腺相关病毒介导基因组来源的基因转移与整合

构建一个带β-珠蛋白基因组序列的腺相关病毒载体AV53HS2Δβ2Neo.经包装成重组腺相关病毒后,转导红系细胞.DNA印迹证实包含红系增强子、β-珠蛋白基因和筛选标志基因的前病毒基因组完整整合于红系细胞基因组中.结果说明腺相关病毒载体能介导基因组序列来源的目的基因稳定整合于受体细胞基因组中.     

新疆蒙古族、锡伯族新生儿HbF中Gγ/Aγ、AγI/AγT比值测定及基因图谱分析

用HPLC法测定新疆蒙古族78例、锡伯族60例新生儿胎儿血红蛋白(HbF)中Gγ/Aγ以及AγI/AγT比值。%Gγ均值为:蒙古族73.99% ,锡伯族74.59%。%AγI均值分别为蒙古族56.04%和锡伯族64.33%。在蒙古族中发现AγT纯合体4例、杂合体12例;锡伯族中发现AγT杂合体6例。蒙古族中AγT基因频率(fAγT)为0.128,锡伯族为0.05。 Abstract: Gγ/Aγ、AγI/Aγ Ratios of fetal hemoglobin(HbF) in 138 cases of newborns of Megnol (n=78)and Sibo(n=60)ethnic groups in Urumuqi,Xinjiang were determined by HPLC.The means of % Gγ of Mongol and sibo ethnic groups were 73.99% and 7459% respectively.12 Aγ/T cases of heterozygotes in Mongol,6 in Sibo and 4 cases of AγT homozygotes in Mongol were found.The frequencies of AγT gene were 0.128 in Mongol and 0.05 in Sibo respectively.The means of AγT of Mongol and Sibo ethnic groups were 56.04% and 64.33% respectively.     

血红蛋白Iwata的一例报告

本文报道一例慢速α链不稳定血红蛋白变异体,在体外易被氧化为高铁血红蛋白。经结构分析证明为Hb Iwata [α87(F8) H(?) Arg],本例在我国属第一次报道。 Hb Iwata于1980年首先发现于日本,迄今未见有第二例报道。我们用醋酸纤维薄膜电泳,在内蒙古呼和浩特市的学生中普查时,发现一例慢速α链变异体,经结构分析证明为Hb Iwata [α87(F8)H(?)→Arg]。     

质粒pBR322在recA基因缺陷的大肠杆菌细胞内的遗传重组

使用琼脂糖凝胶电泳、DNA限制性内切酶水解以及电子显微镜等分析手段,证明在两株recA~-的大肠杆菌质粒pBR322转化子中,pBR 322 DNA的多倍周长环形寡聚物被大量合成。这个事实说明质粒pBR322 DNA在大肠杆菌细胞中的遗传重组似有独立于rec A基因的途径。本文介绍一个改进的大肠杆菌“清亮裂解液”制备法。按照这个方法制备的细菌清亮裂解液可排除染色体DNA的污染。     

贵州苗族新生儿HbF中Gγ/Aγ比值测定与AγT基因频率分析

用含Triton X-100的酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法测定了贵州省108例苗族新生儿脐带血胎儿血红蛋白(HbF)中Gγ/Aγ值.显示107例(占99.07%)新生儿的Gγ值在55-78%之间,均值与标准差为70.42±3.45;高Gγ值者1例(占0.925%);低Gγ值者未发现。用Large-pore Vydac C4柱反相高效液相层析法对108例样本进行了AγT基因频率（fAγT）分析,fAγT为0.0648。 The ratio of Gγ to Aγ of fetal hemoglobin inn 108 cord blood samples of Miao nationality newborns in Guizhou province was determined by the polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE).The result showed that one case had high Gγ value(0.925%) and 107 babies the normal Gγ values of 55 to 78%(70.42+3.45)。The AγT gene frequency(fAγT) analysis in 108 samples was done by high pressure liquid chromatography using a large pore Vydac C4 column,the fAγT was 0.0648.     

核酸化学结构的研究——Ⅰ.1-氟-2,4-二硝基苯与可溶性核糖核酸的反应

(一)本工作报告了FDNB与RNA的作用条件,并研究了不同断裂程度的RNA和FDNB的反应。(二)对DNP-在大肠杆菌S-RNA分子中的结合位置通过紫外线吸收光谱和牛胰RNase以及蛇毒磷酸双酯酶的降解作用做了探讨,由实验结果推断:DNP-似结合在S-RNA末端5′-G核苷酸的磷酸单酯上。(三)本文说明DNP-的结合量可以用来计算S-RNA的链长及分子量;也可以利用DNP-标记pG末端,以便利于该末端核苷酸排列顺序的研究。     

用RNase保护试验检测珠蛋白基因表达

mRNA的定量分析是基因表达调控研究中应用的重要方法.与斑点杂交、RNA印迹法相比,用RNase保护试验测定RNA具有灵敏度高、操作简便等优点.应用RNase保护试验成功地对转基因鼠中人βE-珠蛋白基因及鼠a-珠蛋白基因的表达水平进行了分析.     

天然高聚核糖核酸在溶液中的大分子结构

一、引言自从由烟草斑纹病毒(TMV)中分离出有感染性的核糖核酸(RNA)之后(Gierer 及 Schramm,1956;Fraenkel-Conrat,Singer 及 Williams,1957),首次说明了制备天然状态的自由高聚核精核酸的可能性。这就引起了这样一个问题:在溶液中这种天然 RNA 大分子的结构是怎样的。首先,似乎很可能分离出的病毒 RNA 在溶液中的天然构型和在完整的病毒中的是一样的。这是 Ginoza(1958)的主张。但是,后来的数据使得对溶液中感染性 RNA 的存在状态有了不同的看法。在溶液中,RNA 的多核苷酸链较其在病毒分子中时,     

一种简便的染色质免疫沉淀法的建立

染色质结构和基因表达调节是当前国际前沿研究的热点.染色质免疫沉淀法是研究染色质结构的首选方法,它不仅可用来研究体内反式因子与DNA的相互作用,也可以用来研究组蛋白修饰与基因表达的关系.综合国外相关文献,建立了一种简便的染色质免疫沉淀法,并通过对诱导前后的MEL细胞中β-珠蛋白基因簇组蛋白H3乙酰化的研究,证实了其可操作性.结果表明：高敏位点HS2和活跃基因βmaj的启动子区域存在较高的组蛋白乙酰化水平,且诱导前后变化显著,而不活跃基因Ey的启动子区域则几乎检测不到组蛋白的乙酰化,且诱导前后无明显变化.这一结果与以前的报道相吻合.     

病毒载体与造血干细胞基因治疗

多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体,结合优化的造血干细胞转导条件,其介导的腺苷脱氨酶缺陷引起的严重联合免疫缺陷和X染色体连锁的严重联合免疫缺陷的基因治疗已经获得初步成功;其他整合型病毒载体如慢病毒和腺相关病毒载体,也在临床前造血干细胞基因治疗研究中得到广泛应用。从病毒载体、基因转移和基因表达等几个方面综述了造血干细胞基因治疗的临床前和临床研究的重要进展。