内皮抑素转基因治疗子宫内膜异位症大鼠模型的实验研究

目的:了解内皮抑素(ES)转基因治疗子宫内膜异位症大鼠模型的疗效。方法:构建子宫内膜异位症大鼠模型,选择建模成功的大鼠为实验研究对象,随机分为ES转染组(I组)24只、载体对照组(Ⅱ组)20只和阴性对照组(Ⅲ组)20只。I组病灶局部注射lipofectamine-endo-pBud复合物进行基因转染,Ⅱ组注射lipofectamine-pBud复合物,Ⅲ组注射PBS用于对照。通过实时荧光定量PCR法检测异位病灶中ES基因的相对表达量,用Western-blot测定ES-HA融合蛋白及ES蛋白的相对表达量,来判断转染成功与否。用ELISA法对大鼠血清中ES及血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平进行测定,用免疫组化SP法对ES、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)以及微血管密度(MVD)的表达进行测定,用游标卡尺对转染前后各组大鼠异位病灶的长、宽进行测量,计算体积,分析各指标实验前后的差异,观察内皮抑素转基因治疗子宫内膜异位症大鼠模型的疗效。结果:注射相应试剂后2周,I组异位病灶组织中ES基因的相对表达量高于两对照组(P<0.05),有ES-HA融合蛋白表达,且ES蛋白的相对表达量显著高于两对照组(P<0.01);I组血清中ES水平显著高于两对照组(P<0.01),VEGF水平显著低于两对照组(P<0.01),三组ES与VEGF在血清中的表达水平呈负相关(r=-0.805);I组异位病灶组织中ES表达明显高于两对照组(P<0.01);MMP-2的表达明显少于两对照组(P<0.01);MVD明显少于两对照组(P<0.01);三组ES与MMP-2在异位内膜中的表达呈负相关(r=-0.700);I组异位病灶体积明显小于两对照组(P<0.01)。结论:阳离子脂质体LipofectamineTM2000介导的重组质粒endo-pBud病灶内直接注射法可以成功实现ES在子宫内膜异位症大鼠异位内膜中的表达,并对子宫内膜异位症大鼠模型有治疗作用。     

婴幼儿机械通气时使用右旋美托咪定和咪达唑仑的效果评价

目的:比较婴幼儿在机械通气镇静时使用右旋美托咪定和咪达唑仑效果。方法:收集我院2009年2月至2011年10月入住ICU需要机械通气且镇静时间大于24h的患儿60例,随机分为3组,每组20例,右旋美托咪啶1组(输注剂量为0.25μg.kg-1.h-1,D1组)、2组(输注剂量为0.5μg.kg-1.h-1,D2组)维持镇静,咪达唑仑组(输注剂量为0.05 mg.kg-1.h-1,M组)维持镇静。同时根据病情需要间断给予吗啡镇痛。镇静的疗效评估采用Ramsay镇静评分以及脑电双屏指数(BIS)评价。结果:60例患儿分为3组,每组20例,咪达唑仑组(M组)的输注持续时间(h)为22±8 h,0.25μg(D1组)和0.5μg(D2组)右旋美托咪啶组输注持续时间分别为21±10 h和22±9 h;M组的平均输注速率为0.22±0.05 mg.kg-1.h-1,D1组和D2组平均输注速率分别为0.28±0.07μg.kg-1.h-1和0.21±0.05μg.kg-1.h-1;三组差异无统计学意义。其中M组、D1组、D2组使用吗啡的剂量是分别为36 mg.kg-1.24h-1、29 mg.kg-1.24h-1和20mg.kg-.124h-1。D1组与M组使用吗啡的剂量差异无统计学意义。D2组与M组使用吗啡的剂量差异有统计学意义(P<0.05)。三组患儿BIS值和Ramsay评分监测差异无统计学意义。结论:右旋美托咪啶应用于婴幼儿是安全有效的,0.5μg.kg-1.h-1右旋美托咪啶组镇静更加有效,24小时吗啡的使用剂量显著减少。     

36例急性StanfordA型主动脉夹层动脉瘤的外科治疗体会

目的：总结急性StanfordA型主动脉夹层动脉瘤的外科治疗体会。方法：选择36例急性StanfordA型主动脉夹层动脉瘤患者,根据病变夹层破口的位置、累及范围、有无合并主动瓣关闭不全选择相应的手术方式,观察患者治疗后的临床疗效并随访治疗6个月后的临床预后。结果：3例患者术中死亡,术中死亡率为8．3％,平均手术时间156．7±56．7min,平均阻断时间98．5±32．7min,平均选择性脑灌注时1．756．1±20．7min,术后平均ICU住院时间6．2±3．8d,术后平均总计住院时间25．4±7．3d;术后6个月后随访．3例患者死亡,其余30例患者恢复满意,生活质量与治疗前相比,均得到显著提高。结论：急性Stanford A型主动脉夹层动脉瘤患者应积极施行早期外科治疗,术前快速准确诊断,根据患者病情制定相应的手术方案,术后采取措施避免术后并发症。     

pBR322-Red在大肠杆菌lac操纵子基因敲除和敲入中的应用

pBR32 2 - Red是一种新型重组工程系统 ,它携带了λ-噬菌体Red重组酶基因和一系列调控元件。对pBR32 2 Red最优重组条件进行探索后应用该质粒提供的体内同源重组功能 ,在菌株W3110体内 ,对染色体上的lac操纵子进行了基因修饰 ,包括 :①运用kan-sacB选择反选择方法和重叠引物方法敲除了阻遏基因lacI,②运用kan -sacB选择反选择方法和线性双链DNA介导的DNA重组方法将报告基因lacZ敲入lacA和lacY的位置 ,并且首次测定了报告基因lacZ在这三个结构基因位置的组成性表达情况。结果表明运用不同的重组策略 ,pBR32 2- Red系统都能方便有效地对大肠杆菌W3110染色体进行基因敲除和敲入修饰。     

蜘蛛抱蛋属（百合科）二新种

报道了在广西发现的2个百合科蜘蛛抱蛋属Aspidistra新种,即乳突蜘蛛抱蛋A. papillata G. Z. Li和环江蜘蛛抱蛋A. huanjiangensis G. Z. Li&Y. G. Wei。乳突蜘蛛抱蛋与大花蜘蛛抱蛋A. tonkinensis（Gagner. ）F. T. Wang&K. Y. Lang近缘。它们的共同特征是:花单生;花被裂片两侧彼此覆盖;柱头盾状,边缘3裂,上表面具3条辐射状沟缝。不同点是:乳突蜘蛛抱蛋植株较大花蜘蛛抱蛋的粗大;叶柄较粗;叶片椭圆形或长椭圆形;花被阔钟     

不同产地和生长季节喜树叶中喜树碱含量测定

喜树（Camptotheca acuminata）是我国特有抗癌植物。本文通过测定不同产地的喜树幼嫩叶和成熟叶中喜树碱含量表明,均以四川都江堰所产喜树叶中喜树碱含量最高。不同生长月份的喜树嫩叶中喜树碱含量成一条单峰曲线,以7月喜树嫩叶中喜树碱的含量最高。     

脉冲电磁场促进大鼠成骨细胞成熟与矿化依赖于NO/cGMP信号途径

脉冲电磁场(pulse electromagnetic fields, PEMFs)能够促进大鼠成骨细胞（rat osteoblast cells, ROB）成熟矿化,但是其作用机制并不明确。本实验主要研究PEMFs促进大鼠成骨细胞成熟矿化与NO/cGMP信号途径的关系,进而阐明PEMFs促进成骨细胞成熟矿化的机理。首先将成骨细胞经50Hz、0.6mT脉冲电磁场作用不同时间后,检测细胞培养液中一氧化氮(Nitric Oxide, NO)和细胞内3?-5?-环鸟苷一磷酸(3?-5?-cyclic-GMP, cGMP)的含量,以探明电磁场是否影响NO和cGMP的合成;其次,提取总蛋白,应用蛋白质印迹检测细胞内eNOS、iNOS和PKG-1的蛋白表达量;最后,利用NOS的阻断剂L-NAME抑制NO信号通路后,检测成骨性相关指标,包括碱性磷酸酶（ALP）活性、钙化结节数量、成骨性基因Bmp-2、Collagen-1、Osterix及破骨细胞调节因子Rankl基因的表达量。结果发现经PEMFs处理后,NO含量及cGMP含量均有明显升高;细胞内eNOS、iNOS和PKG-1蛋白表达量较空白对照组均有显著升高,说明PEMFs能够激活NO/cGMP信号途径。且经PEMFs处理的成骨细胞,ALP活性升高,BMP-2、Collagen-1和Osterix基因表达量显著增加,Rankl基因表达量下降,成骨细胞形成钙化结节的能力增强,当加入L-NAME,PEMFs引起的ALP活性增加、成骨性基因表达升高和钙化结节形成能力增强的趋势均被显著抑制。上述结果表明,经PEMFs处理成骨细胞成熟矿化过程中 NO/cGMP信号通路被激活;如该通路被抑制,则电磁场促成骨作用被抵消。说明脉冲电磁场促进成骨细胞成熟矿化依赖于NO/cGMP信号通路。     

广东高州普通野生稻与粳稻杂交F1花粉育性及其发育特点

以粳稻台中65为母本,高州普通野生稻141个编号材料为父本,成功组配72个粳野杂种F1,分别对杂种F1的结实率、花粉育性及其发育特点进行研究.结果发现,粳野杂种F1平均结实率为68.30%,变化范围为30.29%～94.05%,大部分在50%～80%之间;花粉平均育性为76.49%,最低为33.23%,最高为95.72%,大部分都高于70%,表现正常.花粉败育类型包括染败、典败、圆败和大小花粉粒;花药的平均裂药指数为3.87,接近正常.粳野杂种F1花粉发育过程与栽培稻基本一致,可分为8个时期,包括小孢子母细胞形成期、小孢子母细胞减数分裂期、小孢子早期、小孢子中期、小孢子晚期、二胞花粉早期、二胞花粉晚期和成熟花粉期.研究结果表明广东高州普通野生稻可能具有决定杂种F1花粉育性的不同基因,包括花粉不育中性基因等.     

广东高州普通野生稻与粳稻杂交F1花粉育性及其发育特点

以粳稻台中65为母本,高州普通野生稻141个编号材料为父本,成功组配72个粳野杂种F1,分别对杂种F1的结实率、花粉育性及其发育特点进行研究。结果发现,粳野杂种F1平均结实率为68.30％,变化范围为30.29％～94.05％,大部分在50％～80％之间;花粉平均育性为76.49％,最低为33.23％,最高为95.72％,大部分都高于70％,表现正常。花粉败育类型包括染败、典败、圆败和大小花粉粒;花药的平均裂药指数为3.87,接近正常。粳野杂种F1花粉发育过程与栽培稻基本一致,可分为8个时期,包括小孢子母细胞形成期、小孢子母细胞减数分裂期、小孢子早期、小孢子中期、小孢子晚期、二胞花粉早期、二胞花粉晚期和成熟花粉期。研究结果表明广东高州普通野生稻可能具有决定杂种F1花粉育性的不同基因,包括花粉不育中性基因等。     

广西苦苣苔科一新属——方鼎苣苔属

报道了在中国广西发现的苦苣苔科一新属即方鼎苣苔属Paralagarosolen Y. G. Wei 和一新种方鼎苣苔P. fangianum Y. G. Wei。方鼎苣苔属与细筒苣苔属Lagarosolen W. T. Wang近缘,它们的共同特征是花筒细筒状,不肿胀,柱头2;不同点是方鼎苣苔属叶基部有时盾状,聚伞花序具1朵花,花冠裂片顶端圆钝,蒴果宽卵状椭圆球形。