萝卜品种指纹图谱SRAP与AFLP分析

应用SRAP与AFLP两种分子标记技术进行了萝卜品种鉴定分析。对萝卜基因组DNA的SRAP-PCR反应体系中引物、Mg2 、dNTPs浓度进行优化,确定最优体系为引物0.3μmol.L-1,dNTP 0.2 mmo.lL-1,Mg2 3.0 mmo.lL-1。对SRAP-PCR中的退火温度(50℃)设置了12个梯度处理,以em2-me2为引物时带型无明显差异。7个供试萝卜材料的SRAP和AFLP指纹图谱分析表明,供试材料均可被SRAP和14个AFLP引物准确鉴定,每对引物组合都产生独特的指纹图谱。11个SRAP引物组合共产生155条带,多态性条带84条。聚类分析与相对遗传距离(GD)表明,供试材料聚为4类,CB-03-2与SHCB-02-1亲缘关系最近(GD=0.054 9);齐虹大连和Heiseng的亲缘关系最远(GD=0.203 4)。基于16个AFLP标记引物组合分析结果表明,供试材料聚为3类,CB-03-2和SHCB-02-1的亲缘关系最近。SRAP与AFLP综合分析结果表明,供试材料可聚为3类,其中CB-03-2与SHCB-02-1亲缘关系最近(GD=0.047 6)。     

禾谷镰刀菌胞外多糖诱导SGC-7901细胞凋亡作用及其机制研究CSCD

为了探究禾谷镰刀菌胞外多糖(exopolysaccharides from Fusarium graminearum,FGEPS)抗人胃癌细胞SGC-7901作用及其可能的机制,本研究利用液体培养基对禾谷镰刀菌进行发酵培养,通过醇沉、脱色、脱蛋白和透析分离得到胞外多糖,并通过高效凝胶渗透色谱、红外光谱和紫外光谱对其进行分析。采用CCK-8法分别检测FGEPS对人胃癌细胞SGC-7901、BGC-823和MGC-803的增殖抑制作用,通过AnnexinV-FITC/PI、Hoechst 33258及JC-1染色分析FGEPS对筛选出的SGC-7901细胞凋亡的影响,进一步通过Western blot法检测促凋亡蛋白Bax、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和抑凋亡蛋白Bcl-2的表达水平。结果表明从禾谷镰刀菌发酵液中分离出的胞外多糖具有多糖特征吸收峰,不含有多肽核酸类物质,液相色谱显示含有4个多糖组分。CCK-8结果显示FGEPS对SGC-7901细胞的抑制效果最为显著,能显著降低SGC-7901细胞线粒体膜电位,诱导细胞核染色质浓缩,并产生凋亡小体(P<0.05或P<0.01)。FGEPS能上调SGC-7901细胞中促凋亡蛋白Bax、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9表达(P<0.01或P<0.001),下调抑凋亡蛋白Bcl-2表达(P<0.001)。综上所述,我们从禾谷镰刀菌发酵液中首次分离出的FGEPS能通过线粒体途径诱导SGC-7901细胞发生凋亡。     

Expression of tPA, LH receptor and inhibin α, β_A subunits during follicular atresia in rats

By using DNA 3'-end labeling, immunocytochemistry and mRNA in situ hybridization detection techniques, the expression of inhibin subunits and LH receptor in the granulosa cells and tissue-type plasminogen activator (tPA) in the oocytes has been studied in relation to follicular development and atresia. The results demonstrated that: (ⅰ) tPA activity in the oocytes of normal developing follicles is undetectable, and increases significantly in the follicle undergoing atresia; (ⅱ) the production of inhibin subunits in granulosa cells is negatively correlated with the expression of oocyte tPA activity, indicating that they may be an important regulator of oocyte tPA production and follicular development; (ⅲ) in atretic follicles, granulosa cells do not express LH receptor and inhibin subunits. It is therefore suggested that tPA may play a role in oocyte self-destruction and clearance in some of atretic follicles, and inhibin of granulosa-origin might be an inhibitory factor for the translation of tPA in     

生物工程制品仅仅是“涓滴细流”吗

纽约新闻:很多家报纸欢呼1984年将是生物工程制品纷纷流向市场的年度。但是大多数工业评论家认为这仅仅是开始的一股有希望的细流。 除去新的研究制品外,今年主要的生物制品是属于用单克隆抗体,或DNA探针来诊断人类疾病这一范围的。这类产品是以下几家公司制造的:Centocor,Hybritech,Monoclonal Antibodies,Genetic Systems,Enzo Biochem,等等。加利福尼亚州圣地     

MMP2在胃癌侵袭和转移中的作用

目的 探索MMP2在胃癌侵袭和转移中的作用,以期为胃癌转移提供新的预测指标及治疗靶点。方法 选择胃癌细胞系MKN-1转染慢病毒,使MMP2低表达,获得细胞系sh-MMP2,并通过RT-PCR及Western Blot检测转染后MKN-1细胞中MMP2表达情况。进一步通过细胞划痕实验、Transwell、CCK8实验分别检测MMP2低表达后细胞迁移能力、侵袭能力、增殖能力变化。利用裸鼠建立sh-MMP2细胞系异种移植模型及转移模型,观察MMP2低表达后体内肿瘤生长变化及体内转移能力变化。通过RT-PCR及Western Blot检测MMP2对EMT及细胞凋亡的影响。结果 MMP2低表达后胃癌细胞迁移能力(P<0.05)、侵袭能力(P<0.01)、增殖能力(P<0.05)均下降。体内实验结果显示MMP2低表达可显著减缓肿瘤生长及体内转移(P<0.01)。进一步实验表明降低MMP2的表达,可抑制细胞EMT过程并增加细胞凋亡。结论 MMP2低表达可通过抑制EMT过程及增加细胞凋亡,减弱胃肿瘤细胞迁移能力、侵袭能力和增殖能力,抑制胃癌的发展。     

萝卜总RNA提取与mRNA差异显示技术

以萝卜幼小花药与叶片为材料,初步建立了mRNA差异显示技术体系.4种提取总RNA方法中,改进的SDS/酸酚法比CTAB/酸酚法和SDS/碱酚法更合适;改进的热硼酸法(HB)提取的RNA质量也较高,但所需时间较长,成本较高.以改进的SDS/酸酚法获得的RNA进行纯化后,其OD260/OD280在2.0～2.2之间,表明RNA样品杂质较少;总RNA进行反转录与差异显示分析表明,高分辨力的cDNA片段在100～380 bp之间.     

有机磷水解酶的表面显示技术研究进展

有机磷化合物在农业中的广泛应用,给农作物带来增产的同时对环境造成污染,严重威胁着人类的健康,其生物解毒已受到高度重视.有机磷水解酶(OPH)是目前处理有机磷化合物最有效的水解酶类,而通过基因工程手段获得高表达、高降解效率的OPH,尤其是OPH的表面显示技术是近年来的研究热点.主要综述了大肠杆菌、假单胞菌、酿酒酵母的OPH表面显示技术研究及应用进展和发展趋势.     

屎肠球菌降胆固醇作用的初步研究

血液中胆固醇含量增加会严重威胁人类健康。利用皂化-比色法检测了22株屎肠菌株体外降胆固醇的能力,结果显示屎肠菌株的胆固醇去除率在85.93%~21.25%之间。选取3株胆盐耐受能力较好的菌进行后续研究,其中,屎肠球菌SP5-6L的耐酸能力较差;JS2和ML13-5菌株具有一定的耐酸和耐胆盐能力;3株菌株的胆盐水解酶活性都很高。在0.3%胆盐培养基中,屎肠球菌的胆固醇去除率不同,其中ML13-5菌株的去除率由52.71%增加到68.01%。此外,屎肠球菌无溶血性,但其抗药性各有不同。本文对屎肠球菌降低胆固醇的机制进行了初步研究,为进一步利用其开发相关功能性食品和药物提供了依据。     

Fec基因及BMPR-IB基因的突变特性与生物学意义

FecB基因位于Booroola绵羊的常染色体上,具有提高排卵率和产羔数等生物学作用。FecB基因已被定位在绵羊6号染色体6q23~q31的狭窄区域内,并且已从分子水平上找到了控制Booroola绵羊排卵数的主效基因。本文详细阐述了近年来对FecB基因的定位及分子生物学作用机制方面的研究进展。     

大数据思维及其在生物医学领域的应用

随着大数据时代的来临,大数据思维也逐渐兴起。大数据的特点可以用4V来总结:volume(大量化)、variety(多样化)、velocity(快速化)及value(价值)。大数据思维的特点可以总结为整体性、容错性、相关性和智能性,这些特点也是大数据思维与小数据思维的主要区别。大数据思维在生物医学领域的应用越来越多,最普遍常用的就是NCBI数据库,在NCBI数据库中挖掘有价值信息的过程本身就是大数据思维,还有Meta分析和TCGA数据库的兴起都说明了大数据思维在生物医学领域的巨大应用价值。