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21.
22.
从大白芸豆种子中,经过缓冲液抽提、硫酸铵沉降、蓝胶亲和色谱(AF-Blue HC-650M) 、离子交换色谱(CM-Sephadex C-25)、凝胶过滤色谱(Sephadex G-50)等步骤,分离纯化了一种具有一定抗真菌活性和抗肿瘤活性的凝集素,命名为WKBL.经SDS-PAGE显示, WKBL分子量为25 kD,N端序列为DAVLYRGPGDLHTGS,过碘酸-雪夫染色(PAS)呈红色. 凝血活性实验显示, WKBL凝血效果明显,但只有在60 ℃以下才具有凝血活性,而pH 对其活性影响并不大. D-半乳糖、D-果糖、D-葡萄糖、甘露醇能抑制WKBL的活性.WKBL为金属依赖型凝集素,LiCl、SnCl2和K2Cr2O7能抑制WKBL活性,但CaCl2、BaCl2、ZnCl2、CuCl2、FeCl3和MgCl2对WKBL活性却无影响.WKBL对白血病细胞K562的生长显示出较强的抑制作用,其IC50为15 μmol/L,对HeLa细胞呈现抑制作用,对HepG2细胞的抑制作用不明显. 抑菌实验显示, WKBL对瓜果腐霉病菌(Pythium aphanidermatum)、苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)、甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.nelonis)和葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)呈现出一定的抑制,但是其抑制率对浓度的依赖性并不高. 相似文献
23.
杜氏盐藻RuBisCO小亚基基因的克隆和分析 总被引:1,自引:0,他引:1
根据莱菌衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)、团藻(Volvox carteri)、伞藻(Acetabularia cliftonii)等生物的1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)的小亚基rbcS基因氨基酸的高度保守序列,设计一对简并引物,进行RT-PCR.209 bp的PCR产物经测序分析及进行氨基酸序列同源性比对,表明克隆的序列为盐藻rbcS基因的cDNA片段.根据该序列信息,采用RACE(rapid amplification of cDNA ends) 方法扩增其5'上游未知区和3'下游未知区.5'RACE得到的cDNA长度为约300 bp,3'RACE得到的长度约380 bp.三段序列拼接后cDNA全长为878bp,其中开放读码框包括190个氨基酸.此cDNA序列,推导成氨基酸序列与已知物种的rbcS基因相比对,同源性分别为V.carteri 78%,C.reinhardtii 75%,A.cliftonii 67%,据此可推断所克隆的序列为盐藻RuBisCO的小亚基cDNA序列,GenBank收录号为AY739272. 相似文献
24.
25.
26.
重组小鼠canstatin N端片段对鸡胚新生血管生成的抑制作用(英) 总被引:2,自引:0,他引:2
为了研究重组小鼠canstatin N端片段的体内抗血管生成活性, 通过PCR扩增小鼠canstatin N端片段cDNA,定向克隆于原核表达载体pET30a(+)中,构建小鼠canstatin N端片段重组表达载体pET-mCanN, 转化E.coli BL21(DE3), IPTG诱导表达,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹检测小鼠canstatin N端片段的表达. 结果表明,IPTG诱导原核表达载体pET-mCanN在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中高效表达, 小鼠canstatin N端片段表达量约占菌体总蛋白量的18%, 小鼠canstatin N端片段主要以包涵体形式存在,包涵体经过洗涤、裂解、Ni-spin column亲合柱层析以及蛋白质复性等步骤纯化后,获得了纯度约为92%的重组小鼠canstatin N端片段. 鸡胚绒毛尿囊膜(chicken embryo choriollantoic membrane,CAM)实验表明,原核表达的小鼠canstatin N端片段能有效地按剂量依赖的方式抑制鸡胚新生血管的形成. 相似文献
27.
28.
木霉T6木聚糖酶固态发酵中试生产条件研究 总被引:2,自引:0,他引:2
木聚糖酶 (XylanaseEC .3.2 .1 .8)是一类重要的木糖苷键水解酶 ,对于降解半纤维素起着重要作用[1,2 ] 。该酶在工业上具有巨大的潜在应用价值。在饲料工业上 ,该酶可以提高畜禽对饲料的利用率[3 ] ;在食品工业上 ,该酶的水解产物寡木糖是一类保健食品[4] ,还可用于制备食品增稠剂和澄清果汁 ;在制浆造纸工业上 ,纸浆经过木聚糖酶处理后 ,可降低卡伯值 ,减少含氯漂白剂用量[5 6] ,从而降低环境污染。国外对木聚糖酶的研究起步较早 ,美国、加拿大等发达国家已经进入商品化生产 ,市场需求不断扩大。国内也有对该酶生产的研究 ,但未… 相似文献
29.
水分胁迫期间及胁迫解除后桃树叶片中的碳水化合物代谢 总被引:16,自引:0,他引:16
水分胁迫期间、盆栽桃幼树叶片中淀粉和蔗糖含量降低,山梨醇、葡萄糖和果糖则升高;淀粉酶、6-磷酸醛糖还原酶(A6PR)、酸性转化酶(AI)和蔗糖合酶(SS)涤性升高,ADPG焦磷酸化酶(ADPGPPase)、中性转化酶(NI)、山梨醇脱氢酶(SDH)和磷酸蔗糖合酶(SPS)的活性降低。胁迫解除后,淀粉和葡萄糖含量恢复,山梨醇和果糖仍高于对照;A6PR、SDH和ADPGPase活性维持在原水平上;淀粉酶活性恢复;SPS活性增加而AI活性降低。 相似文献
30.
为了解燕山-太行山区黑带食蚜蝇不同地理种群的遗传分化及其谱系地理格局,对河北、内蒙古、山西、河南等地样本的线粒体DNA-COI基因片段进行扩增和测序,成功得到36条黑带食蚜蝇COI基因序列,其片段长度为658 bp,平均A+T含量(69.9%)明显高于C+G含量(30.1%),没有插入和缺失现象。对这些COI基因序列进行分析,结果显示,雾灵山种群具有较高的种群遗传多样性。AMOVA分析表明,黑带食蚜蝇遗传分化主要来自种群内部。Mantel检验结果显示,各种群的遗传距离和地理距离之间相关性不显著(P=0.639),不符合地理隔离模型的推断。使用最大似然法构建系统发育树,结果表明:河北承德雾灵山种群中的单倍型Hap3独立为一支;对各种群的分歧时间进行估计,发现其分歧时间大约在0.02~0.94 Ma,处于更新世,部分种群间未发生分化。据此推测,燕山-太行山区黑带食蚜蝇的分化可能是由第四纪冰期气候的反复变化导致的,且雾灵山应为该地区黑带食蚜蝇在第四纪最后一次冰期的重要避难所之一。 相似文献