激下,介导非吞噬细胞产生胞内或胞外的ROS,通过此途径产生的ROS对细胞增殖、分化和血管形成和缺氧反应等生理过程至关重要。这些新的发现。有力地证明了ROS作为细胞“信号分子”和“基因表达开关”的积极作用,改变了过去只把ROS看作有害物的误解。     

脑内微透析采样技术及其在神经科学中的应用

作为一种新的在体化学采样技术,脑内微透析引起了神经科学家的关注。它与迅速发展起来的高灵敏度的微量分析技术相结合,实现了对体内细胞外环境中化学物质变化的动态监测,从而在神经科学领域获得应用。本系统地介绍了这一新技术的原理和方法,并扼要地介绍了一这一技术在神经科学中的应用及其取得的新进展,并结合本实验室的工作经验,对该技术存在的一些问题进行了讨论。