斑马鱼pax2a(-3.1 kb):eGFP转基因品系的构建

为了更好地了解脊椎动物肾脏的早期发育,本研究利用斑马鱼这一研究脊椎动物器官发育的理想模式生物,通过构建肾脏特异性pax2a荧光标记转基因品系以实现实时在体地观察斑马鱼前肾的发育过程。我们分析了斑马鱼pax2a基因的启动子,扩增出其翻译起始位点上游3.1 kb的基因组DNA,利用Tol2转座子系统,经胚胎显微注射及三代筛选,成功构建了一个稳定的pax2a(-3.1 kb):eGFP转基因鱼品系。此转基因品系的绿色荧光蛋白在3体节时期就可以标记出中间中胚层,并在后续体节时期的中间中胚层前端(第3体节至第5体节对应的部分),及24 hpf的肾管前端和中段表达,基本模拟了pax2a在斑马鱼早期前肾发育中的时空表达模式。本研究所获得的pax2a(-3.1 kb):eGFP弥补了已有pax2a转基因品系中报告基因无法准确标记出中间中胚层和前肾管前端的缺陷,是研究斑马鱼前肾早期发育的良好材料。     

云南锦鲤养殖场鲤浮肿病毒的鉴定及基因型分析

锦鲤睡眠病(Koi sleepy disease,KSD)是一种由鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)引起鲤科鱼类死亡的病毒性传染病,已经对世界鲤科鱼类养殖业造成危害。2016年,中国云南某锦鲤养殖场养殖的锦鲤出现以体表出血、眼睛凹陷、沉于池底昏睡为主要临床症状的疾病,发病水温为11℃~20℃,累计死亡率30%~50%。从该养殖场不同池塘采集两个样品,使用nested PCR和real-time PCR方法进行实验室诊断。结果表明,两个样品CEV检测结果均为阳性,发病锦鲤鳃和肾脏CEV病毒载量为250.02~1 332.94拷贝/250ng,鳃中CEV病毒载量约为肾脏的6~7倍。在排除寄生虫、细菌、SVCV和KHV感染后,推测CEV可能是引起此次云南锦鲤场发生疫情的病原,但还需回归感染实验做进一步验证。基于CEV P4a基因的遗传进化分析结果表明,此次从云南发病锦鲤检出的两个CEV毒株均属于IIa基因型,且与英国(R083株)和日本CEV毒株(CyPP-3)的遗传进化关系最近。     

孙氏腹针治疗肝气郁结型广泛性焦虑症患者的临床观察

目的:观察孙氏腹针治疗肝气郁结型广泛性焦虑症的临床疗效。方法:采用随机对照方法,将符合纳入标准的60例病例随机分为两组。试验组采用孙氏腹针腹一区、腹八区及常规针刺,对照组采用常规针刺。将随机对照的两组患者治疗前,治疗1周后,治疗2周后,治疗3周后的疗效进行对比,其中临床疗效以汉密尔顿焦虑量表评分减分率为评价标准。结果:以汉密尔顿焦虑量表评分减分率来评价疗效,试验组治疗3周后总有效率为93.33%,对照组治疗3周后总有效率为80.00%,经统计学处理,二者差异有显著性(P0.05)。结论:针刺孙氏腹针腹一区、腹八区治疗临床辩证为肝气郁结型的广泛性焦虑症,较单独使用常规针刺疗效显著,患者病情有明显好转;使用孙氏腹针治疗肝气郁结型广泛性焦虑症,可显著改善精神性焦虑,较单独使用常规针刺更有优势。     

鸭坦布苏病毒E蛋白结构与功能的研究进展

鸭坦布苏病毒病是一种由鸭坦布苏病毒（Duck tembusu virus, DTMUV）引起雏鸭出现神经症状、种鸭生产性能降低、蛋鸭产蛋性能大幅下降的传染性疾病。DTMUV编码3种结构蛋白（C, E, prM），其中E蛋白作为DTMUV重要的免疫原性蛋白，其各结构域的氨基酸位点突变可对病毒粒子的致病性产生不同影响。本文总结了目前关于DTMUV E蛋白的研究进展，包括结构特点和关键毒力位点分析、其在病毒入侵细胞过程的功能与诱导细胞凋亡等的最新研究、以及蛋白抗原表位的最新发现。为进一步探究DTMUV E蛋白的致病机理奠定理论基础。