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通粳1号水稻乙醛脱氢酶基因的克隆及原核表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:克隆通粳1号水稻乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)基因,并在大肠杆菌中进行体外表达。方法:提取通粳1号水稻幼根总RNA,RT-PCR法扩增ALDH基因开放阅读框架片段,双酶切后连接至pET5a表达质粒中,转化BL21(DE3)宿主菌,平板培养筛选,挑取阳性菌落并提取质粒,酶切、电泳鉴定插入片段并测定其序列。含重组质粒的BL21(DE3)进行常规LB扩大培养,用不同浓度的IPTG作用不同时间进行诱导表达,SDS-PAGE检测表达产物。结果:质粒中插入的ALDH片段为1668bp,含有完整的开放阅读框架,序列与GenBank比较无差异,插入方向正确无误,表达蛋白分子量为61.8kDa左右,符合预期值,IPTG最佳诱导时间为3h,0.1mmol/L~0.8mmol/L浓度的IPTG作用效果无显著差异。结论:该基因的成功克隆和表达为进一步研究水稻中ALDH的作用和应用生物工程法大量获得ALDH奠定基础。 相似文献
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甘肃藏族人群3个STR基因座的遗传多态性 总被引:2,自引:0,他引:2
通过D16S539、D7S820和D13S217 3个STR基因座合扩增,采用高分辨率的聚丙烯酰胺变性测序胶电泳分离,银染检测,对129名无关甘肃藏族个体进行遗传多态性研究。所有基因座经检验均符合Hardy-Weinberg平衡。在藏族人群中,观察杂合率分别是73.3%、81.4%和80.6%;PIC值分别是0.84、0.80和0.83;联合识别率是0.9999,联合亲子关系指数是7.09。结果显示该复合扩增体系在藏族人群中等位基因分布较好,适于法医个体识别及遗传学、人类学相关研究,所得数据与以前报道的汉族数据相比较,除D16S539基因座外,未发现显著差异性。 相似文献
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增强UV-B辐射对小麦体细胞分裂的影响 总被引:11,自引:0,他引:11
采用增强紫外线B(UV B)辐射处理 ,对冬小麦细胞染色体畸变及分裂的影响进行了研究。结果表明 :10 0 8kJ·m-2 ·d-1增强的UV B能抑制小麦细胞的有丝分裂频率 ,产生落后染色体、染色体桥、游离染色体、核变形等畸变。其中落后染色体和游离染色体较普遍 ,分别占总畸变率的 32 8%和 2 6 6 %。并在UV B诱导的小麦根尖细胞中发现染色体在有丝分裂的后期到末期分成 3束、4束和 6束等异常分裂现象 ,将之称为体细胞染色体的“多束分裂”(Multi bundledivision)或“分束分裂”(Partition bundledivision)。它们大体分布在两极 ,但两极上染色体“束”数有可能不同 ,同一“束”上染色体的数量也不完全相等。“束”之间未见有细胞壁的形成 ,因而导致产生“多束体”。 相似文献
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增强紫外—B对反枝苋形态、生理及异速生长的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
在田间条件下,模拟西安地区21.6%的臭氧层减薄,研究增强紫外-B辐射 280~320nm,3.18kJ·m-2·d-1 对双子叶阔叶杂草反枝苋 Amaranthusretroflexus 生理、形态及异速生长的影响.结果表明: 1 与对照相比,处理组的叶绿素、类胡萝卜素含量降低,但叶片紫外吸收物质的含量增加; 2 处理组的株高、叶数及单株重有明显降低; 3 株高与单株重的线性关系有较大的偏离,表现在同等株高下处理组的生物量低于对照.这些表明在补充的紫外-B条件下,反枝苋的形态有较大的可塑性,并进一步会影响该植物在群落中的竞争能力. 相似文献
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增强的UV—B辐射对麦田生态系统Mg和Zn累积和循环的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
近 2 0多年以来 ,UV B辐射增加对植物个体的影响受到了广泛的关注 ,而对植物群体和生态系统的影响仍然知道的很少[2 ] 。仅见UV B辐射对副极地石南灌丛和沙丘草地生态系统物种结构、生长、物候和叶分解等方面有报道[3,4 ] 。UV B辐射影响植物Mg和Zn吸收和运转[5~ 7] ,但对营养累积和物质循环的影响了解甚少[3] 。因此 ,大田条件下 ,植物群体和生态系统水平的营养累积和物质循环对UV B辐射的响应与反馈的研究 ,对于真实评估UV B辐射对生态系统的影响是必不可少的[2 ] 。UV B辐射对春小麦生长、生理、群体结构、植物营… 相似文献
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魏丽珠 伏洁 刘光陵 王晓燕 王兆全WEI Li-zhu FU Jie LIU Guang-ling WANG Xiao-yan WANG Zhao-quan 《遗传》1999,21(2):13-15
为了探讨神经肌肉性疾病的发病与线粒体DNA突变的关系,采用PCR技术检测了 20例患有不同神经肌肉性疾病儿童的外周血和骨骼肌细胞中的线粒体DNA(mtDNA),发现其中6例患儿有mtDNA缺失,其中1例至少有2968bp片段的缺失, 另5例至少有2000bp片段的缺失,此缺失区位于线粒体呼吸链复合物1、 4、5、编码区,表明该突变对神经肌肉性疾病的发生有一定作用。
Abstract:To understand the relation to mechanism of neuromuscular disease and mtDNA mutation,using PCR technique,we investigated blood and /or skeletal muscle of 20 patients with neuromuscular diseases.A deletion in the length of 2000~2968bp was found in blood mitochondrial DNA of 6 patients with neuromuscular disease.The deletion region partially lies in the coding region of resoiratony chain complex 1,4,5.It is suggested that this mutation ois related with neuromuscular diseases. 相似文献
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为培育优质的卷丹新种质,以秋水仙素诱变材料JD-h-15于田间种植3年分析鉴定染色体倍性。对JD-h-15和卷丹植株形态、柱头与花粉育性、叶表皮与淀粉粒特征以及鳞茎有效成分等进行比较,结合ISSR标记分析JD-h-15的遗传变异。结果表明,诱变株系JD-h-15已由非整倍的嵌合体恢复为3倍体植株。JD-h-15的株高、叶间距和叶面积与卷丹相比明显增加,茎粗和单株叶片数减少,单株花期提前约14 d。JD-h-15鳞茎独头率为93.75%,显著高于卷丹独头率70.00%。不同时期柱头可授性试验表明,JD-h-15在花苞生长至50-60 mm时表现出高于对照的活性。JD-h-15的花粉有13.71%可正常萌发,而卷丹花粉不萌发,与JD-h-15自交授粉后子房膨大相符。微形态分析表明,JD-h-15的花粉粒大于卷丹对照,气孔大小和密度与对照无差异,而珠芽和鳞茎淀粉粒小于对照。JD-h-15鳞茎中可溶性糖、总黄酮和总皂苷含量比对照分别增加42.37%、67.54%和45.65%,而抗坏血酸、总酚和总生物碱分别减少22.86%、33.02%和50.41%。ISSR标记分析发现3年生JD-h-15和... 相似文献
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高温胁迫对水稻剑叶光合和叶绿素荧光特征的影响 总被引:6,自引:0,他引:6
采用盆栽方法在人工气候箱内对超级杂交稻组合"天优998"4个生育期(抽穗期、乳熟期、蜡熟期和完熟期)分别进行5个高温处理(最高温度分别设定为32、35、38、40和42℃,日较差为6℃,每个处理为期5d,每天2h,以自然条件下生长的水稻为对照),研究了高温胁迫对水稻剑叶光合和荧光特征的影响。结果表明:高温对水稻剑叶光合和荧光特征具有显著影响,而且因高温处理、生育期、参数的不同而有差异,温度越高影响越大;高温处理后水稻剑叶叶绿素含量(SPAD)、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)下降,胞间CO2浓度(Ci)上升;光化学效率(Fv/Fm)、实际量子产量(ΦPSII)、表观电子传递速率(ETR)、光化学猝灭系数(qP)、PSⅡ光化学反应(P)下降,初始荧光(Fo)、非光化学猝灭系数(qN)、其他热耗散(E)上升;当最高温度大于35℃时,4个生育期的光合和荧光指标大多发生了显著变化,当最高温度大于38℃时,则大幅下降;抽穗期和乳熟期Pn、Gs下降显著、Ci上升显著,蜡熟期和完熟期SPAD下降显著,但高温下抽穗期、乳熟期水稻剑叶Fv/Fm的下降幅度和Fo的上升幅度比蜡熟期、完熟期大;高温胁迫对水稻剑叶Pn的影响比SPAD大,抽穗和乳熟期水稻剑叶Pn下降主要是由气孔因素引起,而蜡熟期和完熟期剑叶Pn的下降则主要是由非气孔因素所致。 相似文献
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通育粳1号水稻乙醇脱氢酶基因克隆与原核表达 总被引:1,自引:0,他引:1
克隆通育粳1号水稻乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)基因,并在原核系统中进行体外表达。取通育粳1号水稻幼根,提取总RNA,RT-PCR法扩增ADH基因开放阅读框架片段,双酶切后连接至pGEX-4T-1表达质粒中。将质粒转化至BL21(DE3)宿主菌中,平皿培养,挑取阳性菌落培养,提取重组质粒,酶切、电泳鉴定插入片段并测定其序列。pGEX-4T-1-ADH/BL21进行常规LB扩大培养,IPTG(1 mmol/L)作用2、3和4 h诱导表达,SDS-PAGE检测表达产物。结果显示,插入质粒中的ADH片段序列和方向正确无误,表达蛋白分子量符合预期值42 kD,表达至最大值的诱导时间为3 h。因此,该基因的成功克隆和表达为进一步研究水稻中ADH的作用和应用生物工程法大量获得ADH奠定基础。 相似文献