噬菌体434单链阻遏蛋白高亲和力DNA配体的筛选和设计

单链阻遏蛋白R R_TRES是噬菌体434阻遏蛋白的衍生物,含有两个DBD(DNA结合结构域),一个是野生型噬菌体434的DBD-R,另一个是突变型DBD-R_TRES,二者用重组接头以头接尾的方式连接起来.R_TRES的α-3-螺旋中-1,1,2,5位DNA结合氨基酸分别为T,R,E,S. 利用核心序列是CATACAAGAAAGNNNNNNTTTATG的随机DNA库, 体外循环筛选R_TRES的DNA结合位点,将筛选到的群体克隆、测序.单链阻遏蛋白RR_TRES的亲和力测定表明,最适操纵区序列含有TTAC或TTCC(上述画线部分)时,K_d值在10^-12~10^-11mol/L的范围.天然噬菌体434阻遏蛋白与其操纵区的亲和力的K_d值在10^-9 mol/L数量级,与之相比,所筛选操纵区的亲和力明显提高.同时发现,亲和力大小还受到最适结合位点两侧碱基的影响,特别是5′位碱基的影响.根据R_TRES的识别特性,设计了共有序列为GTAAGAAARNTTACN或GGAAGAAARNTTCCN (R为A或G)的单链阻遏蛋白R_TRES R_TRE的操纵区序列.结果表明,它们之间有特异性结合,且亲和力也很高.此方法可望用于其他DNA结合蛋白新的结合特异性的筛选.     

种壳对大麦种子生理和成熟胚培养的影响及机理探讨Ⅱ

用30％PEG6000对大麦种子进行浸种等处理,并对其吸胀生理的多数指标进行了系统分析和检测,研究结果表明：种壳显著延缓种子的吸水进程;种壳对多数分子的渗漏有较大影响。N的渗漏主要来自胚乳,Mn^2 渗漏主要来自胚,种壳显著影响K^ 渗漏。去壳促使吸胀期间可溶性蛋白量和过氧化物酶同工酶的活性显著升高。吸胀使IAA、GA3含量提高,使胚乳中的ABA含量显著减少;去壳促进吸胀初期胚乳中的ABA、IAA、GA3含量,去壳减少吸胀后期胚中的ABA、IAA、GA3含量。种子去壳后吸胀24h有显著较高的萌发率、愈伤组织诱导率。     

锥花莸的核型研究

锥花莸 (ＣａｒｙｏｐｔｅｒｉｓｐａｎｉｃｕｌａｔａＢ .Ｃ .Ｃｌａｒｋｅ)属莸属 (ＣａｒｙｏｐｔｅｒｉｓＢｕｎｇｅ)的假莸组 (Ｓｅｃｔ.ＰｓｅｕｄｏｃａｒｙｏｐｔｅｒｉｓＢｒｉｑ .)。亚热带分布 ,产印度东北部、尼泊尔、不丹、缅甸北部、泰国 ,我国产云南东南、西南及南部 ,广西、四川、贵州也有分布。生长于海拔 6 50— 2 30 0ｍ的常绿阔叶林、混交林、箐沟疏林下 ,也常见于林缘、路旁、石灰岩山、干草地以及荒地等群落中。莸属不仅系统位置存在争议 (Ｃａｎｔｉｎｏ ,1 992 ) ,且近年来孢粉学 (Ｍｏｎｅｓ等 ,1 993)、形态学 (…     

香木莲有性生殖特性与其濒危机制的研究

针对香木莲（Manglietia aromatica Dandy)结籽率低以及野外实生苗稀少的现象。本文研究了香木莲雌配子体发育过程,花粉萌发力,开花生物学特性与种子结构的观察。结果表明,在雌配子体发育阶段存在以下退化现象：1）从大孢子母细胞开始减数分裂到功能大孢子形成阶段,在此过程中珠心内的功能结构发生退化,功能大孢子未能正常形成,仅残留有退化痕迹,退化率为27．9％;2）胚囊成熟时,受精前卵器细胞发生退化,退化率为80％,花粉萌发实验结果表明,在人工培养条件下具有正常萌发能力的花粉不足0．01％,这些都是香木莲结籽率低的重要原因,同时,香木莲的开花生物学特性限制了传粉的顺利进行。调查和研究的结果显示,人为的砍伐是造成香木莲种群急剧减少的直接原因;有性生殖障碍和生境破坏是制约香木莲种群更近的最主要因素,由此提出了对香木莲的拯救和保护对策,就地保护;研究并推广繁育技术,进行种群重建;进行迁地保护,保存尽可能多的种质资源。     

重组乙肝疫苗纯度高效液相层析(HPLC)测定方法的改进

为建立重组汉逊酵母乙肝疫苗HPLC检定方法,应用TSK－G5000PW检测系统测定汉逊酵母重组乙肝疫苗表面抗原的纯度,对不同样品处理液的配比浓度和处理时间分别进行了探讨,作者选用DTT／Tween-80作为样品处理效果优于DTT＋Tween-20,1:50Tween-80与0.1mol/L等量混合为样品处理液的适宜浓度。样品处理液与等量样品混匀时间介于35s-2min时,HPLC分离效果好,结果稳定。该处理液及处理时间对CHO细胞及Merck酿酒酵母重组乙肝疫苗表面抗原的HPLC纯度测定无影响。结果表明：现有的HPLC检测系统用0.1mol/L DTT与1：50 Tween-80等量混合处理后能有效地检测不同类型重组乙肝疫苗表面抗原的纯度。     

植物挥发性物质在蚜虫寄主定位中的作用

本文综述了植物挥发性物质的化学性质、研究方法及其在蚜虫寄主定位中的作用     

苎麻雄性不育系生化代谢和育性遗传研究

用不同温度和日长处理盆栽材料,测试苎麻雄性不育系的温光反应;于雌雄性器官发育期取盆栽植株顶部展开叶往下数第7叶,分析不育系的生化代谢;根据杂交及自交后代育性分离情况,鉴定不育系的不育性遗传方式.结果如下高温加速营养生长,而短日促进生殖生长,短日高温明显加快不育系的发育进度,但高温的促进作用随日长增加而减弱,以至消失.不育系的叶片粗蛋白质、氨基酸含量比可育系减少,尤其是天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、胱氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸和精氨酸减少明显,但游离脯氨酸含量增加.这些物质代谢的变化,可能是导致苎麻雄性不育的原因.不育系GS14-1、SS370、GSA-2、GS15-8和SS387等的不育性遗传与1对相对性状的遗传方式相符,已找到不育系的保持系和恢复系.     

几种生长调节剂对离体培养黄瓜子叶直接开花的作用(简报)

7～9d龄黄瓜无菌苗的完整子叶，经在添加不同生长调节剂的MS培养基上培养8～20d左右，其营养芽和花芽直接从子叶基部的表面长出，直接形成花的最高频率达25％，1．5mgL－1左右浓度的KT有利，而生长素一般不利于子叶上花的形成，单独添加亚精胺对花形成无促进作用。     

柯萨奇病毒A组10型研究进展

自2008年以来,由多种肠道病毒引起的手足口病已成为严重威胁中国婴幼儿健康的重大公共卫生问题之一。其中,肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CVA16)是引起手足口病的主要病原体。但2011年以后,中国手足口病的流行趋势发生了变化,柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CVA10)和柯萨奇病毒A组6型(coxsackievirus A6,CVA6)引起的手足口病呈增多趋势,在部分地区已替代EV71和CVA16成为引起手足口病的主要病原体,已引起越来越多的关注。现就CVA10的病原学、流行病学、实验室诊断、动物模型及疫苗相关研究作一综述。